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CUEDC2在细胞有丝分裂期的功能研究

缩略词表第1-8页
摘要第8-12页
Abstract第12-16页
前言第16-18页
第一部分 材料与方法第18-24页
 1. 材料及来源第18-19页
   ·菌株、质粒和干涉序列第18页
   ·主要试剂和抗体第18-19页
 2. 实验方法第19-24页
   ·质粒构建第19页
   ·细胞培养和转染第19页
   ·细胞同步化方法第19页
   ·Time Lapse 图像采集方法第19-20页
   ·蛋白纯化方法第20页
   ·免疫共沉淀实验第20-21页
   ·Western Blot 蛋白印记杂交第21页
   ·免疫荧光染色实验第21-22页
   ·免疫荧光定量方法第22页
   ·统计学方法第22页
   ·免疫组织化学实验第22-24页
第二部分 结果第24-50页
 1.CUEDC2 可在有丝分裂期发生磷酸化的修饰第24-29页
   ·CUEDC2 在不同细胞系的有丝分裂期发生磷酸化修饰第24-26页
   ·质谱鉴定CUEDC2 的磷酸化修饰位点第26-27页
   ·CDK1 为CUEDC2 在有丝分裂期的上游激酶第27-29页
 2. 磷酸化的CUEDC2 调控有丝分裂中期至后期的转化第29-34页
   ·干涉CUEDC2 延长了细胞有丝分裂从核膜破裂到后期开始的时间第29-31页
   ·干涉CUEDC2 导致细胞有丝分裂中期阻滞第31页
   ·干涉CUEDC2 造成的有丝分裂中期阻滞并非由于干涉脱靶造成第31-32页
   ·磷酸化的CUEDC2 作用于有丝分裂中期到后期的转化第32-34页
 3. 干涉CUEDC2 并不影响纺锤体检查点的激活第34-39页
   ·干涉CUEDC2 不影响多极纺锤体的形成第34页
   ·干涉CUEDC2 不影响纺锤体的形态及着丝点内张力第34-36页
   ·干涉CUEDC2 不影响微管与着丝粒之间的附着第36-38页
   ·CUEDC2 在有丝分裂期的定位提示其不影响纺锤体检查点的激活第38-39页
 4. 磷酸化的CUEDC2 是APC/C-MCC 复合体的一个调节组分第39-42页
   ·CUEDC2 通过Mad2 对APC/C 进行调控第39-40页
   ·磷酸化的CUEDC2 可与Cdc20 在体外直接相互作用第40-41页
   ·磷酸化的CUEDC2 可与Cdc20 在体内相互作用第41-42页
 5. 过表达CUEDC2 可导致纺锤体检查点的提前灭活以及染色体的错误分离第42-45页
   ·过表达CUEDC2 可导致纺锤体检查点的提前灭活第42-44页
   ·过表达CUEDC2 可导致有丝分裂后期染色体的错误分离第44-45页
 6.CUEDC2 在人体肿瘤中表达量升高第45-50页
   ·验证CUEDC2 抗体的特异性第45-46页
   ·CUEDC2 在人肾癌中表达量升高第46-47页
   ·CUEDC2 在人卵巢癌中表达量升高第47-50页
讨论第50-52页
结论第52-54页
参考文献第54-60页
综述第60-72页
 参考文献第66-72页
个人简历第72-74页
致谢第74-75页

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