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小麦脱镁叶绿酸α加氧酶基因(TaPaO)的克隆及表达分析

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
1 前言第12-29页
   ·叶片衰老第12-18页
     ·植物叶片衰老过程的生理变化第12-13页
     ·植物叶片衰老机理第13-17页
     ·与叶片衰老相关的基因第17-18页
     ·叶片衰老相关基因的表达调控第18页
   ·叶绿素的降解第18-25页
     ·叶绿素分子的结构第18页
     ·叶绿素的降解途径第18-21页
     ·降解代谢途径的修正第21-23页
     ·降解途径的分子调控第23-25页
     ·叶绿素降解的意义第25页
   ·PaO 的结构特点、生理功能及研究进展第25-28页
     ·PaO 的结构特点与生理功能第25-26页
     ·PaO 的研究进展第26-28页
   ·本研究的目的及意义第28-29页
2 材料与方法第29-42页
   ·实验材料第29-30页
     ·植物材料第29页
     ·菌株与质粒第29页
     ·酶与各种生化试剂第29页
     ·PCR 引物第29-30页
   ·实验方法第30-42页
     ·实验材料的培养与处理第30-31页
       ·实验材料的培养第30页
       ·实验材料的处理第30-31页
     ·植物总 RNA 的提取与检测第31-32页
       ·利用 RNeasy Plant Mini Kit 提取总 RNA第31页
       ·利用 Trizol 试剂盒提取 RNA第31页
       ·RNA 中基因组 DNA 的去除第31-32页
       ·甲醛变性凝胶进行 RNA 电泳第32页
     ·cDNA 第一链的合成第32-33页
     ·cDNA 纯化(用于 5 RACE)第33页
     ·cDNA 的末端加尾反应(用于 5 RACE)第33-34页
     ·目的片段的回收第34页
     ·目的片段与克隆载体的连接第34-35页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第35页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第35页
       ·大肠杆菌感受态细胞的转化第35页
     ·大肠杆菌质粒 DNA 的提取第35-37页
       ·大量法提取质粒 DNA第35-36页
       ·试剂盒质粒微量提取方案第36-37页
     ·对重组质粒的酶切鉴定第37页
     ·DNA 序列测定第37-38页
     ·cDNA 全长序列的获得第38-40页
       ·中间片段的扩增第38页
       ·3′ RACE 获得 3′端序列第38-39页
       ·5′ RACE 获得 5′端序列第39-40页
       ·cDNA 全长序列的获得第40页
     ·实时荧光定量 PCR 分析第40-42页
3 结果与分析第42-54页
   ·小麦 TaPaO 基因的分离第42-45页
     ·小麦叶片 RNA 的提取及反转录第42页
     ·TaPaO 中间片段的分离第42-43页
     ·TaPaO3′片段的分离第43页
     ·TaPaO5′片段的分离第43-44页
     ·TaPaO 全长 cDNA 的分离第44-45页
   ·TaPaO 的序列分析第45-49页
     ·TaPaO 的全长 cDNA 序列分析第45-46页
     ·TaPaO 编码的蛋白质序列分析第46-49页
     ·TaPaO 的聚类分析第49页
   ·TaPaO 的表达特性分析第49-54页
     ·总 RNA 样品的质量检测第49-50页
     ·TaPaO 在不同组织部位中的表达特性第50页
     ·不同激素诱导下 TaPaO 的表达分析第50-51页
     ·不同非生物胁迫下 TaPaO 的表达分析第51-52页
     ·不同生物胁迫下 TaPaO 的表达分析第52-54页
4 讨论第54-57页
   ·基因的克隆第54-55页
   ·组织表达特点第55页
   ·TaPaO 基因受 ABA 和 MeJA 依赖的防御信号途径的调控第55页
   ·TaPaO 基因参与小麦对不同胁迫条件的防御过程第55-56页
   ·植物 PaO 基因研究的展望第56-57页
5 结论第57-58页
参考文献第58-65页
致谢第65-66页
攻读学位期间发表论文情况第66页

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