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稻瘟病菌相关致病基因MgATG3、MgATG4和MgATG7的克隆和功能分析

致谢第1-7页
摘要第7-8页
ABSTRACT第8-11页
第一章 文献综述第11-45页
 1 稻瘟病与稻瘟病菌第11-35页
   ·稻瘟病菌的侵染循环第12-14页
     ·孢子萌发第12页
     ·附着胞的形成第12-13页
     ·侵入栓形成和侵入第13页
     ·侵入后的菌丝分化与扩展第13-14页
     ·产孢与再侵染第14页
   ·稻瘟病菌的致病相关基因第14-32页
     ·参与产孢过程的基因第14-15页
     ·附着胞分化和成熟过程中的功能基因第15-27页
     ·附着胞成熟过程中的功能基因第27-29页
     ·侵入栓形成及侵入相关基因第29-30页
     ·侵入后菌丝分化及扩展相关的基因第30-32页
   ·其他相关基因第32-35页
 2 细胞自噬第35-43页
   ·细胞自噬的类型第35-36页
   ·细胞自噬发生过程的分子机制第36-41页
     ·细胞自噬发生的诱导以及物质的选择和包装第36-39页
     ·自噬体的形成第39-41页
   ·细胞自噬的信号调控第41-43页
     ·TOR信号途径第42页
     ·CLASS Ⅰ PI3K/PKB途径第42页
     ·GαI3蛋白第42-43页
 3 本研究的目的和意义第43-45页
第二章 材料与方法第45-63页
   ·MGATG3、MGATG4和MGATG7基因确定与序列比对第45页
   ·实验材料第45-48页
     ·细菌菌株以及稻瘟病菌菌株第45页
     ·培养基配制第45-48页
     ·菌株的保存与培养第48页
   ·DNA相关操作第48-59页
     ·常规PCR、长片段PCR(>4KB)第48-50页
     ·PCR产物的克隆第50页
     ·序列测定第50页
     ·DNA克隆程序第50-55页
     ·基因组DNA提取第55-56页
     ·SOUTHERN杂交第56-59页
   ·MGATG3、MGATG4和MGATG7基因敲除及突变子功能分析第59-61页
     ·基因置换载体的构建第59页
     ·互补载体的构建第59页
     ·稻瘟病菌原生质体的制备与转化第59-61页
   ·MGATG4基因的GFP表达分析第61页
     ·融合载体的构建第61页
   ·稻瘟病菌突变体的形态学观察第61-63页
     ·生长速度与产孢量第61页
     ·附着胞的诱导第61页
     ·大麦叶片致病性测定第61-63页
第三章 MGATG4基因的克隆与分析第63-73页
   ·MGATG4基因的确定第63-64页
   ·MGATG4置换载体的构建第64-69页
     ·构建思路第64-65页
     ·基因上游和下游片断的PCR扩增与克隆第65-66页
     ·基因上下游片断与PBS-HPH载体的连接和酶切验证第66-67页
     ·稻瘟病菌突变子的获得第67-69页
   ·⊿MGATG4突变子表型分析第69-72页
     ·⊿MGATG4突变子的菌落形态第69页
     ·⊿MGATG4突变子的生长速度第69-70页
     ·⊿MGATG4突变子的产孢量第70页
     ·⊿MGATG4突变子的分生孢子萌发第70-71页
     ·突变子AMGATG4对大麦的致病性测定第71-72页
   ·MGATG4基因时空表达分析第72-73页
     ·载体构建过程第72-73页
第四章 MGATG3基因的克隆与分析第73-78页
   ·MGATG3基因的确定第73-74页
   ·MGATG3置换载体的构建第74-78页
     ·构建思路第74-75页
     ·基因上游和下游片断的PCR扩增与克隆第75页
     ·基因上下游片断与PBS-HPH载体的连接和酶切验证第75-77页
     ·稻瘟病菌突变子的获得第77-78页
第五章 MGATG7基因的克隆与分析第78-84页
   ·MGATG7基因的确定第78-79页
   ·MGATG7置换载体的构建第79-84页
     ·构建思路第79-80页
     ·基因上游和下游片断的PCR扩增与克隆第80-81页
     ·基因上下游片断与PBS-HPH载体的连接和酶切验证第81-83页
     ·稻瘟病菌突变子的获得第83-84页
第六章 讨论与总结第84-87页
参考文献第87-95页

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