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深绿木霉REMI突变菌株H6对黄瓜枯萎病的生物防治

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 引言第10-18页
2 材料和方法第18-28页
   ·试验材料第18-20页
     ·供试菌株与转化质粒第18页
     ·供试培养基第18页
     ·供试溶液与试剂第18-19页
     ·液体种子培养基的配制第19-20页
     ·固体发酵培养基配料第20页
     ·液体发酵用培养基的配制第20页
     ·实验用盐碱土第20页
     ·主要仪器和设备第20页
   ·试验方法第20-28页
     ·木霉菌原生质体的制备第20-21页
     ·质粒的提取第21页
     ·木霉菌转化第21页
     ·转化子PCR检测第21-22页
     ·转化子的Southern blotting检测第22-23页
     ·平板对峙培养第23页
     ·转化子孢子悬浮液对病原菌抑制作用第23页
     ·重寄生作用观察第23页
     ·转化子对黄瓜枯萎病的防效第23-24页
     ·H6菌种活化第24页
     ·H6孢悬液的制备第24页
     ·液体种子筛选培养第24页
     ·菌种的固体发酵第24-25页
     ·发酵产物孢子量的计算第25-26页
     ·发酵罐的放大培养及保存第26页
     ·H6菌株液体发酵因子的正交设计第26页
     ·发酵液的防效测定第26页
     ·H6菌剂生物农药的配制第26-27页
     ·H6固体发酵产物的生物防效测定第27页
     ·H6生物农药的生物防效测定第27页
     ·H6固体发酵产物对黄瓜的促进生长和对盐碱土壤的改良作用第27-28页
3 结果与分析第28-50页
   ·深绿木霉菌T23原生质体的制备第28页
   ·pV2质粒提取第28-29页
   ·REMI转化第29页
   ·PCR检测第29-31页
     ·野生菌与转化子DNA的提取与检测第29页
     ·PCR检测第29-31页
   ·Southern blotting第31-32页
     ·探针DNA的获得第31页
     ·Southern杂交检测第31-32页
   ·转化子对病菌拮抗作用第32-34页
   ·转化子孢子悬浮液对病原菌抑制效果第34页
   ·重寄生作用显微观察第34-35页
   ·转化子对黄瓜枯萎病的防效第35页
   ·液体种子培养基的选择第35-39页
   ·固体培养基的选择第39-40页
   ·影响H6菌株产孢的因素第40-41页
     ·发酵培养基厚度第40页
     ·发酵种子液接种量第40-41页
     ·发酵温度第41页
   ·固体发酵罐的放大培养第41-42页
   ·最佳发酵条件的筛选第42-45页
   ·H6固体发酵产物生防效果测定结果第45-46页
   ·H6生物农药生防效果测定第46-47页
   ·不同处理时间对土壤pH值及电导率的影响第47-48页
   ·H6菌剂对黄瓜生长的促进作用第48-50页
4 讨论第50-55页
   ·关于木霉REMI突变体库的建立第50-51页
     ·利用限制性内切酶介导整合技术可获得木霉菌突变株第50页
     ·原生质体制备及限制性内切酶对REMI转化的影响第50-51页
     ·分子检测证明外源基因成功插入第51页
   ·木霉突变菌株的筛选第51页
   ·多功能生防菌剂的创制第51-55页
     ·生防菌剂的制剂类型第51-52页
     ·生防菌剂的使用方法第52页
     ·生防菌剂的多功能性第52-53页
     ·生防菌剂的田间适应性第53页
     ·利用生物工程技术提高木霉菌剂的生产实用性第53-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-62页
个人简历第62-63页
致谢第63页

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