致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-45页 |
1 稻瘟病与稻瘟病菌 | 第11-35页 |
·稻瘟病菌的侵染循环 | 第12-14页 |
·孢子萌发 | 第12页 |
·附着胞的形成 | 第12-13页 |
·侵入栓形成和侵入 | 第13页 |
·侵入后的菌丝分化与扩展 | 第13-14页 |
·产孢与再侵染 | 第14页 |
·稻瘟病菌的致病相关基因 | 第14-32页 |
·参与产孢过程的基因 | 第14-15页 |
·附着胞分化和成熟过程中的功能基因 | 第15-27页 |
·附着胞成熟过程中的功能基因 | 第27-29页 |
·侵入栓形成及侵入相关基因 | 第29-30页 |
·侵入后菌丝分化及扩展相关的基因 | 第30-32页 |
·其他相关基因 | 第32-35页 |
2 细胞自噬 | 第35-43页 |
·细胞自噬的类型 | 第35-36页 |
·细胞自噬发生过程的分子机制 | 第36-41页 |
·细胞自噬发生的诱导以及物质的选择和包装 | 第36-39页 |
·自噬体的形成 | 第39-41页 |
·细胞自噬的信号调控 | 第41-43页 |
·TOR信号途径 | 第42页 |
·CLASS Ⅰ PI3K/PKB途径 | 第42页 |
·GαI3蛋白 | 第42-43页 |
3 本研究的目的和意义 | 第43-45页 |
第二章 材料与方法 | 第45-63页 |
·MGATG3、MGATG4和MGATG7基因确定与序列比对 | 第45页 |
·实验材料 | 第45-48页 |
·细菌菌株以及稻瘟病菌菌株 | 第45页 |
·培养基配制 | 第45-48页 |
·菌株的保存与培养 | 第48页 |
·DNA相关操作 | 第48-59页 |
·常规PCR、长片段PCR(>4KB) | 第48-50页 |
·PCR产物的克隆 | 第50页 |
·序列测定 | 第50页 |
·DNA克隆程序 | 第50-55页 |
·基因组DNA提取 | 第55-56页 |
·SOUTHERN杂交 | 第56-59页 |
·MGATG3、MGATG4和MGATG7基因敲除及突变子功能分析 | 第59-61页 |
·基因置换载体的构建 | 第59页 |
·互补载体的构建 | 第59页 |
·稻瘟病菌原生质体的制备与转化 | 第59-61页 |
·MGATG4基因的GFP表达分析 | 第61页 |
·融合载体的构建 | 第61页 |
·稻瘟病菌突变体的形态学观察 | 第61-63页 |
·生长速度与产孢量 | 第61页 |
·附着胞的诱导 | 第61页 |
·大麦叶片致病性测定 | 第61-63页 |
第三章 MGATG4基因的克隆与分析 | 第63-73页 |
·MGATG4基因的确定 | 第63-64页 |
·MGATG4置换载体的构建 | 第64-69页 |
·构建思路 | 第64-65页 |
·基因上游和下游片断的PCR扩增与克隆 | 第65-66页 |
·基因上下游片断与PBS-HPH载体的连接和酶切验证 | 第66-67页 |
·稻瘟病菌突变子的获得 | 第67-69页 |
·⊿MGATG4突变子表型分析 | 第69-72页 |
·⊿MGATG4突变子的菌落形态 | 第69页 |
·⊿MGATG4突变子的生长速度 | 第69-70页 |
·⊿MGATG4突变子的产孢量 | 第70页 |
·⊿MGATG4突变子的分生孢子萌发 | 第70-71页 |
·突变子AMGATG4对大麦的致病性测定 | 第71-72页 |
·MGATG4基因时空表达分析 | 第72-73页 |
·载体构建过程 | 第72-73页 |
第四章 MGATG3基因的克隆与分析 | 第73-78页 |
·MGATG3基因的确定 | 第73-74页 |
·MGATG3置换载体的构建 | 第74-78页 |
·构建思路 | 第74-75页 |
·基因上游和下游片断的PCR扩增与克隆 | 第75页 |
·基因上下游片断与PBS-HPH载体的连接和酶切验证 | 第75-77页 |
·稻瘟病菌突变子的获得 | 第77-78页 |
第五章 MGATG7基因的克隆与分析 | 第78-84页 |
·MGATG7基因的确定 | 第78-79页 |
·MGATG7置换载体的构建 | 第79-84页 |
·构建思路 | 第79-80页 |
·基因上游和下游片断的PCR扩增与克隆 | 第80-81页 |
·基因上下游片断与PBS-HPH载体的连接和酶切验证 | 第81-83页 |
·稻瘟病菌突变子的获得 | 第83-84页 |
第六章 讨论与总结 | 第84-87页 |
参考文献 | 第87-95页 |