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人中脑星型胶质来源的神经营养因子MANF基因启动子区域的克隆及功能研究

英文缩略词表(Abbreviation)第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-13页
1. 前言第13-16页
2. 实验材料第16-18页
   ·细胞株、菌株第16页
   ·实验仪器与设备第16-17页
   ·化学试剂第17-18页
3. 实验方法第18-40页
   ·主要试剂溶液的配方第18-19页
   ·人基因组 DNA 提取第19-20页
   ·.MANF 启动子区域的扩增第20-22页
   ·质粒的构建第22-27页
   ·细胞转染用的去内毒素高纯质粒的制备第27-29页
   ·脂质体 Lipofectamin 2000 介导哺乳动物细胞瞬时转染第29页
   ·双荧光素酶的活性检测第29-30页
   ·TESS 生物软件分析启动子上游顺式作用元件第30-31页
   ·免疫印迹(Western Blot)第31-33页
   ·定点突变质粒的构建第33-36页
   ·染色质免疫沉淀实验第36-39页
   ·数据统计学分析第39-40页
4.实验结果第40-54页
   ·生物信息学预测第40-41页
   ·人 MANF 基因潜在启动子区域的相关质粒的构建第41-42页
   ·MANF 基因启动子 EGFP 报告基因的活性分析第42-43页
   ·MANF 基因启动子的双荧光素酶活性分析第43-44页
   ·过表达 XBP1、AP1 和 SP1 增强 MANF 基因启动子活性第44-46页
   ·MANF 蛋白自身转录激活检测第46-47页
   ·MANF 基因启动子 5’端截短质粒的构建第47页
   ·MANF 启动子截短体启动子活性的测定第47-48页
   ·MANF 启动子区域中的 ERSE 顺式作用元件是一个正性激活元件第48-49页
   ·各转录因子结合位点定点突变后的 MANF 基因启动子区荧光素酶活性分析第49-52页
   ·染色质免疫沉淀分析 XBP1 在体内与人 MANF 基因启动子序列相互结合第52-54页
5. 讨论第54-56页
6. 结论第56页
7. 创性新第56-57页
参考文献第57-60页
附录第60-62页
致谢第62-63页
综述第63-75页
 参考文献第72-75页

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