| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-24页 |
| ·烟草突变体库的创制 | 第15-16页 |
| ·植物功能基因组的研究策略 | 第15页 |
| ·烟草基因组学研究进展 | 第15-16页 |
| ·大规模烟草突变体库在烟草基因功能研究中的作用 | 第16页 |
| ·利用 T-DNA 激活标签插入方法创建大规模的烟草突变体库 | 第16-18页 |
| ·T-DNA 插入方法简介 | 第16-17页 |
| ·T-DNA 激活标签方法 | 第17页 |
| ·激活标签载体 pSKI015 | 第17-18页 |
| ·T-DNA 插入位点侧翼序列的扩增方法 | 第18-21页 |
| ·质粒拯救 | 第18-19页 |
| ·T-Linker PCR | 第19页 |
| ·TAIL-PCR | 第19-20页 |
| ·PCR walking | 第20页 |
| ·FPNI-PCR | 第20-21页 |
| ·烟草突变体的筛选 | 第21-22页 |
| ·烟叶品质 | 第21页 |
| ·烟草的花期 | 第21-22页 |
| ·烟草的抗病性 | 第22页 |
| ·创建烟草突变体库选用材料的依据 | 第22页 |
| ·立题依据及意义 | 第22-23页 |
| ·技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 烟草 T-DNA 插入突变体侧翼序列扩增方法的优化 | 第24-36页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·试剂与仪器 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-30页 |
| ·CTAB 法提取基因组 DNA | 第24-25页 |
| ·T0 代突变体植株 T-DNA 插入阳性转化检测 | 第25-26页 |
| ·TAIL-PCR 方法 | 第26-27页 |
| ·PCR walking 方法 | 第27-28页 |
| ·FPNI-PCR 方法 | 第28-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-35页 |
| ·优化前 TAIL-PCR、PCR walking 与 FPNI-PCR 扩增方法的比较 | 第30-32页 |
| ·对 TAIL-PCR 和 FPNI-PCR 的优化 | 第32-34页 |
| ·优化后扩增方法的比较 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·结论 | 第35-36页 |
| 第三章 T1 代烟草突变体侧翼序列分析 | 第36-43页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·T1 代突变体烟草基因组 DNA 的提取 | 第36-37页 |
| ·T1 代烟草突变植株 T-DNA 插入阳性检测 | 第37页 |
| ·T1 代侧翼序列的扩增与分析 | 第37-42页 |
| ·T1 代突变体侧翼序列在数据库中的比对结果 | 第38-39页 |
| ·T1 代突变体 T-DNA 插入位点分析 | 第39-40页 |
| ·基因插入失活分析 | 第40-41页 |
| ·T1 代突变株插入位点附近相关基因功能分析 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 T2 代烟草突变体侧翼序列与基因型分析 | 第43-50页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·T2 代田间性状调查 | 第43页 |
| ·T2 代侧翼序列分析 | 第43-46页 |
| ·T2 代取样株的选取 | 第43-44页 |
| ·基因组 DNA 的提取及阳性插入检测 | 第44-45页 |
| ·T2 代所取 6 个株系获得的侧翼序列统计 | 第45-46页 |
| ·MHT2-35 株系各单株基因型分析 | 第46-50页 |
| ·基因型鉴定的原理 | 第47页 |
| ·基因型鉴定的方法 | 第47-48页 |
| ·基因型鉴定结果 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 第五章 结论 | 第50-51页 |
| 附录 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
