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江苏地区鲫出血病病原的分离、鉴定及检测方法研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 文献综述第11-27页
   ·鲫产业概况第11页
   ·淡水鱼类主要疾病第11-20页
     ·寄生虫病第11-13页
       ·粘孢子虫第12页
       ·锚头蚤第12-13页
       ·指环虫第13页
     ·真菌病第13-14页
     ·细菌病第14-16页
       ·气单胞菌第14-15页
       ·河流弧菌第15-16页
       ·假单胞菌第16页
     ·病毒病第16-20页
       ·呼肠孤病毒第16-17页
       ·虹彩病毒第17-18页
       ·弹状病毒第18-19页
       ·疱疹病毒第19-20页
   ·金鱼造血器官坏死病毒研究现状第20-24页
     ·国内外流行现状第20-21页
     ·CyHV-2的理化特性第21页
     ·流行病学第21-22页
     ·临床症状与病理特征第22页
     ·诊断方法研究进展第22-24页
       ·细胞培养分离技术第22-23页
       ·分子生物学诊断方法第23页
       ·电子显微技术第23-24页
       ·问题与展望第24页
   ·研究目的与意义第24-27页
第二章 异育银鲫出血病病原的分离鉴定第27-41页
   ·材料与方法第27-33页
     ·病毒、实验动物和细胞第27页
     ·试验试剂材料第27-29页
     ·试验溶液的配制第29-30页
       ·细胞培养用试剂第29页
       ·细菌分离纯化培养基第29-30页
     ·主要仪器和设备第30页
     ·细菌学检测第30-31页
       ·细菌分离第30页
       ·细菌形态特征观察和理化特性鉴定第30-31页
       ·人工感染试验第31页
     ·寄生虫镜检第31页
     ·病毒学检测第31-32页
       ·病料的处理第31页
       ·病料的接种和传代第31页
       ·病毒培养物的电镜观察第31-32页
       ·人工感染第32页
     ·分子生物学鉴定第32-33页
       ·DNA的抽提第32-33页
       ·目的基因扩增第33页
       ·阳性克隆的确认第33页
   ·结果第33-40页
     ·临床症状第33-34页
     ·细菌的分离鉴定第34-37页
     ·寄生虫镜检第37页
     ·病毒分离情况及人工感染第37-38页
     ·PCR鉴定和序列分析第38-40页
       ·病鲫组织上清液第38页
       ·KF细胞培养物第38-39页
       ·人工感染鲫的组织上清第39-40页
   ·讨论第40-41页
第三章 GFHNV流行病学特性研究第41-53页
   ·材料与方法第41-44页
     ·实验鱼来源第41页
     ·病毒悬液与对照组注射液的制备第41-42页
     ·试验鱼人工感染途径第42页
     ·宿主范围实验第42页
     ·温度敏感试验第42页
     ·水花的不同浓度浸泡试验第42页
     ·不同鱼龄异育银鲫易感研究第42-43页
     ·感染结果的PCR检测及序列测定第43-44页
       ·DNA抽提第43页
       ·目的基因的扩增第43-44页
       ·阳性克隆的确认和序列分析第44页
   ·结果和分析第44-51页
     ·宿主范围第44-47页
     ·温度敏感性第47-49页
     ·水花不同浓度浸泡致病力试验第49-50页
     ·鲫流行病学试验第50-51页
   ·讨论第51-53页
第四章 异育银鲫出血病的病理学观察第53-63页
   ·材料与方法第53-55页
     ·实验用鱼第53页
     ·试剂配置第53页
     ·主要仪器和设备第53页
     ·常规解剖观察第53-54页
     ·样本组织石蜡切片和H.E.染色第54-55页
       ·样品组织脱水、透明、浸蜡包埋第54页
       ·样品组织第54页
       ·切片第54页
       ·烤片第54页
       ·脱蜡脱水染色第54-55页
     ·电镜切片的制备第55页
   ·结果与分析第55-61页
     ·感染GFHNV异育银鲫的光镜组织病理学研究第55-61页
       ·鳃组织第55-56页
       ·脑组织第56-57页
       ·脾脏组织第57-58页
       ·肠道组织第58-59页
       ·肝胰脏组织第59-60页
       ·肾脏组织第60-61页
     ·感染GFHNV异育银鲫的电镜镜组织病理学研究第61页
   ·讨论第61-63页
第五章 病原(GFHNV)环介导等温扩增(LAMP)检测技术的建立第63-71页
   ·材料与方法第63-66页
     ·病毒悬液和病毒核酸第63页
     ·试剂与主要仪器第63页
     ·引物设计与合成第63-65页
     ·Lamp反应体条件优化第65页
     ·Lamp灵敏度试验第65页
     ·Lamp备选引物特异性试验第65-66页
   ·实验结果第66-70页
     ·Lamp检测反应条件优化结果第66-68页
       ·Lamp引物的筛选第66-67页
       ·Lamp反应温度优化结果第67-68页
     ·灵敏度检测结果第68-69页
     ·特异性检测结果第69-70页
   ·讨论第70-71页
全文总结第71-73页
参考文献第73-81页
致谢第81-83页
攻读学位期间学术会议、学术交流及发表的学术论文第83页

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