| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-28页 |
| ·蚊虫的危害及抗药性的产生概述 | 第11-12页 |
| ·蚊虫的危害 | 第11页 |
| ·蚊虫杀虫剂的发展 | 第11-12页 |
| ·蚊虫对杀虫剂抗性的产生 | 第12页 |
| ·蚊虫的抗药性机理研究进展 | 第12-14页 |
| ·抗性研究方法 | 第13页 |
| ·抗性主要机理 | 第13-14页 |
| ·抗性相关基因 | 第14-17页 |
| ·细胞色素 P450 | 第14页 |
| ·非专一性酯酶系（Ests） | 第14页 |
| ·谷胱甘肽转移酶(Glutathione S-transferases, GSTs) | 第14-15页 |
| ·α-乙酸萘酯酶 | 第15页 |
| ·乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase，AchE） | 第15页 |
| ·钠离子通道 | 第15-16页 |
| ·钙离子通道 | 第16-17页 |
| ·基因的克隆及分析技术 | 第17-24页 |
| ·抑制性消减杂交（ suppression subtractive hybridization，SSH） | 第17-18页 |
| ·CDNA 芯片技术 | 第18页 |
| ·表达序列标签(ExpressSequenceTags, EST) | 第18-19页 |
| ·CDNA 末端快速扩增技术 (rapid-amplification of cDNA ends，RACE) | 第19-21页 |
| ·生物信息学分析（Bioinformatics）在分子生物学中的应用 | 第21-23页 |
| ·半定量 RT—PCR(semi quantitative reverse transcription and polymerase chain reaction，sqRT—PCR) | 第23-24页 |
| ·蚊虫细胞的培养和抗药性筛选以及 LC50的测定 | 第24-27页 |
| ·昆虫细胞的培养 | 第24-25页 |
| ·昆虫细胞抗药性的筛选 | 第25-26页 |
| ·细胞半数致死浓度（LC50）的测定 | 第26页 |
| ·MTT 分析法在 LC50测定中的应用 | 第26-27页 |
| ·研究内容的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 淡色库蚊 PR-XP2 基因 cDNA 全长的克隆 | 第28-39页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·淡色库蚊成虫 | 第28页 |
| ·主要的酶与试剂 | 第28-29页 |
| ·仪器设备 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-31页 |
| ·Trizol 法进行淡色库蚊总 RNA 的提取 | 第29页 |
| ·常规的反转录 PCR | 第29页 |
| ·RACE 全长基因的克隆 | 第29-30页 |
| ·T/A 克隆与检测 | 第30-31页 |
| ·RACE 全长的拼接及克隆验证 | 第31页 |
| ·基因全长的生物信息学分析及预测 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-37页 |
| ·淡色库蚊总 RNA 的提取 | 第31-32页 |
| ·淡色库蚊 PR-XP2 全长基因的克隆 | 第32-33页 |
| ·PR-XP2 基因全长的生物信息学分析 | 第33-37页 |
| ·讨论 | 第37页 |
| ·小结 | 第37-39页 |
| 第三章 蚊子 C6/36 细胞系的培养与抗药性筛选 | 第39-45页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·C6/36 细胞株 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·仪器及耗材 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40-41页 |
| ·细胞培养基的配制 | 第40页 |
| ·C6/36 细胞的复苏 | 第40页 |
| ·细胞的传代培养 | 第40页 |
| ·抗氯菊酯细胞的筛选 | 第40页 |
| ·MTT 法测定药物对细胞的半数致死率 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-43页 |
| ·细胞生长的结果 | 第41页 |
| ·加药后细胞的生长情况对比 | 第41-42页 |
| ·MTT 法测量所筛选出细胞的半数致死浓度及抑制曲线的绘制 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第四章 半定量 RT-PCR 测定 PR-XP2 基因在敏感和抗性 C6/36 细胞中的表达差异 | 第45-51页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·蚊子 C6/36 细胞 | 第45页 |
| ·试剂 | 第45页 |
| ·仪器设备 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-47页 |
| ·C6/36 细胞总 RNA 的提取 | 第45-46页 |
| ·CDNA 第一链的合成 | 第46页 |
| ·最适退火温度的确定 | 第46页 |
| ·循环数的确定 | 第46-47页 |
| ·半定量 RT-PCR 检测耐药细胞株中 PR-XP2 表达量的变化 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-49页 |
| ·C6/36 细胞总 RNA 提取结果 | 第47页 |
| ·半定量 RT-PCR 循环数的确定 | 第47-48页 |
| ·PR-XP2 基因在抗性蚊和敏感型蚊中的半定量 RT-PCR 结果 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第五章 结论与展望 | 第51-53页 |
| ·结论 | 第51-52页 |
| ·克隆了一条淡色库蚊的氯菊酯抗性相关的 PR-XP2 基因并做了生物信息学分析 | 第51页 |
| ·筛选得到了抗氯菊酯药物的蚊子 C6/36 细胞株 | 第51页 |
| ·利用半定量 RT-PCR 的方法检测了敏感蚊细胞和抗性蚊细胞中 PR-XP2 基因的差异表达 | 第51-52页 |
| ·研究展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 附录 | 第57-60页 |
| 附录1 细胞培养主要溶液的配制 | 第57-58页 |
| 附录2 英文缩略词表 | 第58-59页 |
| 附录3 主要仪器设备 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
