| Abstract | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| 第一章 研究概述 | 第10-25页 |
| 第一节 课题背景介绍 | 第10-17页 |
| 1.SpiC及其相关背景介绍 | 第10-14页 |
| ·沙门氏菌简介 | 第10-12页 |
| ·SpiC功能背景简介 | 第12-13页 |
| ·SsaM与SpiC之间联系 | 第13-14页 |
| 2.IpaB和Mad2B相关背景知识 | 第14-17页 |
| ·福氏志贺氏菌简介 | 第14页 |
| ·IpaB及Mad2B相关背景介绍 | 第14-17页 |
| 第二节 蛋白质结构学研究方法介绍 | 第17-25页 |
| 1.研究方法总述 | 第17-19页 |
| 2.研究手段详细介绍 | 第19-25页 |
| ·原核细胞表达体系 | 第19-20页 |
| ·pET表达系统 | 第20页 |
| ·蛋白纯化 | 第20-23页 |
| ·亲和柱纯化 | 第21-22页 |
| ·快速液相色谱纯化 | 第22-23页 |
| ·蛋白晶体学介绍 | 第23-25页 |
| 第二章 实验设计与实验结果 | 第25-63页 |
| 第一节 实验设计与方法 | 第25-40页 |
| 1.实验步骤 | 第25页 |
| 2.实验材料、试剂、仪器 | 第25-29页 |
| ·实验所需原始材料 | 第25-27页 |
| ·分子克隆、质粒构建所需材料和试剂 | 第25-27页 |
| ·蛋白表达、纯化所需材料和试剂 | 第27页 |
| ·蛋白结晶所需材料和试剂 | 第27页 |
| ·实验所需溶液与试剂配方和参数 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| 3.实验方法 | 第29-40页 |
| ·基因克隆 | 第30-34页 |
| ·原核宿主表达与检测 | 第34-35页 |
| ·大量表达和纯化 | 第35-37页 |
| ·悬滴法生长晶体的一般方法 | 第37-39页 |
| ·目的蛋白限制性酶切分析 | 第39-40页 |
| 第二节 实验结果及分析 | 第40-63页 |
| 1.SpiC与SsaM及二者复合物的表达与纯化结果 | 第40-55页 |
| 1) SpiC蛋白表达与纯化 | 第40-43页 |
| 2) 全长SpiC的限制性蛋白酶酶切实验 | 第43-44页 |
| 3) SpiC携带其他纯化标签,以及片断表达情况考察 | 第44页 |
| 4) SsaM蛋白表达与纯化 | 第44-45页 |
| 5) SpiC与SsaM的共转化和表达 | 第45-49页 |
| 6) SpiC与SsaM的其他片断共转化表达情况 | 第49-50页 |
| 7) SpiC与SsaM共表达产物Trypsin酶切实验 | 第50-54页 |
| 8) SpiC与SsaM复合物结晶实验 | 第54-55页 |
| 2.Mad2B和IpaB的纯化与二者相互作用的研究 | 第55-63页 |
| 1) Mad2B蛋白表达与纯化 | 第55-56页 |
| 2) IpaB蛋白表达与纯化 | 第56-58页 |
| 3) Mad2B与IpaB片段共纯化实验 | 第58-62页 |
| 4) Mad2B与IpaB片断1-246混合结晶实验 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
