鲑鱼降钙素基因在大肠杆菌中的表达纯化及药理活性研究
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 引言 | 第7-8页 |
| 第1部分 概述 | 第8-18页 |
| ·国内外研究的现状 | 第8-13页 |
| ·降钙素的结构与性质 | 第8-10页 |
| ·降钙素的制备 | 第10-11页 |
| ·降钙素的药理作用、作用机制及临床应用 | 第11-13页 |
| ·本文主要内容和技术路线 | 第13-18页 |
| 第2部分 工程菌的构建 | 第18-31页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-25页 |
| ·插入的DNA片断的制备 | 第19-24页 |
| ·表达质粒pTWIN-1/sCT的构建 | 第24-25页 |
| ·结果 | 第25-27页 |
| ·插入DNA片段的制备 | 第25-26页 |
| ·表达质粒pTWIN-1/sCT的构建 | 第26-27页 |
| ·分析与讨论 | 第27-31页 |
| 第3部分 工程菌的发酵 | 第31-44页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-38页 |
| ·摇瓶发酵的优化 | 第32-33页 |
| ·菌体收获 | 第33页 |
| ·破菌 | 第33页 |
| ·目的蛋白的定量和鉴定分析 | 第33-37页 |
| ·流加发酵 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-41页 |
| ·摇瓶发酵的优化 | 第38-39页 |
| ·Western Blotting分析 | 第39-40页 |
| ·流加发酵 | 第40-41页 |
| ·分析与讨论 | 第41-44页 |
| 第4部分 目的蛋白的纯化和鉴定 | 第44-51页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-46页 |
| ·目的蛋白的剪切、修饰及纯化 | 第44-46页 |
| ·目的蛋白的理化鉴定 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-48页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第46-47页 |
| ·目的蛋白的定性和纯度鉴定 | 第47-48页 |
| ·目的蛋白的等电点测定 | 第48页 |
| ·分析与讨论 | 第48-51页 |
| 第5部分 药理活性的初步检测 | 第51-56页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-53页 |
| ·对大鼠破骨细胞活动的影响 | 第51-53页 |
| ·大鼠血清钙降低法 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-55页 |
| ·对大鼠破骨细胞的作用 | 第53-54页 |
| ·对大鼠血清钙的影响 | 第54-55页 |
| ·分析与讨论 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
