摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-18页 |
前言 | 第18-20页 |
第一部分 文献综述 | 第20-37页 |
1 肠道微生物 | 第20-25页 |
·肠道微生物与脂肪沉积的关系 | 第20-22页 |
·肠粘膜菌群 | 第22-25页 |
2 肠道菌群影响脂肪沉积的可能途径 | 第25-29页 |
·SCFAs(short chain fatty acids) | 第25-26页 |
·肠道细菌引起的炎症 | 第26-29页 |
3 日粮对拟杆菌、硬壁菌的影响 | 第29-37页 |
·碳水化合物、脂肪、蛋白质水平 | 第30页 |
·硫酸粘杆菌素 | 第30-31页 |
·粘杆菌素对微生物的影响 | 第30-31页 |
·粘杆菌素对生产性能、脂肪代谢的影响 | 第31页 |
·银耳孢子发酵物 | 第31-33页 |
·银耳孢子发酵物的制备和组成 | 第31-32页 |
·银耳多糖/银耳孢子发酵物对动物肠道微生物的影响 | 第32页 |
·银耳多糖/银耳孢子发酵物对动物脂肪代谢的影响 | 第32-33页 |
·益生菌 | 第33-37页 |
·益生菌对脂肪沉积的影响 | 第33-35页 |
·益生菌对肠道菌群的影响 | 第35-37页 |
第二部分 目前存在的问题及本研究的目的、意义和内容 | 第37-39页 |
1 存在问题 | 第37页 |
2 本研究的目的和意义 | 第37页 |
3 研究内容 | 第37页 |
4 研究路线 | 第37-39页 |
第三部分 试验研究 | 第39-96页 |
试验一 猪回肠粘膜和食糜菌群与脂肪沉积的关系 | 第39-55页 |
1 前言 | 第39页 |
2 材料与方法 | 第39-44页 |
·试验动物及日粮 | 第39页 |
·饲养管理 | 第39-41页 |
·样品采集 | 第41页 |
·食糜 | 第41页 |
·回肠粘膜 | 第41页 |
·肌肉 | 第41页 |
·测定指标及方法 | 第41页 |
·拟杆菌、硬壁菌测定 | 第41-44页 |
·细菌菌株 | 第41页 |
·细菌菌株的培养及DNA提取 | 第41-42页 |
·引物 | 第42页 |
·标准品的制备及鉴定 | 第42-44页 |
·目的片段的扩增 | 第42-43页 |
·PCR产物的回收 | 第43页 |
·PCR产物的T载体连接 | 第43页 |
·转化 | 第43页 |
·筛选重组子 | 第43页 |
·质粒的提取 | 第43页 |
·质粒DNA的测序 | 第43-44页 |
·实时荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第44页 |
·硬壁菌门、拟杆菌门和总细菌的检测 | 第44页 |
·细菌DNA提取 | 第44页 |
·实时荧光定量PCR反应 | 第44页 |
·数据处理与统计分析 | 第44页 |
3 结果 | 第44-52页 |
·生产性能 | 第45页 |
·胴体指标 | 第45页 |
·细菌DNA的提取 | 第45页 |
·DM猪和DLY猪肠粘膜拟杆菌和硬壁菌拷贝数 | 第45-52页 |
·标准质粒的构建与鉴定 | 第45-46页 |
·标准曲线 | 第46-48页 |
·硬壁门菌、拟杆菌和总细菌扩增曲线和溶解曲线 | 第48-49页 |
·DM猪和DLY猪回肠粘膜和内容物各类细菌拷贝数和比值 | 第49-51页 |
·肠道菌群和背膘厚相关性分析 | 第51-52页 |
4 讨论 | 第52-54页 |
·生产性能和胴体指标 | 第52页 |
·肠道菌群 | 第52-53页 |
·肠道菌群与脂肪沉积的关系 | 第53-54页 |
5 小结 | 第54-55页 |
试验二 猪回肠粘膜微生物与血浆LPS水平、TLR4、TLR5基因的关系 | 第55-63页 |
1 前言 | 第55页 |
2 材料方法 | 第55-58页 |
·试验材料 | 第55页 |
·肠道拟杆菌、硬壁菌数量检测 | 第55页 |
·TLR4、TLR5 mRNA相对表达量检测 | 第55-58页 |
·总RNA的提取 | 第55-56页 |
·检测RNA的完整性 | 第56页 |
·各组织总RNA浓度的测定 | 第56页 |
·反转录 | 第56-57页 |
·引物设计与合成 | 第57页 |
·定量检测基因的表达 | 第57-58页 |
·数据处理和统计分析 | 第58页 |
3 结果 | 第58-61页 |
·DM和DLY猪回肠粘膜和皮下脂肪TLR4、TLR5相对表达量差异 | 第58-60页 |
·RNA质量检测 | 第58-59页 |
·RT-PCR检测目标基因和内参基因 | 第59页 |
·DM和DLY猪回肠粘膜和皮下脂肪TLR4、TLR5相对表达量差异 | 第59-60页 |
