| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 上篇 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 香蕉枯萎病研究概况 | 第10-13页 |
| 2 真菌遗传转化研究方法 | 第13-15页 |
| 3 MAPK信号传导途径 | 第15-18页 |
| 4 fmk1基因的研究背景 | 第18-19页 |
| 5 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 下篇 研究内容 | 第20-79页 |
| 1 材料与方法 | 第20-53页 |
| ·材料、试剂和仪器 | 第20-23页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要培养基及试剂配方 | 第21-22页 |
| ·仪器 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-53页 |
| ·Fofmk1基因的PCR和RT-PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·Fofmk1基因同源臂的克隆 | 第24-29页 |
| ·Fofmk1基因敲除载体的构建 | 第29-35页 |
| ·香蕉枯萎病原生质体转化 | 第35-37页 |
| ·转化子的鉴定 | 第37-42页 |
| ·Fofmk1基因突变体菌株的表型观察 | 第42-44页 |
| ·Fofmk1基因突变体的致病力测定 | 第44-46页 |
| ·香蕉苗根部附着试验 | 第46页 |
| ·香蕉苗根部侵染试验 | 第46页 |
| ·Fofmk1基因突变体粗毒素测定试验 | 第46-47页 |
| ·Fofmk1突变体中致病相关因子转录水平检测 | 第47-48页 |
| ·Fofmk1基因功能回复验证 | 第48-53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-73页 |
| ·目的基因的PCR和RT-PCR扩增 | 第53页 |
| ·同源臂的PCR扩增 | 第53-54页 |
| ·同源臂的PCR克隆 | 第54页 |
| ·FOC4-Fofmk1-A-pCT74重组质粒的酶切鉴定 | 第54页 |
| ·FOC4-Fofmk1-A-pCT74-B重组质粒的酶切鉴定 | 第54-55页 |
| ·原生质体的制备 | 第55页 |
| ·转化子的分离纯化及鉴定 | 第55-59页 |
| ·转化子的分离纯化 | 第55页 |
| ·转化子的PCR检测 | 第55-58页 |
| ·Southern检测 | 第58页 |
| ·RT-PCR检测 | 第58-59页 |
| ·Fofmk1基因突变体菌株的表型观察 | 第59-65页 |
| ·突变体菌落形态观察 | 第59-60页 |
| ·生长速率和产孢量测定 | 第60页 |
| ·突变体菌丝和孢子形态观察 | 第60-61页 |
| ·孢子萌发 | 第61-62页 |
| ·纤维素酶活力平板测定试验 | 第62页 |
| ·果胶酶活力的测定 | 第62-64页 |
| ·过氧化氢耐受性分析 | 第64页 |
| ·玻璃纸试验 | 第64-65页 |
| ·Fofmk1基因突变体的致病力测定 | 第65-67页 |
| ·离体叶片的致病性测定 | 第65页 |
| ·香蕉假茎的致病性试验 | 第65-66页 |
| ·香蕉苗浸根致病性试验 | 第66-67页 |
| ·盆栽苗致病性测定试验 | 第67页 |
| ·香蕉苗根部附着试验 | 第67-68页 |
| ·香蕉苗根部侵染试验 | 第68-69页 |
| ·Fofmk1基因突变体粗毒素测定试验 | 第69页 |
| ·Fofmk1突变体中致病相关因子转录水平检测 | 第69-70页 |
| ·互补载体的构建 | 第70-71页 |
| ·互补片段的PCR扩增 | 第70-71页 |
| ·Re-Fofmk1-T重组质粒的酶切鉴定 | 第71页 |
| ·互补载体酶切验证 | 第71页 |
| ·互补转化子的鉴定 | 第71-72页 |
| ·互补转化子的功能回复验证 | 第72-73页 |
| 3 讨论 | 第73-79页 |
| ·Fofmk1基因敲除载体的构建 | 第73页 |
| ·Fofmk1基因敲除和转化子的鉴定 | 第73-74页 |
| ·Fofmk1基因缺失对香蕉枯萎病菌表型的影响 | 第74-75页 |
| ·Fofmk1基因缺失对细胞壁降解酶的影响 | 第75页 |
| ·Fofmk1基因缺失对侵染性生长(invasive growth)的影响 | 第75页 |
| ·Fofmk1基因缺失对香蕉枯萎病菌致病力的影响 | 第75-77页 |
| ·Fofmk1基因缺失对粗毒素的影响 | 第77页 |
| ·Fofmk1突变体中致病相关因子转录水平检测 | 第77-78页 |
| ·转化子的互补实验 | 第78-79页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-87页 |
| 附录一 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
