| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 1 绪论 | 第12-27页 |
| ·引言 | 第12-13页 |
| ·杨树的研究现状 | 第13-18页 |
| ·杨树简介 | 第13-14页 |
| ·杨树基因工程的研究现状 | 第14-18页 |
| ·MicroRNA 的研究现状 | 第18-23页 |
| ·MicroRNA 简介 | 第18页 |
| ·植物 miRNA 的特点 | 第18-19页 |
| ·植物 miRNA 的形成 | 第19-20页 |
| ·植物 miRNA 的作用机制 | 第20-21页 |
| ·植物 miRNA 的功能 | 第21-23页 |
| ·miR1444a 的研究现状 | 第23-24页 |
| ·研究内容与意义 | 第24-26页 |
| ·研究内容 | 第24页 |
| ·研究目的与意义 | 第24-26页 |
| ·研究技术路线 | 第26-27页 |
| 2 miR1444a 全长序列克隆及启动子序列分析 | 第27-46页 |
| ·材料与仪器 | 第27-28页 |
| ·材料选取与制备 | 第27页 |
| ·试剂及仪器 | 第27-28页 |
| ·培养基和抗生素 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-39页 |
| ·毛果杨木质部总 RNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·目的基因 5’末端序列的克隆 | 第29-34页 |
| ·目的基因 3’末端序列的克隆 | 第34-36页 |
| ·目的基因全长序列的克隆 | 第36-39页 |
| ·MIR1444a 上游启动子序列分析 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-45页 |
| ·总 RNA 提取结果 | 第39页 |
| ·5’端序列克隆及分析 | 第39-40页 |
| ·3’端序列克隆及分析 | 第40-41页 |
| ·目的基因全长序列克隆及分析 | 第41-43页 |
| ·MIR1444a 上游启动子含有多个与胁迫有关的元件 | 第43-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 3 Zn 胁迫下 miR1444a 成熟体及其靶基因的表达分析 | 第46-54页 |
| ·材料与仪器 | 第46-47页 |
| ·材料选取与制备 | 第46页 |
| ·试剂及仪器 | 第46-47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-50页 |
| ·组培苗根、茎、叶中总 RNA 的提取 | 第47页 |
| ·Zn 胁迫下 miR1444a 成熟体的表达分析方法 | 第47-49页 |
| ·Zn 胁迫下 PtPPO3 及 PtPPO6 的表达分析方法 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-53页 |
| ·Zn 诱导下 miR1444a 成熟体的表达特征 | 第50-51页 |
| ·Zn 诱导下 PtPPO3 和 PtPPO6 的表达特征 | 第51-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 4 干旱胁迫下 miR1444a 成熟体及其靶基因的表达分析 | 第54-59页 |
| ·材料与仪器 | 第54页 |
| ·材料选取与制备 | 第54页 |
| ·试剂及仪器 | 第54页 |
| ·培养基 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-55页 |
| ·组培苗根、茎、叶中总 RNA 的提取 | 第54页 |
| ·干旱胁迫下 miR1444a 成熟体的表达分析方法 | 第54-55页 |
| ·干旱胁迫下 PtPPO3 及 PtPPO6 的表达分析方法 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-58页 |
| ·干旱胁迫下 miR1444a 成熟体的表达特征 | 第55-56页 |
| ·干旱胁迫下 PtPPO3 和 PtPPO6 的表达特征 | 第56-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 5 植物过表达载体的构建 | 第59-68页 |
| ·材料与仪器 | 第59-60页 |
| ·载体 | 第59页 |
| ·试剂及仪器 | 第59页 |
| ·培养基及抗生素 | 第59-60页 |
| ·实验方法 | 第60-64页 |
| ·目的基因质粒及载体质粒的提取 | 第60-61页 |
| ·目的基因质粒及载体质粒的双酶切 | 第61-62页 |
| ·酶切产物的连接及其验证 | 第62-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-66页 |
| ·目的基因质粒及载体质粒酶切结果分析 | 第64-65页 |
| ·连接产物的菌液 PCR 及双酶切验证 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-68页 |
| 6 MiR1444a 基因转化毛果杨的方法研究 | 第68-76页 |
| ·材料与仪器 | 第68-70页 |
| ·菌种 | 第68页 |
| ·试剂及仪器 | 第68页 |
| ·培养基及抗生素 | 第68-70页 |
| ·实验方法 | 第70-72页 |
| ·重组载体转化农杆菌 | 第70-71页 |
| ·毛果杨茎段转化 | 第71-72页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第72页 |
| ·转基因苗的移栽 | 第72页 |
| ·结果与分析 | 第72-75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| 7 结论与展望 | 第76-77页 |
| ·结论 | 第76页 |
| ·展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 附录 | 第84-86页 |
| 作者简历 | 第86-88页 |
| 学位论文数据集 | 第88-89页 |
