摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-16页 |
1 国内外研究现状 | 第11-15页 |
·气味信息化合物 | 第11页 |
·昆虫气味受体功能 | 第11-15页 |
2 中红侧沟茧蜂的应用 | 第15-16页 |
第二章 中红侧沟茧蜂触角cDNA文库的构建 | 第16-24页 |
摘要 | 第16-17页 |
1. 材料与方法 | 第17-19页 |
·供试虫源与主要试剂 | 第17页 |
·中红侧沟茧蜂触角总RNA的提取 | 第17页 |
·第一链cDNA的合成 | 第17-18页 |
·LD-PCR合成双链cDNA | 第18页 |
·双链cDNA的分离 | 第18-19页 |
·ds cDNA质量鉴定 | 第19页 |
2 结果与分析 | 第19-22页 |
·总RNA提取 | 第19-20页 |
·双链cDNA的合成 | 第20页 |
·文库质量检测 | 第20页 |
·EST序列分析和功能注释 | 第20-22页 |
3. 讨论 | 第22-24页 |
第三章 中红侧沟茧蜂嗅觉受体的克隆和分析 | 第24-44页 |
摘要 | 第24页 |
1. 材料与方法 | 第24-31页 |
·供试虫源 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24-25页 |
·中红侧沟茧蜂触角总RNA的提取 | 第25页 |
·5'-RACE cDNA和3'-RACE cDNA的合成 | 第25-26页 |
·RACE引物的设计与合成 | 第26-27页 |
·RACE反应和PCR扩增 | 第27-30页 |
·嗅觉受体的发掘 | 第30-31页 |
2 结果与分析 | 第31-42页 |
·序列全长克隆 | 第31-33页 |
·基因序列分析 | 第33-40页 |
·二级结构预测 | 第40-42页 |
3. 讨论 | 第42-44页 |
第四章 中红侧沟茧蜂嗅觉受体表达谱分析 | 第44-58页 |
摘要 | 第44页 |
1 材料与方法 | 第44-49页 |
·供试虫源 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44页 |
·不同组织不同时期总RNA的分离和第一链cDNA的合成 | 第44-45页 |
·ORs表达量的半定量PCR检测 | 第45-46页 |
·引物设计 | 第46-48页 |
·荧光定量PCR | 第48-49页 |
2 结果与分析 | 第49-56页 |
·ORs的半定量检测 | 第49页 |
·退火温度的优化 | 第49-51页 |
·目的基因和内参基因扩增效率的验证 | 第51页 |
·中红侧沟茧蜂嗅觉受体ORs的表达谱分析 | 第51-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
全文总结 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
附录 攻读学位期间发表的学术论文 | 第66-68页 |
致谢 | 第68页 |