| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 绪论 | 第11-27页 |
| ·问题的提出 | 第11-12页 |
| ·血管内支架表面的再内皮化 | 第12-17页 |
| ·再狭窄的机制及内皮细胞与再狭窄的关系 | 第12-13页 |
| ·加速血管内支架表面的再内皮化 | 第13-17页 |
| ·VEGF 简介 | 第17-20页 |
| ·VEGF 的结构及功能 | 第17-19页 |
| ·VEGF 受体的结构及功能 | 第19-20页 |
| ·RNA 干涉 | 第20-24页 |
| ·RNAi 现象的发现 | 第20页 |
| ·RNAi 技术的原理 | 第20-22页 |
| ·siRNA 的制备 | 第22-24页 |
| ·本文研究内容 | 第24-25页 |
| ·技术路线 | 第25页 |
| ·本文的创新点 | 第25-27页 |
| 2 转 VEGF 内皮细胞株的建立 | 第27-43页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·实验试剂和培养基 | 第27-28页 |
| ·实验仪器 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-36页 |
| ·人 VEGF121基因 shRNA 序列的设计 | 第28-29页 |
| ·单链 DNA 片段的退火连接 | 第29页 |
| ·酶切和连接反应 | 第29页 |
| ·重组质粒的转化和鉴定 | 第29-32页 |
| ·细胞培养与鉴定 | 第32-33页 |
| ·VEGF121siRNA 分组与转染 | 第33页 |
| ·Western blot 检测 HUVEC VEGF121蛋白的表达 | 第33-36页 |
| ·RT-PCR 检测 HUVEC 细胞 VEGF121基因表达 | 第36页 |
| ·统计学方法 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-41页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第36-38页 |
| ·内皮细胞的鉴定 | 第38-39页 |
| ·内皮细胞的稳定转染 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·结论 | 第42-43页 |
| 3 基因转染对内皮细胞的影响 | 第43-53页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·实验试剂 | 第43页 |
| ·实验仪器 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·MTT 法检测细胞的生长 | 第43-44页 |
| ·划痕法检测细胞的迁移 | 第44页 |
| ·血管生成 | 第44页 |
| ·细胞骨架 | 第44-45页 |
| ·NO 的表达 | 第45-46页 |
| ·统计学分析 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-50页 |
| ·生长曲线的绘制 | 第46-47页 |
| ·细胞迁移 | 第47-48页 |
| ·血管生成 | 第48页 |
| ·细胞骨架 | 第48-49页 |
| ·NO 的表达 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·结论 | 第51-53页 |
| 4 共培养条件下转基因内皮细胞对平滑肌细胞增殖的影响 | 第53-63页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·实验试剂 | 第53页 |
| ·实验仪器 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·平滑肌细胞原代的培养及鉴定 | 第54页 |
| ·内皮细胞与平滑肌细胞共培养系统 | 第54-55页 |
| ·BrdU 法检测细胞的 DNA 合成能力 | 第55页 |
| ·细胞总蛋白的检测 | 第55页 |
| ·平滑肌细胞增殖的抑制 | 第55-56页 |
| ·统计学分析 | 第56页 |
| ·结果 | 第56-60页 |
| ·平滑肌细胞形态和免疫组化鉴定 | 第56-57页 |
| ·VEGF 过表达内皮细胞对平滑肌细胞 DNA 合成的影响 | 第57-58页 |
| ·VEGF 过表达内皮细胞对平滑肌细胞总蛋白合成的影响 | 第58-59页 |
| ·秋水仙素处理对平滑肌细胞增殖的影响 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| ·结论 | 第61-63页 |
| 5 结论和展望 | 第63-65页 |
| ·主要结论 | 第63页 |
| ·存在的不足和后续建议 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-79页 |
| 附录 | 第79页 |
| A. 发表的学术论文 | 第79页 |
| B. 硕士期间参与的科研课题 | 第79页 |
