| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-22页 |
| ·分子标记技术 | 第15-16页 |
| ·PCR-RFLP 技术 | 第15页 |
| ·单核苷酸多态性 | 第15-16页 |
| ·RARRES2 基因家族研究进展 | 第16-19页 |
| ·RARRES2 基因结构特征 | 第17页 |
| ·RARRES2 蛋白结构特征 | 第17-18页 |
| ·RARRES2 对脂肪组织的生物学效应 | 第18-19页 |
| ·脂肪因子对骨骼组织生长发育的影响 | 第19页 |
| ·Visfatin 基因研究进展 | 第19-21页 |
| ·Visfatin 基因结构特征 | 第19-20页 |
| ·Visfatin 基因的生物学效应 | 第20-21页 |
| ·研究内容和目的意义 | 第21-22页 |
| 第二章 牛RARRES2 基因多态性研究 | 第22-37页 |
| ·材料和方法 | 第22-23页 |
| ·动物样本及数据来源 | 第22页 |
| ·试验主要试剂 | 第22页 |
| ·血样的采集 | 第22页 |
| ·牛血液基因组DNA 提取 | 第22页 |
| ·DNA 池的构建 | 第22页 |
| ·引物设计及PCR 扩增 | 第22-23页 |
| ·PCR 反应体系 | 第23页 |
| ·PCR-RFLP 技术 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-35页 |
| ·牛RARRES2 基因PCR 扩增产物检测 | 第23-24页 |
| ·牛混合DNA 池技术的测序结果 | 第24-25页 |
| ·牛 RARRES2 基因 Forced PCR-RFLP 技术检测结果及各基因型的测序结果 | 第25-28页 |
| ·牛RARRES2 基因SNPs 的群体遗传学分析 | 第28-30页 |
| ·黄牛 RARRES2 基因 SNPs 与生长性状的相关性分析 | 第30-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| ·不同牛品种RARRES2 基因遗传结构特征 | 第35-36页 |
| ·RARRES2 基因对生长性状的影响 | 第36-37页 |
| 第三章 黄牛Visfatin 基因多态性研究 | 第37-42页 |
| ·材料与方法 | 第37-38页 |
| ·动物样本及数据来源 | 第37页 |
| ·PCR 引物设计 | 第37页 |
| ·混合DNA 池的构建 | 第37页 |
| ·PCR 扩增条件及程序 | 第37页 |
| ·混合DNA 扩增产物送测序 | 第37页 |
| ·DraI PCR-RFLP 技术检测分析 | 第37-38页 |
| ·不同基因型PCR 产物测序 | 第38页 |
| ·资料的统计与分析 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-39页 |
| ·PCR 扩增产物检验 | 第38页 |
| ·不同基因型测序结果 | 第38-39页 |
| ·PCR-RFLP 检测结果 | 第39页 |
| ·Visfatin 基因遗传多态性指标分析 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 黄牛Visfatin 基因的克隆与大肠杆菌表达 | 第42-51页 |
| ·材料与方法 | 第42-45页 |
| ·组织采集 | 第42页 |
| ·材料和试剂 | 第42页 |
| ·试剂盒提取组织总RNA | 第42页 |
| ·引物的设计与合成 | 第42页 |
| ·RT-PCR 法扩增Visfatin 基因编码区 | 第42-43页 |
| ·pGM-T-Visfatin 克隆载体和pET28a（+）-Visfatin 表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·细菌的转化 | 第44页 |
| ·pET28a（+）-Visfatin 表达载体的菌落PCR 鉴定及双酶切鉴定 | 第44-45页 |
| ·pET28a（+）-Visfatin 表达载体测序 | 第45页 |
| ·pET28a（+）-Visfatin 表达载体的转化 | 第45页 |
| ·秦川牛Visfatin 基因的大肠杆菌表达 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-49页 |
| ·RT-PCR 法扩增Visfatin 基因编码区 | 第45-46页 |
| ·pGM-T-Visfatin 和 pET-28a(+)-Visfatin 双酶切结果 | 第46-47页 |
| ·pET-28a(+)-Visfatin 的测序结果 | 第47-48页 |
| ·秦川牛Visfatin 基因的诱导表达 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·组织总RNA 提取 | 第49页 |
| ·关于RT-PCR 方法 | 第49-50页 |
| ·关于秦川牛pET-28a(+)-Visfatin 重组载体的转化试验 | 第50页 |
| ·关于诱导 Visfatin 基因表达 | 第50-51页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第51-52页 |
| ·结论 | 第51页 |
| ·牛 RARRES2 基因 4 个新的单核苷酸多态性的发现 | 第51页 |
| ·牛 RARRES2 基因与南阳牛和郏县红牛体尺性状显著相关 | 第51页 |
| ·草原红牛Visfatin 基因内含子5 基因座检测到一稀有基因型 | 第51页 |
| ·秦川牛 Visfatin 基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达 | 第51页 |
| ·创新点 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录1. 试验材料及主要试剂 | 第57-60页 |
| 附录2 实验所用主要仪器 | 第60-61页 |
| 附录3 统计分析所使用的公式 | 第61-63页 |
| 附录4 组织总RNA 的提取及血液基因组DNA 的提取 | 第63-65页 |
| 附录5 PCR 和RT-PCR 扩增Visfatin 基因的程序及体系 | 第65-66页 |
| 附录6 细菌的转化过程 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
