| 目录 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-22页 |
| 1. 硒的抗肿瘤作用 | 第9-12页 |
| 2. 结直肠癌的治疗 | 第12-13页 |
| 3. 细胞凋亡概述 | 第13-16页 |
| 4. WNT/β-catenin通路 | 第16-17页 |
| ·WNT信号通路与肿瘤 | 第16页 |
| ·β-catenin与肿瘤 | 第16-17页 |
| 5. FoxO蛋白家族与细胞凋亡 | 第17-20页 |
| 6. 研究目的、内容及意义 | 第20-22页 |
| ·研究目的 | 第20-21页 |
| ·研究内容 | 第21页 |
| ·研究意义 | 第21-22页 |
| 材料和方法 | 第22-53页 |
| 1. 实验材料 | 第22-28页 |
| ·细胞株 | 第22页 |
| ·菌株和质粒 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·使用的抗体 | 第23-24页 |
| ·PCR引物 | 第24页 |
| ·靶基因siRNA的合成 | 第24-25页 |
| ·主要溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26-28页 |
| 2. 实验方法 | 第28-53页 |
| ·细胞的培养、冻存及复苏 | 第28页 |
| ·Western Blot | 第28-31页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术凋亡检测 | 第31-32页 |
| ·免疫共沉淀与GST pull down | 第32-33页 |
| ·免疫细胞化学染色 | 第33页 |
| ·细胞转染(RNAi及质粒转染) | 第33-34页 |
| ·双荧光素酶报告基因实验 | 第34-36页 |
| ·细胞内活性氧检测(DCFH-DA探针法) | 第36页 |
| ·JC-1染色检测线粒体膜电势 | 第36-37页 |
| ·细菌转化与质粒提取 | 第37-38页 |
| ·RNA提取及基因表达分析 | 第38-41页 |
| ·染色质免疫共沉淀—“酶”处理染色质免疫沉淀(琼脂糖微球式) | 第41-47页 |
| ·体外酶活性检测 | 第47-50页 |
| ·肿瘤脏器组织的石蜡块制备及切片 | 第50页 |
| ·免疫组织化学技术 | 第50-51页 |
| ·电镜观察自噬泡形态 | 第51-52页 |
| ·统计分析 | 第52-53页 |
| 实验结果 | 第53-98页 |
| 第一部分 β-catenin对亚硒酸钠诱导结直肠癌细胞凋亡的调控作用 | 第53-60页 |
| ·β-catenin及其靶基因在亚硒酸钠处理的结直肠癌细胞中的变化 | 第53-55页 |
| ·亚硒酸钠抑制AKT的激活调控β-catenin | 第55-59页 |
| ·β-catenin参与硒诱导的结直肠癌细胞凋亡 | 第59-60页 |
| 第二部分 FoxO3a对亚硒酸钠诱导的结直肠癌细胞凋亡的调控 | 第60-80页 |
| ·亚硒酸钠对Src/PI3K/PDK1/AKT通路的调控 | 第61-62页 |
| ·亚硒酸钠对FoxO家族蛋白的调控 | 第62-64页 |
| ·AKT对FoxO3a的调控对亚硒酸钠引起的细胞凋亡的影响 | 第64-69页 |
| ·FoxO3a调节的Bim参与硒诱导的细胞凋亡 | 第69-74页 |
| ·PTEN对AKT/FoxO3a/Bim信号通路及凋亡的调控 | 第74-78页 |
| ·活性氧对亚硒酸钠所诱导的信号通路及凋亡的调控 | 第78-80页 |
| 第三部分 硒调控结直肠癌AKT/β-catenin/FoxO3a依赖的组织凋亡 | 第80-82页 |
| 第四部分 亚硒酸钠诱导的凋亡与自噬的关系 | 第82-98页 |
| ·自噬PCR芯片筛选自噬调控相关基因 | 第82-91页 |
| ·亚硒酸钠对结直肠癌细胞自噬的调控 | 第91-94页 |
| ·亚硒酸钠诱导的细胞自噬与细胞凋亡关系 | 第94-98页 |
| 讨论 | 第98-104页 |
| 1. 亚硒酸钠对β-catenin的调节促进结直肠癌细胞凋亡 | 第98-99页 |
| 2. FoxO与结直肠癌 | 第99-100页 |
| 3. FoxO与β-catenin的相互作用对凋亡的调节 | 第100-101页 |
| 4. 亚硒酸钠诱导的细胞凋亡与细胞自噬 | 第101-102页 |
| 5. 研究展望 | 第102-104页 |
| 全文小结 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-114页 |
| 文献综述 | 第114-124页 |
| 参考文献 | 第121-124页 |
| 缩略词表 | 第124-126页 |
| 个人简历 | 第126-127页 |
| 研究生在读期间参加学术活动、发表论文情况 | 第127-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
