| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 第一部分 RANKL-TNF 样区多肽疫苗的制备 | 第15-51页 |
| 一、材料 | 第15-29页 |
| 1. 一般材料 | 第15-20页 |
| 2. 试剂配制 | 第20-27页 |
| 3. 主要仪器 | 第27-29页 |
| 二、方法 | 第29-37页 |
| 1. RANKL-TNF 样区多肽疫苗候选序列的筛选 | 第29页 |
| 2. RANKL-TNF 样区多肽疫苗表达载体的构建和鉴定 | 第29-33页 |
| 3. RANKL-TNF 样区多肽疫苗的表达和鉴定 | 第33-35页 |
| 4. RANKL-TNF 样区多肽疫苗的纯化和复性 | 第35-37页 |
| 三、结果 | 第37-47页 |
| 1. 序列分析 | 第37页 |
| 2. 表位预测 | 第37-38页 |
| 3. 载体的构建及鉴定 | 第38-42页 |
| 4. 目的蛋白的表达分析 | 第42-47页 |
| 四、讨论 | 第47-50页 |
| 五、结论 | 第50-51页 |
| 第二部分 多肽疫苗的免疫原性评价 | 第51-69页 |
| 一、材料 | 第51-57页 |
| 1. 动物 | 第51页 |
| 2. 细胞株 | 第51页 |
| 3. 试剂 | 第51-53页 |
| 4. 液体配制 | 第53-55页 |
| 5. 器材和设备 | 第55-57页 |
| 二、方法 | 第57-61页 |
| 1. 小鼠的免疫流程和血清收集 | 第57页 |
| 2. 测定血清中抗体滴度和持续时间的间接 ELISA 法 | 第57-58页 |
| 3. 抗血清中和能力测定的细胞学实验 | 第58-61页 |
| 三、结果 | 第61-64页 |
| 1. 疫苗可刺激机体产生中和抗体 | 第61页 |
| 2. 抗血清可降低 TNF-α所致的 L929 细胞的凋亡率 | 第61-62页 |
| 3. 抗血清可抑制破骨细胞的分化成熟 | 第62-64页 |
| 四、讨论 | 第64-68页 |
| 五、结论 | 第68-69页 |
| 第三部分 RANKL-TNF 样区多肽疫苗对疾病模型的保护作用研究 | 第69-100页 |
| 一、材料 | 第69-76页 |
| 1. 动物 | 第69页 |
| 2. 试剂 | 第69-71页 |
| 3. 液体配制 | 第71-74页 |
| 4. 器材和设备 | 第74-76页 |
| 二、方法 | 第76-87页 |
| 1. 恶液质小鼠模型 | 第76页 |
| 2. 高钙血症小鼠模型 | 第76-77页 |
| 3. 血清钙离子水平测定 | 第77-78页 |
| 4. CIA 模型 | 第78-79页 |
| 5. 后肢骨的 Micro-CT 检测 | 第79-80页 |
| 6. 脱钙骨组织学染色前的样品制备 | 第80-81页 |
| 7. 脱钙骨的组织学染色 | 第81-84页 |
| 8. 组织学结果的评估标准 | 第84-85页 |
| 9. 血清 CⅡ抗体水平测定 | 第85-86页 |
| 10. 血清 RANKL 和 TNF-α水平测定 | 第86-87页 |
| 三、结果 | 第87-96页 |
| 1. 疫苗可减轻恶液质小鼠的症状 | 第87-88页 |
| 2. 疫苗可减轻高钙血症小鼠的症状 | 第88-90页 |
| 3. 疫苗可降低 CIA 小鼠的发病率，并减轻疾病的严重程度 | 第90-91页 |
| 4. 疫苗可减轻 CIA 小鼠关节腔的炎性细胞浸润 | 第91-92页 |
| 5. 疫苗可减轻 CIA 小鼠关节软骨的侵蚀性改变 | 第92-93页 |
| 6. 疫苗可减轻 CIA 小鼠关节软骨和骨的侵蚀性病变 | 第93-94页 |
| 7. 疫苗可减轻 CIA 小鼠关节腔中 RANKL 的表达 | 第94-95页 |
| 8. 疫苗可减轻 CIA 小鼠关节腔中 TNF-α的表达 | 第95-96页 |
| 四、讨论 | 第96-99页 |
| 五、结论 | 第99-100页 |
| 全文总结 | 第100-104页 |
| 参考文献 | 第104-117页 |
| 综述 | 第117-128页 |
| 参考文献 | 第124-128页 |
| 附录 | 第128-130页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第130-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 个人简历 | 第132-134页 |
