| 缩略语表 | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-14页 |
| 英文摘要 | 第14-18页 |
| 前言 | 第18-20页 |
| 文献回顾 | 第20-37页 |
| 引言 | 第20页 |
| 1 软骨组织与软骨组织工程 | 第20-23页 |
| 2 软骨细胞退变与 MMP 之间的关系 | 第23-28页 |
| 3 RNAi 技术及其在基因治疗中的应用 | 第28-33页 |
| 4 壳聚糖纳米微球作为转染载体转染软骨细胞的相关研究 | 第33-36页 |
| 5 携载 MMP的siRNA质粒的纳米微球转染软骨细胞的展望 | 第36-37页 |
| 实验一 软骨细胞的体外培养与鉴定 | 第37-43页 |
| 1 材料 | 第37页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器及材料 | 第37页 |
| 2 方法 | 第37-39页 |
| ·兔关节软骨细胞体外分离和培养 | 第37-38页 |
| ·单层体外培养的兔关节软骨细胞组织学观察 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-42页 |
| ·大体观察 | 第39-40页 |
| ·HE 染色 | 第40页 |
| ·甲苯胺蓝染色 | 第40页 |
| ·免疫组织化学检测 | 第40-41页 |
| ·番红-O 染色 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 实验二 壳聚糖携载质粒纳米微球体外转染兔关节软骨细胞的实验研究 | 第43-62页 |
| 1 材料 | 第43-44页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器及材料 | 第43-44页 |
| 2 方法 | 第44-50页 |
| ·感受态的制备和质粒的转化、鉴定 | 第44-46页 |
| ·利用复合凝聚法制备壳聚糖-pDNA 纳米微球 | 第46-47页 |
| ·凝胶电泳阻滞实验 | 第47页 |
| ·壳聚糖-pDNA 纳米微球粒径和包裹率的检测 | 第47-48页 |
| ·微球形态的观察 | 第48页 |
| ·体外转染实验 | 第48-49页 |
| ·转染效果和效率的观察 | 第49页 |
| ·壳聚糖-pDNA 纳米微球的细胞毒性实验 | 第49页 |
| ·统计学分析 | 第49-50页 |
| 3 结果 | 第50-58页 |
| ·壳聚糖-pDNA 纳米微球的形成及其理化性质 | 第50-53页 |
| ·CS-pDNA 纳米微球的形态的观察 | 第53-55页 |
| ·壳聚糖-pDNA 纳米微球转染原代兔关节软骨细胞 | 第55-57页 |
| ·壳聚糖-pDNA 纳米微球对原代兔关节软骨细胞增殖的影响 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| 实验三 携载MMP 的siRNA 的壳聚糖纳米微球转染体外培养的兔关节软骨细胞 | 第62-67页 |
| 1 材料 | 第62页 |
| ·实验动物 | 第62页 |
| ·主要试剂和设备 | 第62页 |
| 2 方法 | 第62-64页 |
| ·兔关节软骨细胞的体外培养 | 第62页 |
| ·携载MMP-siRNA 的shRNA 质粒载体的构建 | 第62-63页 |
| ·壳聚糖纳米微球转染体外培养的兔关节软骨细胞 | 第63页 |
| ·实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测基因干扰效率 | 第63-64页 |
| 3 结果 | 第64-66页 |
| ·对MMP3 干扰效率 | 第64-65页 |
| ·对MMP13 的干扰效率 | 第65-66页 |
| 4 讨论 | 第66-67页 |
| 小结 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 附录 | 第77-78页 |
| 个人简历和研究成果 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
