| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| 1 植物抗逆基因研究进展 | 第11-16页 |
| ·信号传导途径相关基因 | 第11-12页 |
| ·渗透作用相关的小分子合成基因 | 第12-13页 |
| ·脯氨酸合成相关基因 | 第12-13页 |
| ·甜菜碱合成相关基因 | 第13页 |
| ·多元醇合成相关基因 | 第13页 |
| ·与抗逆相关的蛋白质合成基因 | 第13-16页 |
| ·LEA蛋白基因 | 第14页 |
| ·水通道蛋白基因 | 第14-15页 |
| ·抗冻蛋白基因 | 第15页 |
| ·抗氧化酶基因 | 第15-16页 |
| ·转录因子基因 | 第16页 |
| 2 DREB转录因子概述 | 第16-21页 |
| ·DREB转录因子的发现 | 第16-17页 |
| ·DREB转录因子的分类及结构特点 | 第17-19页 |
| ·DREB转录因子的表达调控 | 第19页 |
| ·DREB转录因子在抗逆基因工程中的应用 | 第19-21页 |
| 3 百合的抗性研究进展 | 第21-23页 |
| ·百合简介 | 第21-22页 |
| ·百合抗性研究现状 | 第22-23页 |
| ·百合抗性生理研究 | 第22页 |
| ·百合抗性分子育种研究 | 第22-23页 |
| 4 矮牵牛抗性研究进展 | 第23-24页 |
| ·矮牵牛简介 | 第23页 |
| ·矮牵牛抗性研究现状 | 第23-24页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 麝香百合DREB1基因的克隆 | 第25-45页 |
| 1 材料与方法 | 第26-34页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·酶与生化试剂 | 第26页 |
| ·载体质粒与菌株 | 第26页 |
| ·仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-34页 |
| ·麝香百合叶片胁迫处理方法 | 第26-27页 |
| ·麝香百合叶片RNA提取方法 | 第27-28页 |
| ·RNA反转录 | 第28页 |
| ·麝香百合叶片DNA的提取方法 | 第28-29页 |
| ·引物设计 | 第29-31页 |
| ·DREB1基因核心片段的扩增 | 第31页 |
| ·DREB1基因全长的扩增 | 第31-32页 |
| ·片段回收与T-载体连接 | 第32-33页 |
| ·转化克隆与测序 | 第33-34页 |
| ·序列分析软件和网站 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-43页 |
| ·不同方法提取麝香百合叶片RNA的效果 | 第34-35页 |
| ·麝香百合DREB1基因片段的获得 | 第35-36页 |
| ·麝香百合DREB1基因全长的获得 | 第36-38页 |
| ·3’RACE片段的获得 | 第36-37页 |
| ·5’TAIL片段的获得 | 第37-38页 |
| ·DREB1基因全长的获得 | 第38页 |
| ·麝香百合DREB1转录因子同源性分析 | 第38-43页 |
| ·DREB1转录因子氨基酸同源性分析 | 第38-40页 |
| ·DREB1转录因子进化分析 | 第40-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| ·关于麝香百合叶片RNA提取方法的确定 | 第43页 |
| ·关于3’RACE-PCR和5’TAIL-PCR | 第43-44页 |
| ·关于麝香百合DREB1基因的克隆 | 第44页 |
| ·关于麝香百合DREB1转录因子进化分析 | 第44-45页 |
| 第三章 麝香百合DREB1基因表达分析 | 第45-50页 |
| 1 材料与方法 | 第45-46页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·胁迫处理和采样方式 | 第45-46页 |
| ·麝香百合叶片RNA提取 | 第46页 |
| ·RNA反转录 | 第46页 |
| ·RT-PCR表达分析 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-48页 |
| ·低温处理下麝香百合DREB1基因的表达分析 | 第46-47页 |
| ·干旱处理下麝香百合DREB1基因的表达分析 | 第47页 |
| ·高盐处理下麝香百合DREB1基因的表达分析 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| ·关于反转录和内参基因调平 | 第48页 |
| ·关于麝香百合DREB1基因的表达分析 | 第48-50页 |
| 第四章 麝香百合DREB1基因超量表达载体的构建 | 第50-54页 |
| 1 材料与方法 | 第50-52页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·载体与感受态 | 第50页 |
| ·阳性克隆载体 | 第50页 |
| ·酶与其他材料 | 第50-51页 |
| ·方法 | 第51-52页 |
| ·菌株活化与质粒提取 | 第51页 |
| ·双酶切及片段回收 | 第51-52页 |
| ·表达载体连接与转化农杆菌 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-54页 |
| 第五章 矮牵牛DREB基因的克隆及表达分析与载体构建 | 第54-62页 |
| 1 材料与方法 | 第54-57页 |
| ·研究材料 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-57页 |
| ·矮牵牛叶片DNA的提取 | 第54页 |
| ·矮牵牛叶片低温处理方式 | 第54页 |
| ·S6矮牵牛叶片RNA提取与反转录 | 第54页 |
| ·引物设计 | 第54-56页 |
| ·基因克隆与表达分析的体系及程序 | 第56页 |
| ·片段回收与T-载体连接 | 第56页 |
| ·转化克隆与测序 | 第56-57页 |
| ·序列分析比对网站 | 第57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-60页 |
| ·矮牵牛DNA的提取 | 第57页 |
| ·矮牵牛RNA的提取 | 第57-58页 |
| ·矮牵牛DREB基因全长的克隆 | 第58-59页 |
| ·测序结果分析 | 第59页 |
| ·低温处理下矮牵牛DREB基因的表达分析 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| ·关于矮牵牛DNA的提取 | 第60页 |
| ·关于矮牵牛叶片RNA的提取 | 第60页 |
| ·关于矮牵牛DREB基因的扩增 | 第60页 |
| ·关于矮牵牛DREB基因的表达分析 | 第60-62页 |
| 第六章 矮牵牛DREB基因超量表达载体的构建 | 第62-66页 |
| 1 材料与方法 | 第62-63页 |
| ·材料 | 第62页 |
| ·载体与感受态 | 第62页 |
| ·酶与其他材料 | 第62页 |
| ·阳性克隆载体 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-63页 |
| ·菌株活化与质粒提取 | 第62页 |
| ·双酶切及片段回收 | 第62-63页 |
| ·表达载体连接与转化农杆菌 | 第63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-65页 |
| 3 讨论 | 第65-66页 |
| 总结与展望 | 第66-68页 |
| 1 本实验的总结及后续相关工作 | 第66页 |
| 2 DREB转录因子的研究展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74页 |