| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-22页 |
| 1 脂肪酶简介 | 第11-12页 |
| 2 脂肪酶催化合成环十五内酯 | 第12-15页 |
| 3 国内外微生物脂肪酶催化合成芳香酯的研究进展 | 第15-16页 |
| 4 脂肪酶产生菌菌种改良的方法 | 第16-20页 |
| 5 本课题的研究意义和研究内容 | 第20-22页 |
| 第二章 脂肪酶产生菌的鉴定及18S rDNA序列的测定 | 第22-37页 |
| 1 实验材料 | 第22-25页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·试剂与仪器 | 第23-25页 |
| 2 方法 | 第25-31页 |
| ·形态学特征 | 第25-26页 |
| ·生理学特征 | 第26-27页 |
| ·菌株 GXU08 18SrDNA序列的克隆 | 第27-30页 |
| ·18S rDNA序列分析 | 第30-31页 |
| 3 结果分析 | 第31-35页 |
| ·形态特征 | 第31-32页 |
| ·生理特征 | 第32-33页 |
| ·分子生物学鉴定结果 | 第33-35页 |
| 4 小结与讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 内酯化脂肪酶产生菌的基因组改组 | 第37-60页 |
| 1 实验材料 | 第37-40页 |
| ·菌株 | 第37页 |
| ·实验试剂 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37-39页 |
| ·试剂 | 第39-40页 |
| ·主要仪器和设备 | 第40页 |
| 2 方法 | 第40-46页 |
| ·菌种的培养和保存 | 第40页 |
| ·原生质体的制备 | 第40-41页 |
| ·原生质体的紫外诱变 | 第41-42页 |
| ·双亲灭活 | 第42页 |
| ·基因组改组 | 第42-45页 |
| ·原理与技术路线 | 第45-46页 |
| 3 结果分析 | 第46-57页 |
| ·白地霉 GXU08菌株原生质体制备 | 第46-50页 |
| ·GXU08菌株原生质体紫外诱变 | 第50-52页 |
| ·双亲灭活 | 第52-53页 |
| ·基因组改组 | 第53-57页 |
| 4 小结与讨论 | 第57-60页 |
| 第四章 内酯化脂肪酶粗纯化以及转化环十五内酯 | 第60-66页 |
| 1 实验材料 | 第60-62页 |
| ·菌株 | 第60-61页 |
| ·培养基 | 第61页 |
| ·试剂与仪器 | 第61-62页 |
| 2 方法 | 第62-63页 |
| ·内酯化脂肪酶粗纯化 | 第62页 |
| ·转化环十五内酯 | 第62-63页 |
| 3 结果分析 | 第63-64页 |
| ·脂肪酶的粗纯化 | 第63-64页 |
| ·诱变菌株与野生型菌株转化环十五内酯的对比 | 第64页 |
| 3 小结与讨论 | 第64-66页 |
| 第五章 重组菌株生长性能与酶学性质的研究 | 第66-78页 |
| 1 实验材料 | 第66-67页 |
| ·菌株 | 第66页 |
| ·培养基 | 第66-67页 |
| ·仪器和设备 | 第67页 |
| 2 方法 | 第67-68页 |
| ·菌株活化 | 第67页 |
| ·种子液培养 | 第67页 |
| ·发酵产酶 | 第67页 |
| ·粗酶液制备 | 第67页 |
| ·粗酶液的保存 | 第67页 |
| ·酶活测定 | 第67-68页 |
| ·重组菌株与野生型菌株生长性能的研究 | 第68页 |
| ·重组菌株与野生型菌株的脂肪酶酶学特性的研究 | 第68页 |
| 3 结果分析 | 第68-76页 |
| ·最佳产酶时间的对比 | 第68-69页 |
| ·培养基初始pH值对发酵产酶影响之间的差异 | 第69-70页 |
| ·最佳发酵温度的对比 | 第70-71页 |
| ·最适酶解温度的对比 | 第71-72页 |
| ·最适酶解pH值的对比 | 第72-73页 |
| ·热稳定性的对比研究 | 第73-75页 |
| ·pH值稳定性的对比研究 | 第75-76页 |
| 4 小结与讨论 | 第76-78页 |
| 第六章 总结与展望 | 第78-81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 附录1 | 第86-87页 |
| 附录2 | 第87-89页 |
| 附录3 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第91页 |