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纤维堆囊菌中丙酮酸激酶与埃博霉素合成关系研究

目录第1-9页
摘要第9-10页
ABSTRACT第10-14页
第1章 绪论第14-26页
   ·纤维堆囊菌介绍第14-15页
     ·纤维堆囊菌第14页
     ·纤维堆囊菌的次级代谢产物第14-15页
   ·埃博霉素介绍第15-19页
     ·埃博霉素的结构与性质第15-16页
     ·埃博霉素应用前景第16-17页
     ·埃博霉素合成酶基因第17-18页
     ·埃博霉素的合成前体第18-19页
   ·丙酮酸激酶第19-23页
     ·丙酮酸激酶简介第19页
     ·丙酮酸激酶测定方法第19页
     ·丙酮酸激酶同分异构体第19-20页
     ·丙酮酸激酶抑制剂第20-22页
     ·丙酮酸激酶激活剂第22-23页
   ·选题依据和意义第23页
   ·本课题研究内容第23-26页
第2章 效应剂浓度的确定第26-38页
   ·引言第26-27页
   ·实验材料第27-29页
     ·菌株第27页
     ·实验仪器第27页
     ·实验试剂第27-28页
     ·培养基第28-29页
   ·实验方法第29-32页
     ·纤维堆囊菌So2161的培养第29页
     ·效应剂浓度的可行性实验第29页
     ·粗酶液提取和酶活测定第29-31页
     ·胞外乳酸脱氢酶和丙酮酸激酶酶活测定第31页
     ·效应剂专一性验证第31-32页
   ·实验结果第32-36页
     ·考马斯亮蓝标准曲线的制作第32-33页
     ·抑制剂VK_3效应浓度的确立第33-34页
     ·激活剂效应浓度的确立第34-35页
     ·胞外乳酸脱氢酶和丙酮酸激酶酶活测定第35页
     ·效应剂专一性验证第35-36页
   ·本章小结第36-38页
第3章 效应剂对菌体生长,pH及还原糖的影响第38-48页
   ·引言第38页
   ·实验材料第38-39页
     ·菌株第38页
     ·实验仪器第38页
     ·实验试剂第38-39页
     ·培养基第39页
   ·实验方法第39-41页
     ·纤维堆囊菌So2161发酵培养第39页
     ·菌体干重测定第39-40页
     ·pH测定第40页
     ·还原糖含量测定第40页
     ·维生素K_3稳定性分析第40-41页
     ·果糖-1,6-二磷酸稳定性分析第41页
   ·实验结果第41-45页
     ·效应剂对菌体量的影响第41-42页
     ·效应剂对pH值的影响第42页
     ·效应剂对还原糖含量的影响第42-43页
     ·维生素K_3稳定性分析第43-44页
     ·果糖-1,6-二磷酸稳定性分析第44-45页
   ·本章小结第45-48页
第4章 丙酮酸激酶酶活力及其对胞内丙酮酸浓度、埃博霉素合成能力的影响第48-56页
   ·引言第48页
   ·实验材料第48-49页
     ·实验仪器第48页
     ·实验试剂第48-49页
   ·实验方法第49-50页
     ·丙酮酸激酶酶活测定第49页
     ·胞内丙酮酸含量测定第49-50页
     ·埃博霉素标准曲线绘制第50页
     ·埃博霉素产量测定第50页
   ·实验结果第50-54页
     ·丙酮酸激酶酶活力测定第50-51页
     ·胞内丙酮酸含量测定第51-52页
     ·埃博霉素标准曲线测定第52-53页
     ·效应剂对埃博霉素产量的影响第53页
     ·效应剂对单位菌体埃博霉素产量的影响第53-54页
   ·本章小结第54-56页
第5章 发酵过程中丙酮酸激酶基因转录水平分析第56-66页
   ·引言第56页
   ·实验材料第56-58页
     ·菌株第56页
     ·实验仪器第56-57页
     ·实验试剂第57页
     ·实验试剂盒及专用材料第57-58页
     ·培养基第58页
   ·实验方法第58-61页
     ·纤维堆囊菌So2161总DNA的提取第58页
     ·引物设计第58-59页
     ·总RNA提取第59-60页
     ·cDNA的合成第60-61页
     ·PK基因Q-PCR分析第61页
   ·实验结果第61-64页
     ·引物确定第61-62页
     ·RNA浓度及纯度测定第62-63页
     ·pyksce4540,pyksce5197和TE基因表达量分析第63-64页
   ·本章小结第64-66页
全文总结与展望第66-68页
参考文献第68-74页
致谢第74-76页
在学期间主要科研成果第76页

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