| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-28页 |
| ·脂肪酶概述 | 第14-17页 |
| ·脂肪酶的定义和功能 | 第14页 |
| ·脂肪酶的来源和分类 | 第14-16页 |
| ·脂肪酶的酶学特性 | 第16页 |
| ·脂肪酶的结构特点 | 第16-17页 |
| ·低温脂肪酶的研究进展 | 第17-23页 |
| ·低温微生物及低温酶的特点 | 第17页 |
| ·低温脂肪酶适应低温的机制 | 第17-19页 |
| ·低温脂肪酶的来源及筛选 | 第19-20页 |
| ·低温脂肪酶的应用领域 | 第20-23页 |
| ·微生物多样性和基因多样性的研究进展 | 第23-26页 |
| ·研究微生物多样性和基因多样性的意义 | 第23-24页 |
| ·分子水平研究微生物功能基因多样性的方法 | 第24-25页 |
| ·利用宏基因组技术研究微生物功能基因多样性 | 第25页 |
| ·宏基因组文库的筛选方法 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第26页 |
| ·研究路线 | 第26-28页 |
| 第二章 冰川土壤低温脂肪酶基因多样性研究 | 第28-45页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·菌株，载体，工具酶，试剂 | 第28页 |
| ·引物合成 | 第28页 |
| ·溶液 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| ·研究方法 | 第29-32页 |
| ·冰川土壤微生物宏基因组DNA的提取和纯化 | 第29页 |
| ·低温脂肪酶简并引物设计 | 第29-30页 |
| ·冰川土壤脂肪酶基因片段的扩增 | 第30-31页 |
| ·低温脂肪酶基因片段文库的构建 | 第31-32页 |
| ·冰川土壤低温脂肪酶基因多样性分析 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-44页 |
| ·冰川土壤微生物宏基因组的提取和纯化 | 第32-33页 |
| ·低温脂肪酶简并引物设计 | 第33页 |
| ·低温脂肪酶基因片段的扩增 | 第33-34页 |
| ·低温脂肪酶基因片段文库的构建 | 第34页 |
| ·冰川土壤低温脂肪酶基因多样性的分析 | 第34-44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 第三章 冰川土壤产低温脂肪酶微生物的筛选和脂肪酶基因克隆 | 第45-73页 |
| ·实验材料 | 第45-47页 |
| ·菌株，载体，工具酶，试剂 | 第45页 |
| ·引物合成 | 第45-46页 |
| ·溶液 | 第46-47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·研究方法 | 第47-57页 |
| ·冰川土壤中低温脂肪酶产生菌的筛选 | 第47-48页 |
| ·脂肪酶活力测定方法 | 第48-49页 |
| ·产脂肪酶菌种基因组DNA的提取 | 第49-50页 |
| ·产脂肪酶菌种 16S/18S rDNA 的 PCR 扩增和鉴定 | 第50-51页 |
| ·低温脂肪酶基因片段的扩增和鉴定 | 第51-52页 |
| ·低温脂肪酶基因全长的克隆 | 第52-56页 |
| ·低温脂肪酶基因全长序列分析 | 第56-57页 |
| ·低温脂肪酶蛋白质三级结构预测 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-72页 |
| ·冰川土壤中低温脂肪酶产生菌的筛选 | 第57页 |
| ·产脂肪酶菌种基因组总DNA的提取 | 第57页 |
| ·产脂肪酶菌种 16S/18S rDNA 的 PCR 扩增和鉴定 | 第57-59页 |
| ·低温脂肪酶基因片段的扩增和序列分析 | 第59-62页 |
| ·低温脂肪酶基因全长的克隆 | 第62-63页 |
| ·低温脂肪酶基因序列的分析 | 第63-70页 |
| ·低温脂肪酶蛋白质三级结构的预测和分析 | 第70-72页 |
| ·本章小结 | 第72-73页 |
| 第四章 低温脂肪酶的异源表达 | 第73-88页 |
| ·实验材料 | 第73-74页 |
| ·菌株，载体，工具酶，试剂 | 第73页 |
| ·引物合成 | 第73页 |
| ·溶液 | 第73-74页 |
| ·培养基 | 第74页 |
| ·仪器和试剂 | 第74页 |
| ·研究方法 | 第74-83页 |
| ·LipDB5 在大肠杆菌中的表达 | 第74-78页 |
| ·Lip3A和LipXD在毕赤酵母中的表达 | 第78-83页 |
| ·结果与分析 | 第83-87页 |
| ·LipDB5 在大肠杆菌中的表达 | 第83-85页 |
| ·lip3A和LipXD在毕赤酵母中的表达 | 第85-87页 |
| ·本章小结 | 第87-88页 |
| 第五章 讨论 | 第88-91页 |
| 第六章 全文结论 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 作者简历 | 第103页 |
