摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
前言 | 第13-24页 |
参考文献 | 第17-24页 |
第一章 溶瘤腺病毒 SG655 mGMP 及相关对照病毒的构建与制备 | 第24-56页 |
一、材料与方法 | 第24-40页 |
(一)实验所需材料 | 第24-27页 |
(二)实验所需试剂的配置 | 第27-28页 |
(三)溶瘤腺病毒穿梭质粒 P74 Tp mGM CSF 的构建 | 第28-35页 |
(四)溶瘤腺病毒的重组鉴定、扩增及纯化 | 第35-40页 |
二、实验结果 | 第40-54页 |
(一)质粒 P74 Tp mGM CSF的构建及鉴定 | 第40-45页 |
(二)溶瘤腺病毒 SG655 mGMP 及 SG655 mGMPC 的 PCR鉴定 | 第45-51页 |
(三)Western Blotting 检测 2 个腺病毒在细胞中 P53 表达 | 第51-52页 |
(四)ELISA 方法检测 2 个腺病毒中 mGM CSF 蛋白表达 | 第52-54页 |
(五)溶瘤腺病毒的扩增纯化与滴度测定 | 第54页 |
三、讨论 | 第54-56页 |
第二章 溶瘤腺病毒 SG655 mGMP 对肿瘤干细胞的体外作用研究 | 第56-70页 |
一、材料与方法 | 第56-63页 |
(一)实验所需材料 | 第56-58页 |
(二)实验所需试剂的配置 | 第58-59页 |
(三)实验方法步骤 | 第59-63页 |
二、实验结果 | 第63-69页 |
(一)、荧光显微镜观察溶瘤腺病毒 SG7605 EGFP 及SG7605 11R EGFP 对肿瘤干细胞的感染效率 | 第63-64页 |
(二)、流式细胞仪检测溶瘤腺病毒 SG7605 EGFP 及SG7605 11R EGFP 对肝癌干细胞 Hep3B C 的感染效率 | 第64-65页 |
(三)、Western Blotting 方法检测溶瘤腺病毒在肿瘤干细胞中 P53 蛋白表达 | 第65-66页 |
(四)、ELISA 实验检测溶瘤腺病毒 SG655 mGMP 在小鼠畸胎瘤干细胞中 mGM CSF 蛋白的表达 | 第66-67页 |
(五)、CCK 8 实验检测溶瘤腺病毒对肿瘤干细胞的生长抑制作用 | 第67-68页 |
(六)、流式细胞仪检测溶瘤腺病毒 SG655 mGMP 对Hep3B C 细胞的促凋亡作用 | 第68-69页 |
三、讨论 | 第69-70页 |
第三章 溶瘤腺病毒 SG655 mGMP 对畸胎瘤干细胞的体内作用研究 | 第70-80页 |
一、实验材料与方法 | 第70-75页 |
(一)实验材料 | 第70-71页 |
(二)实验方法 | 第71-75页 |
二、实验结果与分析 | 第75-79页 |
(一)、C57BL/6 小鼠畸胎瘤干细胞移植瘤模型的建立 | 第75页 |
(二)、瘤内注射 PBS、SG655 11R P53、SG655 mGM-CSF、SG655 mGMP 治疗畸胎瘤干细胞移植瘤疗效观察 | 第75-77页 |
(三)、HE 常规染色及免疫组化检测免疫相关抗原 AIF 1 的表达 | 第77页 |
(四)、流式细胞仪检测免疫细胞相关标记表达 | 第77-79页 |
三、讨论 | 第79-80页 |
总结 | 第80-82页 |
文献综述 | 第82-93页 |
参考文献 | 第87-93页 |
博士研究生期间发表文章 | 第93-94页 |
致谢 | 第94页 |