摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
第一章 实时PCR用于血小板血型抗原基因分型 | 第15-35页 |
第一节 前言 | 第15-20页 |
·血小板血型抗原 | 第15页 |
·HPA分子遗传学基础 | 第15-16页 |
·HPA血清学检测 | 第16-17页 |
·HPA基因分型技术 | 第17-19页 |
·双链置换探针 | 第19-20页 |
第二节 材料与方法 | 第20-26页 |
·样品 | 第20页 |
·基因组DNA提取 | 第20页 |
·实验设计 | 第20-21页 |
·引物和荧光双链置换探针的设计和合成 | 第21-22页 |
·变温杂交反应 | 第22-25页 |
·引物筛选及单重实时PCR体系的构建 | 第25页 |
·双重四色实时PCR体系的构建 | 第25页 |
·双重四色实时PCR体系检测150份样品 | 第25页 |
·对照方法检测150份样品 | 第25-26页 |
第三节 结果 | 第26-29页 |
·检测体系的建立 | 第26页 |
·150份样品的检测 | 第26-29页 |
第四节 讨论 | 第29-31页 |
参考文献 | 第31-35页 |
第二章 实时PCR用于ABO血型基因分型 | 第35-55页 |
第一节 前言 | 第35-38页 |
·ABO血型 | 第35-38页 |
第二节 材料和方法 | 第38-45页 |
·样品 | 第38-39页 |
·基因组DNA的提取 | 第39页 |
·引物和探针设计 | 第39-42页 |
·引物稀释和探针配置 | 第42-43页 |
·变温杂交反应 | 第43页 |
·实时PCR | 第43页 |
·灵敏度分析 | 第43-44页 |
·对照方法检测样品 | 第44-45页 |
第三节 结果 | 第45-50页 |
第四节 讨论 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-55页 |
第三章 实时PCR用于HLA-B27基因检测 | 第55-68页 |
第一节 前言 | 第55-57页 |
·强直性脊柱炎与HLA-B27 | 第55-56页 |
·HLA-B27检测方法 | 第56-57页 |
第二节 材料和方法 | 第57-62页 |
·样品 | 第57-58页 |
·基因组DNA的提取 | 第58页 |
·引物和探针设计 | 第58-61页 |
·引物稀释和探针配置 | 第61页 |
·实时PCR | 第61页 |
·对照方法检测样品 | 第61-62页 |
第三节 结果 | 第62-63页 |
第四节 讨论 | 第63-66页 |
参考文献 | 第66-68页 |
第四章 非小细胞肺癌吉非替尼药物反应性EGFR稀有突变检测 | 第68-116页 |
第一节 前言 | 第68-74页 |
·非小细胞肺癌及其治疗 | 第68页 |
·EGFR突变与非小细胞肺癌 | 第68-70页 |
·EGFR稀有突变检测方法 | 第70-72页 |
·ARMS技术和PAP技术 | 第72-73页 |
·研究目的与意义 | 第73-74页 |
第二节 材料与方法 | 第74-96页 |
·细胞系DNA和肺癌临床样品来源 | 第74页 |
·基因组DNA的提取 | 第74页 |
·突变质粒的构建 | 第74-77页 |
·试验设计 | 第77-78页 |
·ARMS引物加探针法 | 第78-87页 |
·双链荧光PAP引物法 | 第87-91页 |
·高分辨熔点曲线分析法(HRM) | 第91-92页 |
·双链荧光置换探针法 | 第92-95页 |
·对照方法检测样品 | 第95-96页 |
第三节 结果 | 第96-104页 |
·ARMS引物加探针法 | 第96-98页 |
·双链荧光PAP法 | 第98-99页 |
·HRM法 | 第99-101页 |
·双链荧光置换探针法 | 第101-102页 |
·四种方法特性比较 | 第102-103页 |
·样品检测 | 第103-104页 |
第四节 讨论 | 第104-111页 |
·ARMS引物加探针法 | 第104-107页 |
·双链荧光PAP法 | 第107-108页 |
·HRM法 | 第108页 |
·双链荧光置换探针法 | 第108-111页 |
参考文献 | 第111-116页 |
英文缩写索引 | 第116-117页 |
博士期间发表交流论文 | 第117-118页 |
致谢 | 第118页 |