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实时荧光PCR在基因分型与稀有突变检测中的应用

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-15页
第一章 实时PCR用于血小板血型抗原基因分型第15-35页
 第一节 前言第15-20页
   ·血小板血型抗原第15页
   ·HPA分子遗传学基础第15-16页
   ·HPA血清学检测第16-17页
   ·HPA基因分型技术第17-19页
   ·双链置换探针第19-20页
 第二节 材料与方法第20-26页
   ·样品第20页
   ·基因组DNA提取第20页
   ·实验设计第20-21页
   ·引物和荧光双链置换探针的设计和合成第21-22页
   ·变温杂交反应第22-25页
   ·引物筛选及单重实时PCR体系的构建第25页
   ·双重四色实时PCR体系的构建第25页
   ·双重四色实时PCR体系检测150份样品第25页
   ·对照方法检测150份样品第25-26页
 第三节 结果第26-29页
   ·检测体系的建立第26页
   ·150份样品的检测第26-29页
 第四节 讨论第29-31页
 参考文献第31-35页
第二章 实时PCR用于ABO血型基因分型第35-55页
 第一节 前言第35-38页
   ·ABO血型第35-38页
 第二节 材料和方法第38-45页
   ·样品第38-39页
   ·基因组DNA的提取第39页
   ·引物和探针设计第39-42页
   ·引物稀释和探针配置第42-43页
   ·变温杂交反应第43页
   ·实时PCR第43页
   ·灵敏度分析第43-44页
   ·对照方法检测样品第44-45页
 第三节 结果第45-50页
 第四节 讨论第50-53页
 参考文献第53-55页
第三章 实时PCR用于HLA-B27基因检测第55-68页
 第一节 前言第55-57页
   ·强直性脊柱炎与HLA-B27第55-56页
   ·HLA-B27检测方法第56-57页
 第二节 材料和方法第57-62页
   ·样品第57-58页
   ·基因组DNA的提取第58页
   ·引物和探针设计第58-61页
   ·引物稀释和探针配置第61页
   ·实时PCR第61页
   ·对照方法检测样品第61-62页
 第三节 结果第62-63页
 第四节 讨论第63-66页
 参考文献第66-68页
第四章 非小细胞肺癌吉非替尼药物反应性EGFR稀有突变检测第68-116页
 第一节 前言第68-74页
   ·非小细胞肺癌及其治疗第68页
   ·EGFR突变与非小细胞肺癌第68-70页
   ·EGFR稀有突变检测方法第70-72页
   ·ARMS技术和PAP技术第72-73页
   ·研究目的与意义第73-74页
 第二节 材料与方法第74-96页
   ·细胞系DNA和肺癌临床样品来源第74页
   ·基因组DNA的提取第74页
   ·突变质粒的构建第74-77页
   ·试验设计第77-78页
   ·ARMS引物加探针法第78-87页
   ·双链荧光PAP引物法第87-91页
   ·高分辨熔点曲线分析法(HRM)第91-92页
   ·双链荧光置换探针法第92-95页
   ·对照方法检测样品第95-96页
 第三节 结果第96-104页
   ·ARMS引物加探针法第96-98页
   ·双链荧光PAP法第98-99页
   ·HRM法第99-101页
   ·双链荧光置换探针法第101-102页
   ·四种方法特性比较第102-103页
   ·样品检测第103-104页
 第四节 讨论第104-111页
   ·ARMS引物加探针法第104-107页
   ·双链荧光PAP法第107-108页
   ·HRM法第108页
   ·双链荧光置换探针法第108-111页
 参考文献第111-116页
英文缩写索引第116-117页
博士期间发表交流论文第117-118页
致谢第118页

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