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同种异型抗原特异性iTreg预防小鼠GVHD并保持GVL及其作用机理

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
目录第9-12页
英文縮略词表第12-14页
前言第14-18页
第一部分 HY抗原特异性ITREGS对GVHD的预防作用及作用机理第18-42页
 1 材料和方法第18-26页
   ·材料第18-20页
     ·试剂第18-19页
     ·实验仪器及器材第19页
     ·实验小鼠第19-20页
   ·主要方法第20-26页
     ·淋巴组织的细胞准备第20页
     ·磁珠分选CD4~+CD25-T细胞、APC细胞第20-21页
     ·HY抗原特异性iTregs的体外诱导生成第21页
     ·流式细胞术检测CD4~+CD25~+Foxp3~+的表达第21-22页
     ·分选CD25~+Treg细胞第22页
     ·Tregs细胞对CD4~+CD25~-效应T细胞抑制功能实验第22-23页
     ·骨髓移植(BMT)第23-25页
     ·移植后GVHD评估第25页
     ·肝脏淋巴细胞分离第25-26页
     ·免疫荧光分析第26页
     ·骨髓嵌合体的建立第26页
   ·统计分析第26页
 2 结果第26-38页
   ·HY抗原特异性iTregs的培养生成和体外抑制功能第26-29页
     ·HY抗原特异性iTregs体外生成和纯化第26-28页
     ·HY抗原特异性iTregs的体外抑制功能第28-29页
   ·HY抗原特异性iTregs对小鼠GVHD的作用第29-34页
     ·iTregs在B6→(B6×H-2~(bm12))F1移植模型上对GVHD的作用观察第29-31页
     ·HY抗原特异性iTregs有利于免疫重建第31-32页
     ·HY抗原特异性iTregs在其他移植模型上对GVHD的抑制第32-34页
   ·HY抗原特异性iTregs预防小鼠GVHD作用机理的研究第34-38页
     ·HY抗原特异性iTregs在小鼠体内活化需要HY抗原的存在第34-35页
     ·活化的iTregs能限制小鼠体内脾脏、肝脏Teffs的扩增浸润第35-36页
     ·抗原的组织分布不影响抗原特异性iTregs的保护作用第36-38页
 3 讨论第38-41页
 4 结论第41-42页
第二部分 同种异体抗原特异性ITREGS对小鼠GVHD及GVL效应的作用研究第42-61页
 1 材料和方法第42-48页
   ·材料第42-44页
     ·试剂第42-43页
     ·实验仪器及器材第43-44页
     ·实验小鼠第44页
   ·主要方法第44-48页
     ·淋巴组织的细胞准备第44页
     ·AutoMACS分选法分离T细胞第44页
     ·流式细胞术检测CD4~+CD25~+Foxp3~+的表达第44页
     ·AutoMACS分选法阳性分选CD25~+Treg细胞第44页
     ·CDllc~+DCs的分离第44-45页
     ·同种异体抗原反应性iTregs的体外诱导生成第45页
     ·混合淋巴细胞反应第45-46页
     ·GVHD模型第46页
     ·GVL模型第46-47页
     ·细胞内granzyme B检测第47-48页
     ·细胞内因子IFNγ和TNFα的检测第48页
   ·统计分析第48页
 2 结果第48-57页
   ·同种异体抗原反应性iTregs生成、分离和体外功能第48-50页
     ·同种异体抗原反应性iTregs能在体外诱导生成第48-49页
     ·诱导生成的同种异体抗原反应性iTregs有体外抑制功能第49-50页
   ·同种异体抗原反应性iTregs对小鼠GVHD的作用第50-52页
     ·同种异体抗原反应性iTregs能预防小鼠GVHD第50-51页
     ·同种异体抗原反应性iTregs对小鼠GVHD的预防作用具有特异性第51-52页
   ·同种异体抗原反应性iTregs对小鼠GVL效应的影响第52-53页
   ·同种异体抗原反应性iTregs预防GVHD并保持GVL的作用机制第53-57页
     ·同种异体抗原反应性iTregs在体内能活化扩增第53-54页
     ·同种异体抗原反应性iTregs抑制Teff细胞在脾脏中的扩增第54页
     ·同种异体抗原反应性iTregs限制Teff细胞的迁移和浸润第54-55页
     ·同种异体抗原反应性iTregs保留部分CD8~+细胞CTL功能第55-57页
 3 讨论第57-60页
 4 结论第60-61页
综述第61-70页
参考文献第70-84页
攻读学位期间主要成果第84-86页
致谢第86页

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