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禽白血病A亚群病毒gp85单因子血清和疫苗的制备及其效果鉴定

中文摘要第1-12页
ABSTRACT第12-14页
1 引言第14-33页
   ·禽白血病的研究进展第14-16页
   ·病原学第16-23页
     ·禽白血病病毒的结构特征第16页
     ·禽白血病病毒的理化特性第16-17页
     ·禽白血病病毒的基因组结构与功能第17-21页
     ·禽白血病病毒的类型第21-23页
   ·禽白血病病毒的致肿瘤机制第23-25页
   ·禽白血病病毒引起的免疫抑制机理第25-26页
   ·禽白血病病毒引起的病理变化第26-28页
   ·禽白血病的检测和诊断技术第28-32页
     ·病毒分离和鉴定第28-29页
     ·血清学检测第29-30页
     ·聚合酶链反应(PCR)技术第30-32页
   ·禽白血病的预防控制第32页
   ·研究的目的和意义第32-33页
2 材料和方法第33-45页
   ·材料第33-37页
     ·病毒第33页
     ·鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备第33-34页
     ·相关试剂第34-37页
       ·细胞培养用试剂第34页
       ·ELISA检测试剂盒第34页
       ·分子生物学试剂第34-37页
       ·试验动物第37页
       ·主要仪器第37页
     ·引物设计第37页
       ·扩增A亚群gp85基因的引物第37页
   ·方法第37-45页
     ·禽白血病A亚群病毒gp85单因子血清的制备及其特异性鉴定第37-44页
       ·病毒感染细胞DNA提取、目的基因的PCR扩增与纯化回收第37-40页
       ·表达重组质粒PET-SDAU09E1-gp85的构建与测序第40-41页
       ·重组融合蛋白trxA-His-S-gp85-His的表达第41-42页
       ·重组菌菌体裂解物的纯化、复性与SDS-PAGE第42页
       ·纯化蛋白的定量与免疫疫苗的制备第42-43页
       ·间接免疫荧光(IFA)鉴定单因子血清第43页
       ·单因子血清对其它已知ALV-A、ALV-B与ALV-J区分鉴定第43页
       ·单因子血清对临床样品的诊断第43-44页
     ·禽白血病A亚群病毒gp85疫苗的制备和及其效果鉴定第44-45页
       ·禽白血病A亚群病毒gp85重组疫苗的制备第44页
       ·某国外进口祖代尼克红4月龄SPF蛋鸡的免疫及免疫前后的抗体水平的检测第44页
       ·免疫祖代SPF蛋鸡后所产鸡蛋中母源ALV-Ab抗体水平的检测第44页
       ·间接免疫荧光技术(IFA)对鸡血清是否产生了抗ALV-A抗体的检测第44-45页
       ·间接免疫荧光技术(IFA)检测鸡体是否产生了抗ALV-B或ALV-J的抗体第45页
       ·含母源抗体受精卵孵化出的雏鸡血清中ALV-Ab抗体的检测第45页
3 结果和分析第45-58页
   ·禽白血病A亚群病毒gp85单因子血清的制备及其特异性鉴定第45-53页
     ·ALV-A SDAU09E1株gp85基因的PCR扩增结果第45-46页
     ·表达重组质粒PET-SDAU09E1-gp85的双酶切鉴定第46页
     ·表达重组质粒PET-SDAU09E1-gp85中gp85目的基因的核酸序列测定第46-49页
     ·不同诱导时间重组质粒PET-SDAU09E1-gp85转化菌裂解物的SDS-PAGE第49-50页
     ·重组菌菌体裂解物纯化后SDS-PAGE鉴定第50页
     ·间接免疫荧光(IFA)鉴定单因子血清结果第50-51页
     ·单因子血清对其他ALV-A、ALV-B与ALV-J的鉴定结果第51-52页
     ·单因子血清对临床样品的诊断结果第52-53页
   ·禽白血病A亚群病毒gp85疫苗的制备及其效果鉴定第53-58页
     ·某进口祖代尼克红蛋鸡免疫前ALV-p27、ALV-Ab和ALV-J抗体检测第53-54页
     ·某进口祖代尼克红蛋鸡免疫后的ALV-Ab抗体水平的检测第54-55页
     ·祖代尼克红蛋鸡所产鸡蛋的母源抗体水平检测第55-56页
     ·间接免疫荧光技术(IFA)对鸡血清中抗ALV-A、ALV-B和ALV-J抗体的检测结果第56-58页
     ·含母源抗体受精卵孵化出的雏鸡血清中ALV-Ab抗体的检测第58页
4 讨论第58-60页
   ·禽白血病A亚群病毒gp85单因子血清及其特异性鉴定第58-59页
   ·禽白血病A亚群病毒gp85疫苗制备及其效果鉴定第59-60页
5 结论第60-61页
   ·禽白血病A亚群病毒gp85单因子血清制备及其特异性鉴定第60页
   ·禽白血病A亚群病毒gp85疫苗的制备及其效果鉴定第60-61页
参考文献第61-68页
致谢第68-69页
个人简介第69-70页
攻读硕士学位期间发表的主要论文第70页

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