| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-12页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第12-24页 |
| ·材料 | 第12-16页 |
| ·细胞系及组织标本 | 第12页 |
| ·主要试剂 | 第12-15页 |
| ·主要实验仪器和软件 | 第15-16页 |
| ·实验方法 | 第16-23页 |
| ·黑色素痣收集及保存 | 第16页 |
| ·A375细胞的培养 | 第16-17页 |
| ·microRNA mimics及Negtive control转染 | 第17-18页 |
| ·Real-time PCR检测组织及细胞let-7b/miR-33a的表达 | 第18-21页 |
| ·MTT法分析细胞增殖 | 第21页 |
| ·葡萄糖及乳酸浓度检测 | 第21-22页 |
| ·Affimetrix基因芯片检测mRNA差异表达谱 | 第22-23页 |
| ·统计学分析 | 第23-24页 |
| 第三章 结果 | 第24-53页 |
| ·LET-7B/MIR-33A在A375黑色素瘤细胞和黑色素痣中的表达差异 | 第24-26页 |
| ·A375细胞及黑色素痣组织RNA样品质检 | 第24页 |
| ·real-time PCR检测let-7b及miR-33a在黑色素痣及A375黑色素瘤细胞中的表达水平 | 第24-26页 |
| ·LET-7B/MIR-33A过表达后A375细胞增殖改变 | 第26-33页 |
| ·A375黑色素瘤细胞脂质体转染let-7b/miR-33a mimics | 第26-27页 |
| ·Real-time PCR验证let-7b/miR-33a基因的表达 | 第27-30页 |
| ·MTT法检测细胞增殖活性 | 第30-32页 |
| ·葡萄糖消耗及乳酸产量、L/G比值糖酵解效率 | 第32-33页 |
| ·AFFYMETRIX表达谱基因芯片筛选差异表达基因 | 第33-53页 |
| ·基因芯片原始扫描图及放大图 | 第33页 |
| ·芯片信号值散点图 | 第33-34页 |
| ·基因差异表达谱 | 第34-40页 |
| ·差异表达基因GO分析 | 第40-51页 |
| ·差异表达基因Pathway分析结果 | 第51-53页 |
| 第四章 讨论 | 第53-63页 |
| ·黑色素瘤及其有氧糖酵解表型 | 第53-55页 |
| ·LET-7B及MIR-33A在黑色素瘤中的表达情况 | 第55-57页 |
| ·LET-7B及MIR-33A过表达后基因组表达谱改变 | 第57-59页 |
| ·LET-7B及MIR-33A对A375黑色素瘤细胞增殖的影响及机制探讨 | 第59-61页 |
| ·LET-7B及MIR-33A过表达对A375黑色素瘤细胞有氧糖酵解的影响 | 第61-63页 |
| 第五章 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 综述 | 第70-79页 |
| 参考文献 | 第76-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读硕士期间主要的研究成果 | 第80页 |
