| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语(Abbreviation) | 第10-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-24页 |
| 1 猪繁殖与呼吸综合征概述 | 第12-22页 |
| ·病原学 | 第12-13页 |
| ·流行病学与遗传变异 | 第13-15页 |
| ·临床症状及病理变化 | 第15-16页 |
| ·诊断方法 | 第16-19页 |
| ·防制 | 第19-22页 |
| 2 荧光定量PCR技术概述 | 第22-23页 |
| ·技术原理 | 第22页 |
| ·FQ-PCR的分类 | 第22-23页 |
| 3 研究目的与研究意义 | 第23页 |
| 4 研究内容与技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量PCR方法的建立 | 第24-40页 |
| 1 材料 | 第24-26页 |
| ·病毒株与细胞株 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·溶液的配制 | 第24-25页 |
| ·培养基及其配制 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-32页 |
| ·探针与引物的设计合成 | 第26-28页 |
| ·病毒核酸的提取 | 第28页 |
| ·反转录制备cDNA | 第28页 |
| ·标准品的制备 | 第28-31页 |
| ·反应体系与条件的优化 | 第31页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第31页 |
| ·方法评价 | 第31-32页 |
| 3 结果 | 第32-38页 |
| ·引物筛选结果 | 第32-33页 |
| ·标准品的制备 | 第33-34页 |
| ·优化的反应体系与反应条件 | 第34-35页 |
| ·动力学曲线与标准曲线 | 第35-36页 |
| ·特异性试验 | 第36-37页 |
| ·敏感性试验 | 第37-38页 |
| ·重复性试验 | 第38页 |
| ·与普通PCR及病毒分离方法的比较 | 第38页 |
| 4 讨论 | 第38-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 第三章 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒GD株不同代次毒株的体内特性研究 | 第40-61页 |
| 1 材料 | 第40-42页 |
| ·病毒株与试验动物 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40-41页 |
| ·溶液的配制 | 第41页 |
| ·主要仪器设备 | 第41-42页 |
| 2 方法 | 第42-45页 |
| ·实验设计 | 第42页 |
| ·石蜡组织切片的制作 | 第42-43页 |
| ·苏木精-伊红(HE)染色 | 第43页 |
| ·免疫组化染色(Immunohistochemistry) | 第43-44页 |
| ·病毒RNA的提取及反转录 | 第44页 |
| ·实时荧光定量PCR检测各组织中病毒载量 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-56页 |
| ·临床症状 | 第45-46页 |
| ·剖检变化 | 第46页 |
| ·组织器官显微病理变化 | 第46-50页 |
| ·免疫组化(Immunohistochemistry)检测结果 | 第50-52页 |
| ·荧光定量PCR检测各组织中的病毒载量 | 第52-56页 |
| 4 讨论 | 第56-61页 |
| ·试验设计 | 第56-57页 |
| ·仔猪接种后临床病理学评价 | 第57页 |
| ·不同时期仔猪体内抗原的动态分布 | 第57-59页 |
| ·GDr180株的致弱效果 | 第59-60页 |
| ·结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 附录 | 第72-89页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第89页 |
