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基于分子生物学复合铁酶促活性污泥硝化机理研究

摘要第1-13页
Abstract第13-15页
第1章 绪论第15-24页
   ·复合铁酶促活性污泥强化生物脱氮除磷技术第15-19页
     ·复合铁酶促活性污泥强化生物脱氮除磷技术提出的背景第15-16页
     ·复合铁酶促活性污泥强化生物脱氮除磷技术提出的原理第16-17页
     ·复合铁酶促活性污泥强化生物脱氮除磷技术的研究现状第17-19页
   ·分子生物技术在微生物生态学上的应用第19-24页
     ·微生物分子生态学的研究方法第19-20页
     ·分子生态学的常用技术第20-24页
第2章 研究目的与内容第24-27页
   ·课题来源第24页
   ·课题研究的目的及意义第24-25页
   ·主要研究内容第25-27页
第3章 不同加铁量的复合铁酶促活性污泥系统中氨氧化细菌多样性研究第27-58页
   ·不同加铁量条件下复合铁酶促活性污泥系统硝化能力分析第27-31页
     ·材料和方法第27-29页
       ·试验方法第27-28页
       ·分析方法第28-29页
     ·实验结果与讨论第29-31页
       ·反应温度变化对系统硝化功能的影响第29-30页
       ·反应温度变化对系统比硝化速率的影响第30-31页
   ·活性污泥中氨氧化细菌多样性分析方法优化研究第31-41页
     ·材料和方法第31-37页
       ·样品来源及保存第31-32页
       ·主要试剂和仪器第32-33页
       ·活性污泥中细菌总 DNA 的提取第33-34页
       ·DNA 的检测第34页
       ·氨氧化细菌引物的设计第34-35页
       ·氨氧化细菌的 PCR 条件第35-36页
       ·DGGE第36-37页
     ·结果与讨论第37-41页
       ·基因组 DNA 提取第37页
       ·氨氧化细菌 PCR 扩增结果第37-38页
       ·适合 PCR-DGGE 分析的引物选择第38-39页
       ·适合 PCR-DGGE 分析的 DGGE 条件探索第39-41页
   ·采用 DGGE 方法的复合铁酶促活性污泥氨氧化细菌群落结构分析第41-45页
     ·材料和方法第41页
     ·实验结果与讨论第41-45页
       ·基因组 DNA 提取第41-42页
       ·amoA 基因序列的 PCR 扩增第42页
       ·DGGE 图谱分析氨氧化细菌结构变化第42-45页
   ·采用 RFLP 方法的复合铁酶促活性污泥系统中氨氧化细菌群多样性第45-56页
     ·材料和方法第45-51页
       ·样品来源第46页
       ·主要试剂和仪器第46页
       ·扩增 amoA 基因序列的引物第46页
       ·amoA 基因的 PCR 扩增第46-47页
       ·PCR 产物的纯化第47页
       ·amoA 克隆文库的构建第47-50页
       ·克隆文库统计学分析第50-51页
     ·结果与讨论第51-56页
       ·amoA 基因 PCR 扩增及纯化结果第51-52页
       ·菌落 PCR第52页
       ·amoA 文库的构建及 RFLP 分析第52-54页
       ·amoA 序列对比及系统聚类分析第54-56页
   ·本章小结第56-58页
第4章 复合铁酶促活性污泥系统中硝化细菌多样性研究第58-68页
   ·活性污泥中硝化细菌多样性分析条件探索第58-63页
     ·材料和方法第58-60页
       ·样品来源及保存第58页
       ·主要试剂和仪器第58页
       ·活性污泥中细菌总 DNA 的提取第58页
       ·DNA 的检测第58页
       ·硝化细菌引物的设计第58-59页
       ·硝化细菌的 PCR 条件第59-60页
       ·DGGE第60页
     ·结果与讨论第60-63页
       ·硝化细菌 PCR 扩增结果第60-61页
       ·适合 PCR-DGGE 分析的引物选择第61-62页
       ·适合 PCR-DGGE 分析的 DGGE 条件探索第62-63页
   ·基于 DGGE 技术研究 5%含铁量复合铁酶促活性污泥系统中硝化细菌群落结构差异第63-66页
     ·材料和方法第63-64页
     ·结果与讨论第64-66页
       ·目标基因序列的 PCR 扩增第64-65页
       ·DGGE 图谱分析硝化细菌结构变化第65-66页
   ·本章小结第66-68页
第5章 铁离子对纯菌的生长及功能基因表达量的影响第68-96页
   ·材料和方法第68-78页
     ·主要试剂和仪器第68页
     ·菌种来源第68-69页
     ·菌种培养基第69-70页
     ·菌种的活化第70-71页
       ·氨氧化细菌 ATCC 25196第70页
       ·硝化细菌 ATCC 14123第70-71页
     ·微生物生长曲线的测定第71页
     ·菌种的培养第71-72页
     ·不同加铁量对细菌生长的影响第72-73页
     ·不同加铁量对氨氧化细菌功能表达量第73-78页
       ·不同加铁量细菌的培养第73页
       ·细菌总 RNA 提取第73-74页
       ·RNA 质量检测第74-75页
       ·RNA 样品中基因组 DNA 消化第75页
       ·mRNA 反转录为 cDNA第75-76页
       ·引物设计第76页
       ·标准品的制备第76-77页
       ·Real-time PCR第77-78页
   ·结果与讨论第78-95页
     ·不同培养基条件下氨氧化细菌的生长曲线第78-79页
     ·在外加碳源条件下氨氧化细菌的代谢机理第79-81页
     ·菌种的验证第81-82页
     ·不同加铁量对细菌生长的影响第82-84页
     ·不同加铁量对氨氧化细菌功能表达量的影响第84-90页
       ·不同加铁量对氨氧化细菌硝化能力的影响第84-86页
       ·不同加铁量培养的氨氧化细菌总 RNA 提取第86页
       ·cDNA 质量检测第86-87页
       ·Real-time PCR 确定性分析第87-88页
       ·Real-time PCR 标准曲线第88-89页
       ·不同加铁量对氨氧化细菌 amoA mRNA 表达的影响第89-90页
     ·不同加铁量对硝化细菌功能表达量的影响第90-95页
       ·不同加铁量对硝化细菌硝化能力的影响第90-91页
       ·不同加铁量培养的硝化细菌总 RNA 提取第91-92页
       ·cDNA 质量检测第92页
       ·Real-time PCR 确定性分析第92-93页
       ·Real-time PCR 标准曲线第93页
       ·不同加铁量对氨氧化细菌 NxrA mRNA 表达的影响第93-95页
   ·本章小结第95-96页
第6章 结论与建议第96-99页
   ·结论第96-97页
   ·建议第97-99页
参考文献第99-102页
攻读硕士学位期间发表的论文第102-103页
致谢第103页

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