| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-32页 |
| 1. 猪繁殖与呼吸综合征病毒特征 | 第14-15页 |
| ·分类地位 | 第14-15页 |
| ·病毒形态特征 | 第15页 |
| ·病毒理化特性 | 第15页 |
| 2. 猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组及蛋白特性 | 第15-20页 |
| ·基因组结构 | 第15-16页 |
| ·蛋白结构特性 | 第16-20页 |
| 3 RNA病毒的反向遗传学技术研究进展 | 第20-26页 |
| ·RNA病毒反向遗传学技术 | 第20-24页 |
| ·PRRSV反向遗传学技术 | 第24-26页 |
| 4. PRRSV抑制宿主天然免疫反应研究进展 | 第26-32页 |
| ·天然免疫反应概述 | 第26-31页 |
| ·PRRSV抑制天然免疫反应研究进展 | 第31-32页 |
| 第二部分 研究内容 | 第32-102页 |
| 第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒JX-07的分离鉴定 #23及基因组解析 | 第34-58页 |
| 摘要 | 第34页 |
| 1. 材料 | 第34-35页 |
| ·病料来源 | 第34-35页 |
| ·细胞及培养基 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| 2. 方法 | 第35-42页 |
| ·抗GP5单克隆抗体的构建 | 第35-37页 |
| ·病毒的分离及鉴定 | 第37-38页 |
| ·病毒基因组全长序列的测定 | 第38-42页 |
| ·序列分析 | 第42页 |
| 3. 结果与分析 | 第42-55页 |
| ·抗GP5单抗的制备 | 第42-43页 |
| ·病毒的分离鉴定及TCID_(50)测定 | 第43页 |
| ·PRRSV JX-07的基因组测序及序列分析 | 第43-55页 |
| 4. 讨论 | 第55-58页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒JX-07感染性克隆的构建 | 第58-74页 |
| 摘要 | 第58-59页 |
| 1. 材料 | 第59页 |
| ·细胞和病毒 | 第59页 |
| ·载体与试剂 | 第59页 |
| 2. 方法 | 第59-67页 |
| ·JX-07全长cDNA克隆的构建 | 第59-63页 |
| ·定点突变 | 第63-64页 |
| ·重组PRRSV的拯救 | 第64-66页 |
| ·重组病毒的鉴定 | 第66-67页 |
| 3. 结果 | 第67-70页 |
| ·全长cDNA鉴定 | 第67-68页 |
| ·重组PRRSV的拯救及鉴定 | 第68-70页 |
| 4. 讨论 | 第70-74页 |
| ·启动子的选择 | 第70页 |
| ·载体的选择 | 第70-71页 |
| ·病毒的基因序列 | 第71页 |
| ·cDNA克隆低感染性的原因分析及解决方案 | 第71-74页 |
| 第三章 PRRSV感染MARC-145细胞抑制IFN-β表达机制的初步研究 | 第74-102页 |
| 摘要 | 第74-75页 |
| 1. 材料 | 第75页 |
| ·载体、毒株、细胞 | 第75页 |
| ·试剂、酶和主要仪器 | 第75页 |
| 2. 方法 | 第75-85页 |
| ·IRF-3真核表达质粒的构建 | 第75-78页 |
| ·IFN-β启动子荧光素酶报告基因质粒的构建 | 第78-79页 |
| ·4×PRDⅢ启动子荧光素酶报告基因质粒的构建 | 第79-80页 |
| ·转染 | 第80-81页 |
| ·IFN-β基因表达的定量PCR分析 | 第81-82页 |
| ·荧光素酶的活性检测 | 第82-83页 |
| ·PRRSV感染MARC-145细胞对IRF-3表达及分布的影响 | 第83-85页 |
| ·PRRSV感染MARC-145细胞对NF-κB表达及分布的影响 | 第85页 |
| 3. 结果 | 第85-99页 |
| ·IRF-3真核表达质粒表达鉴定 | 第85页 |
| ·荧光素酶报告基因质粒构建及鉴定 | 第85-87页 |
| ·IFN-β基因表达的定量PCR分析 | 第87-90页 |
| ·PRRSV感染MARC-145细胞对IFN-β基因转录因子活性的影响. | 第90-93页 |
| ·PRRSV感染MARC-145细胞对IRF-3表达及分布的影响 | 第93-97页 |
| ·PRRSV感染MARC-145细胞对P65表达及分布的影响 | 第97-99页 |
| 4. 讨论 | 第99-102页 |
| 结论 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-120页 |
| 附录 | 第120-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 作者简介 | 第132-133页 |
