| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-26页 |
| ·猪瘟病毒的分类及其结构特性 | 第14-15页 |
| ·猪瘟病毒的致病机理研究 | 第15-16页 |
| ·免疫抑制 | 第15页 |
| ·免疫逃避 | 第15-16页 |
| ·出血机制 | 第16页 |
| ·猪瘟病毒基因组结构及其功能蛋白的特性 | 第16-22页 |
| ·CSFV的非编码区 | 第16-17页 |
| ·CSFV的非结构蛋白 | 第17-19页 |
| ·CSFV的结构蛋白 | 第19-22页 |
| ·非结构蛋白NS4A、NS4B和NS5A及结构蛋白E~(rns)的研究进展 | 第22-24页 |
| ·NS4A蛋白 | 第22页 |
| ·NS4B蛋白 | 第22-23页 |
| ·NS5A蛋白 | 第23页 |
| ·E~(rns)蛋白 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-36页 |
| ·实验材料 | 第26-30页 |
| ·病毒、细胞、质粒与菌株 | 第26页 |
| ·试验动物 | 第26页 |
| ·引物及载体构建策略 | 第26页 |
| ·实验仪器 | 第26-27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·试剂配制 | 第27-29页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·技术路线 | 第30页 |
| ·试验方法 | 第30-36页 |
| ·基因的克隆 | 第30-31页 |
| ·构建原核表达载体 | 第31页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第31-32页 |
| ·纯化重组蛋白 | 第32-34页 |
| ·免疫小白鼠制备多抗血清 | 第34页 |
| ·多克隆抗体的特异性 | 第34-36页 |
| 第三章 实验结果 | 第36-75页 |
| ·总体实验设计及所用引物 | 第36-39页 |
| ·猪瘟病毒E~(rns)蛋白的原核表达及多抗的制备 | 第39-47页 |
| ·E~(rns)表达区域的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列 | 第39-40页 |
| ·猪瘟病毒E~(rns)基因的克隆 | 第40页 |
| ·构建E~(rns)基因的原核表达载体 | 第40-41页 |
| ·E~(rns)重组蛋白的诱导表达 | 第41-42页 |
| ·E~(rns)重组蛋白表达形式的鉴定与纯化 | 第42-43页 |
| ·Western Blot鉴定E~(rns)重组蛋白 | 第43-44页 |
| ·抗E~(rns)多克隆抗体与纯化的重组蛋白的反应性 | 第44-45页 |
| ·抗E~(rns)多克隆抗体与CSFV感染PK-15细胞中E~(rns)蛋白的反应性 | 第45-47页 |
| ·猪瘟病毒NS4A蛋白的原核表达及多抗的制备 | 第47-55页 |
| ·NS4A表达区域的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列 | 第47页 |
| ·猪瘟病毒NS4A基因的克隆 | 第47-48页 |
| ·构建NS4A基因的原核表达载体 | 第48-49页 |
| ·原核表达载体PET-NS4A的诱导表达 | 第49页 |
| ·NS4A重组蛋白表达形式的鉴定与纯化 | 第49-50页 |
| ·Western Blot鉴定NS4A重组蛋白 | 第50-51页 |
| ·抗NS4A多克隆抗体与NS4A重组蛋白的反应性 | 第51-52页 |
| ·抗NS4A多克隆抗体与CSFV感染的PK-15细胞中NS4A蛋白的反应性 | 第52-55页 |
| ·猪瘟病毒NS4B蛋白的原核表达及多抗的制备 | 第55-65页 |
| ·NS4B表达区域的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列分析 | 第55-56页 |
| ·猪瘟病毒NS4B基因的克隆 | 第56-57页 |
| ·构建NS4B基因的原核表达载体 | 第57-58页 |
| ·诱导NS4B基因原核表达载体表达蛋白 | 第58-59页 |
| ·NS4BΔ205-347重组蛋白的纯化及鉴定 | 第59-60页 |
| ·Western Blot鉴定NS4BΔ205-347重组蛋白 | 第60-61页 |
| ·抗NS4BΔ205-347多克隆抗体与重组蛋白的反应性 | 第61-62页 |
| ·抗NS4BΔ205-347多克隆抗体与真核表达NS4B蛋白的反应性 | 第62-63页 |
| ·抗NS4BzΔ205-347多克隆抗体与CSFV感染PK-15细胞中NS4B蛋白的反应性 | 第63-65页 |
| ·猪瘟病毒NS5A蛋白的原核表达及多抗的制备 | 第65-75页 |
| ·NS5A表达区域的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列 | 第65-66页 |
| ·猪瘟病毒NS5A基因的克隆 | 第66-67页 |
| ·构建NS5A基因的原核表达载体 | 第67-68页 |
| ·原核表达载体PET-NS5A的诱导表达 | 第68-69页 |
| ·NS5A蛋白表达形式的鉴定及纯化 | 第69页 |
| ·NS5A重组蛋白的Western Blot分析 | 第69-70页 |
| ·抗NS5A多克隆抗体与重组蛋白的反应性 | 第70-71页 |
| ·抗NS5A多克隆抗体与PK-15细胞中真核表达的NS5A蛋白的反应性 | 第71-72页 |
| ·抗NS5A多克隆抗体与CSFV感染PK-15细胞中NS5A蛋白的反应性 | 第72-75页 |
| 第四章 讨论 | 第75-83页 |
| ·免疫原的选择 | 第75-76页 |
| ·猪瘟病毒E~(rns)、NS4A、NS4B、NS5A的原核表达策略 | 第76-78页 |
| ·可溶性抗原的制备 | 第78-80页 |
| ·多克隆抗体的反应性和特异性 | 第80-83页 |
| 第五章 总结 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第93页 |
