| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略表 | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-26页 |
| ·乳铁蛋白研究进展 | 第9-24页 |
| ·简介 | 第9页 |
| ·乳铁蛋白基因及其表达 | 第9-12页 |
| ·乳铁蛋白分子结构 | 第12-13页 |
| ·乳铁蛋白分布与含量 | 第13页 |
| ·乳铁蛋白生物学功能 | 第13-19页 |
| ·乳铁蛋白异源表达研究 | 第19-22页 |
| ·乳铁蛋白开发及应用前景 | 第22-24页 |
| ·本研究的目的意义 | 第24页 |
| ·本研究的立题依据 | 第24-26页 |
| 第二章 小鼠乳铁蛋白cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达 | 第26-44页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·动物材料 | 第26页 |
| ·质粒与菌株 | 第26页 |
| ·工具酶与其它生化试剂 | 第26页 |
| ·引物合成及DNA测序 | 第26页 |
| ·培养基及缓冲液等配制 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-36页 |
| ·小鼠乳腺组织中总RNA的提取 | 第28页 |
| ·PCR引物的合成 | 第28页 |
| ·RT-PCR | 第28-29页 |
| ·小鼠乳铁蛋白(MLF)表达载体的构建 | 第29-31页 |
| ·小鼠乳铁蛋白N叶(MLFN)表达载体的构建 | 第31-33页 |
| ·重组质粒转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3) | 第33页 |
| ·重组蛋白表达及纯化 | 第33-34页 |
| ·重组蛋白Western Blot分析 | 第34页 |
| ·重组蛋白体外复性 | 第34-36页 |
| ·重组蛋白抑菌活性检测 | 第36页 |
| ·实验结果 | 第36-42页 |
| ·小鼠乳铁蛋白cDNA克隆及序列分析 | 第36-39页 |
| ·MLF和MLF-N表达载体构建 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白表达和纯化 | 第40-41页 |
| ·重组蛋白体外复性 | 第41页 |
| ·重组蛋白抑菌活性分析 | 第41-42页 |
| ·讨论与结论 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·结论 | 第43-44页 |
| 第三章 小鼠乳铁蛋白N-叶在毕赤酵母中的表达 | 第44-56页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·质粒与菌株 | 第44页 |
| ·DNA修饰酶类与其他生化试剂 | 第44页 |
| ·引物合成及DNA测序 | 第44页 |
| ·培养基及缓冲液等配制 | 第44页 |
| ·主要仪器设备 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-51页 |
| ·小鼠乳铁蛋白N-叶单拷贝表达载体构建及鉴定 | 第44-46页 |
| ·体外构建小鼠乳铁蛋白N-叶多拷贝表达载体及其鉴定 | 第46-49页 |
| ·小鼠乳铁蛋白N-叶单拷贝表达载体pPICZaA-MLFN的电转化与筛选 | 第49-50页 |
| ·重组酵母诱导表达及目的蛋白纯化 | 第50页 |
| ·Western Blot检测rMLFN | 第50页 |
| ·rMLFN铁结合活性分析 | 第50-51页 |
| ·rMLFN抑菌活性检测 | 第51页 |
| ·实验结果 | 第51-54页 |
| ·MLFN基因的制备 | 第51页 |
| ·体外构建小鼠乳铁蛋白N-叶多拷贝表达载体 | 第51-52页 |
| ·SDS-PAGE分析确定重组蛋白的最佳诱导时间 | 第52页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第52-53页 |
| ·rMLFN铁结合活性分析 | 第53页 |
| ·rMLFN抑菌结果 | 第53-54页 |
| ·讨论与结论 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 研究生就读期间发表的论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
