| 英文缩略词表 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| 1 前言 | 第18-20页 |
| 2 实验材料 | 第20-25页 |
| ·细胞株、菌株及质粒 | 第20页 |
| ·抗体 | 第20页 |
| ·主要试剂来源及配制 | 第20-22页 |
| ·引物 | 第22-23页 |
| ·实验仪器 | 第23-25页 |
| 3 实验方法 | 第25-37页 |
| ·重组质粒的构建及质粒提取 | 第25-30页 |
| ·引物设计和合成 | 第25页 |
| ·PCR 扩增 | 第25-26页 |
| ·凝胶回收 | 第26页 |
| ·酶切 | 第26-27页 |
| ·连接 | 第27页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·质粒转化 | 第27-28页 |
| ·质粒的小量提取 | 第28页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第28-29页 |
| ·质粒的中量提取 | 第29-30页 |
| ·质粒图谱 | 第30页 |
| ·细胞培养及转染 | 第30-32页 |
| ·细胞复苏，传代与冻存 | 第30-31页 |
| ·肿瘤细胞培养 | 第31页 |
| ·细胞瞬时转染 | 第31页 |
| ·细胞稳定转染 | 第31-32页 |
| ·细胞计数 | 第32页 |
| ·蛋白免疫印迹（Western blotting，WB） | 第32-34页 |
| ·蛋白样品制备 | 第32-33页 |
| ·SDS-PAGE 凝胶制备 | 第33页 |
| ·上样电泳 | 第33-34页 |
| ·转膜 | 第34页 |
| ·封闭 | 第34页 |
| ·曝光，显色 | 第34页 |
| ·RT-PCR | 第34-36页 |
| ·RNA 提取 | 第34-35页 |
| ·RT 反应 | 第35页 |
| ·PCR 扩增 | 第35-36页 |
| ·细胞活力测定(MTT) | 第36页 |
| ·Transwell 迁移实验 | 第36页 |
| ·Transwell 侵袭实验 | 第36-37页 |
| ·统计学处理 | 第37页 |
| 4 结果 | 第37-45页 |
| ·PCR 扩增的 HBx 基因 | 第37-38页 |
| ·重组质粒阳性克隆的筛选及鉴定 | 第38页 |
| ·Western blot 检测稳转细胞内 HBx 蛋白的表达 | 第38-39页 |
| ·HBx 对 HepG2 细胞增殖活性的影响及 HepG2 细胞和HepG2.2.15 细胞增殖活性比较 | 第39-40页 |
| ·HBx 蛋白对 ER 应激相关基因表达的影响 | 第40页 |
| ·过表达 MANF 对肝癌细胞增殖活性的影响 | 第40-41页 |
| ·MANF siRNA 的验证 | 第41页 |
| ·沉默 MANF 对肝癌细胞增殖活性的影响 | 第41-44页 |
| ·沉默 MANF 对肝癌细胞迁移能力的影响 | 第44-45页 |
| ·沉默 MANF 对肝癌细胞侵袭能力的影响 | 第45页 |
| 5 讨论 | 第45-48页 |
| 6 结论 | 第48页 |
| 7 本研究的创新点 | 第48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 个人简历 | 第53-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 综述 | 第57-73页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
