| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-19页 |
| ·微生物体内抗砷机制介绍 | 第8-10页 |
| ·A.ferrooxidans抗砷基因 | 第9-10页 |
| ·微生物体内的铁还原酶 | 第10-16页 |
| ·生物体对铁的利用 | 第10页 |
| ·细菌体内铁的转运 | 第10-11页 |
| ·铁还原酶介绍 | 第11-12页 |
| ·铁还原酶的分类 | 第12-13页 |
| ·铁还原酶的反应机制 | 第13-14页 |
| ·铁还原酶的结构 | 第14-16页 |
| ·ARSH还原酶介绍 | 第16-18页 |
| ·课题的研究目的与研究内容 | 第18-19页 |
| ·依据和目的 | 第18页 |
| ·论文的主要研究内容 | 第18页 |
| ·论文课题受资助情况 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第19-35页 |
| ·实验材料 | 第19-27页 |
| ·菌种 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19-21页 |
| ·A.ferrooxidans菌基因组抽提试剂 | 第21-23页 |
| ·质粒提取试剂 | 第23页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
| ·胶回收试剂 | 第23-24页 |
| ·不连续体系SDS-PAGE电泳 | 第24-25页 |
| ·SDS-PAGE胶保存试剂及装置 | 第25页 |
| ·蛋白亲和纯化试剂 | 第25-26页 |
| ·实验仪器与设备 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-33页 |
| ·PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·目的片段扩增后的鉴定 | 第28页 |
| ·酶切PCR产物及载体pLM1 | 第28页 |
| ·载体和目的片段连接反应 | 第28页 |
| ·转化 | 第28-29页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第29-30页 |
| ·蛋白质表达转化 | 第30页 |
| ·蛋白质的条件表达 | 第30页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第30-32页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第32-33页 |
| ·定点突变 | 第33-34页 |
| ·引物的设计 | 第33页 |
| ·突变产物PCR扩增 | 第33页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第33-34页 |
| ·突变蛋白质的表达及纯化 | 第34页 |
| ·测试分析方法 | 第34-35页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第34页 |
| ·紫外分光光度计(UV Scanning) | 第34页 |
| ·分子结构模型图的模拟(Molecular structure modeling) | 第34-35页 |
| 第三章 ARSH蛋白及其突变体的表达、纯化及活性测定 | 第35-49页 |
| ·ARSH蛋白基因的克隆 | 第35-37页 |
| ·ArsH蛋白基因的克隆 | 第35-36页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第36-37页 |
| ·ARSH蛋白的表达 | 第37-39页 |
| ·ArsH蛋白表达条件的确定 | 第37页 |
| ·ArsH蛋白大规模的表达 | 第37页 |
| ·SDS-PAGE分析ArsH蛋白 | 第37-38页 |
| ·UV/Vis分析ArsH蛋白 | 第38-39页 |
| ·ARSH蛋白性质的鉴定 | 第39-48页 |
| ·最适pH值和温度的测定 | 第39-41页 |
| ·ArsH蛋白活性的测定 | 第41-44页 |
| ·Glu104在ArsH催化过程中的作用 | 第44-45页 |
| ·分子模拟ArsH蛋白 | 第45-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 攻读硕士学位期间主要的研究成果 | 第57页 |