| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-15页 |
| 第二章 抗Sp17单克隆抗体体外抗肿瘤实验研究 | 第15-37页 |
| 第一部分 Sp17单抗的纯化和Sp17蛋白在卵巢癌细胞株中的表达 | 第15-23页 |
| 1 主要实验材料、试剂和仪器 | 第15-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-19页 |
| ·Sp17单克隆抗体的纯化 | 第18-19页 |
| ·间接ELISA法测定纯化抗体的效价 | 第19页 |
| 3 实验结果 | 第19-21页 |
| ·Bradford蛋白标准曲线 | 第19-20页 |
| ·3C12单抗亚型鉴定 | 第20页 |
| ·Sp17单抗效价测定 | 第20-21页 |
| 4. 讨论 | 第21-23页 |
| 第二部分 Sp17蛋白在卵巢癌细胞株中的表达 | 第23-28页 |
| 1 主要实验材料、试剂和仪器 | 第23页 |
| 2 实验方法 | 第23-25页 |
| ·卵巢癌细胞的培养 | 第23页 |
| ·卵巢癌细胞蛋白的提取 | 第23-24页 |
| ·Sp17蛋白在三种卵巢癌细胞中的表达 | 第24-25页 |
| ·细胞ELISA检测3C12单抗与天然Sp17蛋白的结合 | 第25页 |
| 3 实验结果 | 第25-26页 |
| ·Sp17蛋白在三种卵巢癌细胞中的表达结果 | 第25-26页 |
| ·细胞ELISA检测3C12单抗与天然Sp17蛋白的结合 | 第26页 |
| 4. 讨论 | 第26-28页 |
| 第三部分 3C12对SKOV3细胞的增殖抑制作用 | 第28-32页 |
| 1 主要实验材料、试剂和仪器 | 第28页 |
| 2. 实验方法 | 第28-29页 |
| ·SKOV3细胞、HO8910细胞和COC2细胞的培养 | 第28页 |
| ·MTT比色法检测3C12单抗对肿瘤细胞的增殖抑制作用 | 第28-29页 |
| ·统计学分析 | 第29页 |
| 3. 实验结果 | 第29-30页 |
| ·3C12单抗对肿瘤细胞的增殖抑制作用 | 第29-30页 |
| 4. 讨论 | 第30-32页 |
| 第四部分 3C12单抗对SKOV3细胞的ADCC和CDC作用 | 第32-37页 |
| 1 主要实验材料、试剂和仪器 | 第32页 |
| 2 实验方法 | 第32-34页 |
| ·SKOV3细胞和COC2细胞的培养 | 第32页 |
| ·外周血单个核细胞(PBMC)的分离 | 第32-33页 |
| ·ADCC检测 | 第33-34页 |
| ·CDC检测 | 第34页 |
| ·统计学分析 | 第34页 |
| 3. 实验结果 | 第34-35页 |
| ·3C12组对SKOV3细胞和COC2细胞的ADCC作用 | 第34-35页 |
| ·3C12对SKOV3细胞和COC2细胞的CDC作用 | 第35页 |
| 4.讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 3C12-DOX偶联物抗肿瘤实验研究 | 第37-53页 |
| 第一部分 Sp17单抗-阿霉素偶联物体外抗肿瘤实验研究 | 第37-44页 |
| 1 主要实验材料、试剂和仪器 | 第38页 |
| 2 实验方法 | 第38-40页 |
| ·细胞ELISA检测3C12-DOX偶联物与天然Sp17蛋白的结合 | 第38-39页 |
| ·3C12-DOX偶联物对靶细胞的增殖抑制作用 | 第39页 |
| ·3C12-DOX偶联物对肿瘤细胞的凋亡检测(参照试剂盒) | 第39-40页 |
| ·统计学分析 | 第40页 |
| 3 实验结果 | 第40-42页 |
| ·3C12-DOX偶联物与天然Sp17蛋白的结合力检测 | 第40页 |
| ·3C12-DOX偶联物对靶细胞的形态学观察 | 第40页 |
| ·3C12-DOX偶联物对靶细胞的增殖抑制作用 | 第40-41页 |
| ·3C12-DOX偶联物对靶细胞的凋亡检测 | 第41-42页 |
| 4. 讨论 | 第42-44页 |
| 第二部分 Sp17肿瘤动物模型建立 | 第44-48页 |
| 1 主要实验材料、试剂和仪器 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-45页 |
| ·SKOV3细胞培养 | 第44页 |
| ·肿瘤动物模型的建立 | 第44-45页 |
| ·裸鼠瘤体生长情况的观察 | 第45页 |
| ·裸鼠肿瘤Sp17表达的检测 | 第45页 |
| 3 实验结果 | 第45-46页 |
| ·裸鼠瘤体生长情况的观察 | 第45-46页 |
| ·裸鼠肿瘤Sp17表达的检测结果 | 第46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 第三部分 3C12-DOX偶联物体内抗肿瘤实验研究 | 第48-53页 |
| 1 主要实验材料、试剂和仪器 | 第48-49页 |
| 2 实验方法 | 第49-50页 |
| ·荷瘤裸鼠的分组 | 第49页 |
| ·荷瘤裸鼠的免疫治疗 | 第49页 |
| ·AST、LDH、CK-MB、MDA和SOD的检测 | 第49页 |
| ·肿瘤组织凋亡检测 | 第49-50页 |
| 3 实验结果 | 第50-52页 |
| ·体内实验3C12-DOX对实体瘤的抑制作用 | 第50-51页 |
| ·Sp17免疫偶联物与DOX毒性比较 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-53页 |
| 结论和展望 | 第53-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
| 综述 | 第56-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 在读硕士期间发表的论文 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