·回肠粘膜和皮下脂肪TLR4相对表达量与硬壁菌/拟杆菌比值的相关关系 | 第60-61页 |
·血浆LPS水平与肠道硬壁菌/拟杆菌比值的相关关系 | 第61页 |
4 讨论 | 第61-62页 |
5 小结 | 第62-63页 |
试验三 微生态调节剂对猪生产性能、胴体品质和回肠粘膜菌群的影响 | 第63-74页 |
1 前言 | 第63页 |
2 材料与方法 | 第63-64页 |
·试验设计 | 第63页 |
·试验日粮 | 第63-64页 |
·饲养管理 | 第64页 |
·样品采集 | 第64页 |
·测定指标及方法 | 第64页 |
·生产性能指标 | 第64页 |
·胴体指标 | 第64页 |
·肌内脂肪含量测定 | 第64页 |
·回肠粘膜和食糜中拟杆菌、硬壁菌和总细菌数量检测 | 第64页 |
·数据处理和统计分析 | 第64页 |
3 结果 | 第64-69页 |
·生产性能 | 第64-65页 |
·胴体指标和肌内脂肪 | 第65-66页 |
·微生态调节剂对回肠粘膜菌群数最及比例的影响 | 第66-69页 |
·细菌实时荧光定最PCR扩增曲线和溶解曲线 | 第66-67页 |
·微生态调节剂对回肠粘膜硬壁菌和拟杆菌数量和比例的影响 | 第67-68页 |
·肠道菌群和背膘厚度相关性分析 | 第68-69页 |
4 讨论 | 第69-73页 |
·微生态调节剂对DLY猪生产性能的影响 | 第69-70页 |
·微生态调节剂对DM猪和DLY猪脂肪沉积的影响 | 第70-71页 |
·微生态调节剂对回肠粘膜菌群数量及比例的影响 | 第71-72页 |
·肠道微生态调节剂作用下脂肪沉积与肠道粘膜菌群的关系 | 第72-73页 |
5 小结 | 第73-74页 |
试验四 微生态调节剂对猪血清指标、炎症因子和脂肪代谢相关基因表达量的影响 | 第74-96页 |
1 前言 | 第74页 |
2 材料与方法 | 第74-77页 |
·试验设计 | 第74页 |
·试验日粮 | 第74页 |
·饲养管理 | 第74页 |
·样品采集 | 第74-75页 |
·血清、血浆 | 第74-75页 |
·肌肉、脂肪、肝脏 | 第75页 |
·回肠粘膜 | 第75页 |
·测定指标 | 第75-77页 |
·血液指标 | 第75页 |
·血浆脂多糖 | 第75页 |
·血液脂质代谢指标 | 第75页 |
·血清激素 | 第75页 |
·脂肪、肝脏和回肠粘膜mRNA相对表达量测定 | 第75-77页 |
·总RNA提取 | 第75-76页 |
·检测RNA完整性 | 第76页 |
·RNA反转录 | 第76页 |
·引物设计与合成 | 第76-77页 |
·RT-PCR检测基因表达量 | 第77页 |
3 数据处理与统计分析 | 第77页 |
4 结果 | 第77-88页 |
·血浆脂多糖 | 第77-78页 |
·血清葡萄糖和激素 | 第78-79页 |
·血液脂质代谢指标 | 第79-80页 |
·微生态调节剂对基因表达量的影响 | 第80-88页 |
·总RNA质量鉴定 | 第80页 |
·RT-PCR检测目标基因和内参基因 | 第80-81页 |
·基因PCR扩增曲线和溶解曲线 | 第81-85页 |
·炎性细胞因子和TLR4基因相对表达量 | 第85-86页 |
·脂肪代谢相关基因相对表达量 | 第86-88页 |
·肝脏 | 第86-87页 |
·皮下脂肪 | 第87-88页 |
5 讨论 | 第88-95页 |
·微生态调节剂对血浆脂多糖水平的影响 | 第88-89页 |
·微生态调节剂对血清葡萄糖和激素的影响 | 第89-90页 |
·微生态调节剂对血液脂质代谢指标的影响 | 第90-92页 |
·微生态调节剂对基因表达量的影响 | 第92-95页 |
·炎性细胞因子和TLR4基因相对表达量 | 第92-94页 |
·脂肪代谢相关基因相对表达量 | 第94-95页 |
6 小结 | 第95-96页 |
第四部分 本研究的总体讨论与结论 | 第96-104页 |
1 总体讨论 | 第96-101页 |
·回肠食糜和粘膜硬壁菌和拟杆菌数量及比例 | 第96-98页 |
·肠粘膜菌群与脂肪沉积相关性 | 第98-99页 |
·肠粘膜和脂肪组织中TLR4基因和血浆LPS水平与肠道菌群的关系 | 第99-100页 |
·微生态调节剂对回肠菌群、脂肪沉积、代谢的影响 | 第100-101页 |
2 结论 | 第101-102页 |
3 创新点 | 第102-103页 |
4 有待进一步研究的问题 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-120页 |
致谢 | 第120-121页 |
读博士期间发表的论文 | 第121页 |