| 内容提要 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 英文缩写词表 | 第12-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-30页 |
| 第一节 死亡受体家族 | 第14-16页 |
| 1 肿瘤坏死因子家族 | 第14页 |
| 2 死亡受体家族 | 第14-16页 |
| 第二节 死亡受体 6（DR6） | 第16-18页 |
| 1 DR6 的发现 | 第16页 |
| 2 DR6 的结构 | 第16-18页 |
| 3 DR6 的功能研究进展 | 第18页 |
| 第三节 细胞凋亡 | 第18-25页 |
| 1 细胞凋亡与细胞坏死 | 第18-19页 |
| 2 半胱氨酸蛋白酶家族 | 第19-20页 |
| 3 细胞凋亡的主要通路 | 第20-22页 |
| 4 B 细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）家族在细胞凋亡中发挥的作用 | 第22-25页 |
| 第四节 不同类型的细胞程序性死亡 | 第25-26页 |
| 第五节 神经退行性疾病与细胞凋亡的关系 | 第26-28页 |
| 第六节 研究目的和立题依据 | 第28-30页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第30-44页 |
| 第一节 实验材料 | 第30-33页 |
| 1 细胞株与质粒 | 第30页 |
| 2 试剂 | 第30-32页 |
| 3 仪器 | 第32页 |
| 4 实验缓冲液 | 第32-33页 |
| 第二节 实验方法 | 第33-44页 |
| 1 重组质粒的构建 | 第33-39页 |
| ·目的基因的扩增、纯化、酶切及回收 | 第33-37页 |
| ·重组质粒的构建、转化及鉴定 | 第37-39页 |
| 2 细胞培养和转染 | 第39-40页 |
| 3 HeLa 细胞稳定的四环素诱导 DR6 表达系统的建立 | 第40页 |
| 4 细胞胞浆与含有线粒体的膜组分的分离 | 第40-41页 |
| 5 小干扰 RNA（siRNA）转染 | 第41页 |
| 6 免疫印迹实验 | 第41-42页 |
| 7 免疫沉淀实验 | 第42页 |
| 8 流式细胞仪测定细胞凋亡 | 第42-44页 |
| 第三章 实验结果 | 第44-70页 |
| 第一节 含有四环素诱导表达 DR6 系统的 HeLa 细胞株的建立 | 第44-50页 |
| 1 目的基因片段的扩增 | 第44页 |
| 2 T-A 克隆及质粒鉴定 | 第44-46页 |
| ·酶切分析 | 第44-45页 |
| ·测序鉴定 | 第45-46页 |
| 3 重组质粒的鉴定 | 第46-48页 |
| ·酶切分析 | 第47页 |
| ·测序鉴定 | 第47-48页 |
| 4 含四环素诱导表达 DR6 系统的 HeLa 细胞株的建立 | 第48-49页 |
| 5 不同浓度的四环素诱导 DR6 表达的效率 | 第49-50页 |
| 第二节 DR6 诱导细胞凋亡发生的机制 | 第50-70页 |
| 1 DR6 在不同细胞中过表达可诱导细胞凋亡的发生 | 第50-52页 |
| ·瞬时转染 DR6 在不同细胞中可诱导细胞凋亡 | 第50-51页 |
| ·ANNEXIN V/PI 双染色方法检测 DR6 诱导的细胞凋亡 | 第51-52页 |
| 2 Time-course 实验检测 TRE-HeLa 细胞中过表达 DR6 诱发的细胞凋亡 | 第52-55页 |
| ·Time-course 实验检测 DR6 的过表达切割 PARP 及活化caspase | 第52-53页 |
| ·Time-course 实验检测 DR6 的过表达对线粒体促凋亡相关蛋白的影响 | 第53-55页 |
| 3 DR6 诱导的细胞凋亡不依赖于 CASPASE-8 的活性 | 第55-62页 |
| ·caspase-8 抑制剂—Z-IETD 不影响 DR6 诱导的细胞凋亡 | 第55-59页 |
| ·caspase-8 抑制剂—Z-IETD 完全阻断 TNF-α诱导的细胞凋亡 | 第59-60页 |
| ·caspase-8 蛋白表达水平的降低不影响 DR6 诱导的细胞凋亡 | 第60-62页 |
| 4 抗凋亡蛋白 Bcl-2 及 Bcl-xL 的过表达抑制 DR6 诱导的细胞凋亡 | 第62-65页 |
| ·抗凋亡蛋白 Bcl-2 及 Bcl-xL 的过表达抑制 DR6 介导的细胞色素 C 释放及 Bax 转移 | 第62页 |
| ·抗凋亡蛋白 Bcl-2 及 Bcl-xL 过表达可抑制 DR6 切割 PARP，Bid 及活化 caspase | 第62-65页 |
| 5 Bax 介导 DR6 过表达诱发的细胞凋亡 | 第65-67页 |
| ·Bax 蛋白水平的下降抑制 DR6 切割 PARP 及 tBid 的生成 | 第65页 |
| ·Bax 蛋白表达水平的降低阻断细胞色素 C 释放及 caspase 的活化 | 第65-67页 |
| 6 DR6 与 Bax 之间的相互作用介导 DR6 诱发的细胞凋亡 | 第67-70页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第70-78页 |
| 第一节 讨论 | 第70-77页 |
| 第二节 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-85页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
