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番茄乙烯受体基因LeETR1和LeETR2的分子生物学研究

中文摘要第1-7页
1 选题依据与文献评述第7-36页
 1.1 选题依据第7-9页
  1.1.1 研究意义与研究动态第7-9页
  1.1.2 研究内容及目的第9页
 1.2 乙烯及乙烯信号感知和传导系统的研究进展第9-23页
  1.2.1 乙烯生物合成与乙烯生理第10-11页
  1.2.2 拟南芥乙烯反应突变体第11-13页
  1.2.3 拟南芥乙烯受体家族第13-15页
  1.2.4 拟南芥乙烯受体的功能第15-16页
  1.2.5 信号向细胞核的传递第16-17页
  1.2.6 拟南芥中的乙烯信号感受与转导模型第17-19页
  1.2.7 番茄乙烯受体第19-23页
 1.3 转基因番茄的研究进展及转基因食品的安全性第23-28页
  1.3.1 转基因延熟番茄的研究第23-24页
  1.3.2 改进番茄营养品质的研究第24-25页
  1.3.3 转基因番茄免疫食品第25页
  1.3.4 基因工程食品的食用安全性第25-28页
 1.4 反义RNA及其在植物基因工程中的应用第28-36页
  1.4.1 反义RNA的作用机理第29-30页
  1.4.2 反义基因或反义RNA的设计第30-31页
  1.4.3 反义RNA技术在植物基因工程中的应用第31-36页
2 番茄乙烯受体基因LeETR1、LeETR2部分序列的克隆及表达特性研究第36-48页
 2.1 材料与方法第36-39页
  2.1.1 质粒、菌种及植物材料第36页
  2.1.2 酶与化学试剂第36-37页
  2.1.3 番茄组织总RNA的提取第37页
  2.1.4 PCR引物的合成第37-38页
  2.1.5 目的基因的克隆第38页
  2.1.6 核酸酶保护分析(RPA)第38-39页
 2.2 结果与讨论第39-47页
  2.2.1 番茄乙烯受体基因LeETR1、LeETR2部分序列的克隆第39-40页
  2.2.2 Epi和VFN8果实中LeETR1 mRNA的表达特性第40-41页
  2.2.3 Epi和VFN8叶片中LeETR1 mRNA的表达特性第41-42页
  2.2.4 Epi和VFN8叶片中LeETR2 mRNA的表达特性第42-43页
  2.2.5 Epi和VFN8果实中LeETR2 mRNA的表达特性第43-44页
  2.2.6 番茄乙烯受体LeETR1和LeETR2可能的作用机制第44-47页
 2.3 小结第47-48页
3 番茄高效再生体系的建立第48-58页
 3.1 材料与方法第48-50页
  3.1.1 植物材料第48-49页
  3.1.2 主要试剂第49页
  3.1.3 培养基第49页
  3.1.4 番茄种子的消毒及无菌苗的培养第49页
  3.1.5 外植体的选择与培养第49-50页
  3.1.6 试管苗的生根与移栽第50页
 3.2 结果与讨论第50-55页
  3.2.1 培养基的选择及植物激素对番茄分化的影响第50-52页
  3.2.2 番茄品种对番茄分化的影响第52页
  3.2.3 外植体类型及接种方式对番茄分化的影响第52页
  3.2.4 继代培养与芽的生根第52-53页
  3.2.5 抗生素对番茄再生的影响第53-54页
  3.2.6 最佳培养条件的确定第54-55页
 3.3 小结第55-58页
4 番茄乙烯受体基因LeETR1、LeETR2反义表达载体的建立第58-71页
 4.1 材料与方法第58-63页
  4.1.1 质粒、菌种及目的基因第58-59页
  4.1.2 酶、化学试剂第59页
  4.1.3 技术线路第59页
  4.1.4 目的基因与载体的酶切第59页
  4.1.5 目的片段的回收与连接第59-60页
  4.1.6 感受态细胞制备及转化第60-61页
  4.1.7 重组克隆的筛选与鉴定第61-62页
  4.1.8 植物表达载体表达载体导入农杆菌第62-63页
  4.1.9 含中间表达载体农杆菌的鉴定第63页
 4.2 结果与讨论第63-70页
  4.2.1 植物表达载体质粒pPZPE1和pPZPE2的构建策略第63-65页
  4.2.2 反义表达载体的PCR及酶切鉴定第65-66页
  4.2.3 根癌农杆菌的转化与鉴定第66-70页
 4.3 小结第70-71页
5 反义乙烯受体基因LeETR1、LeETR2对番茄的遗传转化第71-90页
 5.1 材料与方法第72-77页
  5.1.1 植物材料及培养条件第72页
  5.1.2 根癌农杆菌菌株及载体第72页
  5.1.3 主要试剂第72页
  5.1.4 外植体转化第72-74页
  5.1.5 转基因植株的GUS检测第74页
  5.1.6 番茄叶片DNA的提取第74-75页
  5.1.7 转基因植株的PCR检测第75页
  5.1.8 转基因植株的Southern blot检测第75-77页
 5.2 结果与讨论第77-88页
  5.2.1 番茄叶盘的基因转化和植株的形成第77-79页
  5.2.2 农杆菌类型、浸染方式及农杆菌浓度等对遗传转化的影响第79-81页
  5.2.3 转基因植株的GUS检测第81-82页
  5.2.4 转基因植株的PCR检测第82-84页
  5.2.5 转基因植株的Southern blot检测第84-85页
  5.2.6 转基因植株的生长特性第85-86页
  5.2.7 乙烯受体LeETR1和LeETR2可能的作用机制第86-88页
 5.3 小结第88-90页
展望与后续研究第90-91页
参考文献第91-105页
英文摘要第105-106页

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