| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第12-27页 |
| ·杀虫晶体蛋白 | 第12-15页 |
| ·杀虫晶体蛋白的类型 | 第12-13页 |
| ·ICPs的杀虫作用机理 | 第13-15页 |
| ·BT杀虫晶体蛋白晶体解析情况及功能研究 | 第15-22页 |
| ·Bt杀虫晶体蛋白晶体解析情况 | 第15-16页 |
| ·解析的晶体蛋白结构的比较 | 第16-18页 |
| ·Bt杀虫晶体蛋白与受体结合 | 第18-19页 |
| ·三个结构域的Loop及残基与杀虫活性的关系 | 第19-21页 |
| ·与通道形成相关的作用机制研究进展 | 第21-22页 |
| ·地下害虫蛴螬及对其有活性的BT CRY8类基因研究进展 | 第22-25页 |
| ·蛋白纯化方法 | 第25-26页 |
| ·分子筛层析 | 第25页 |
| ·离子交换层析 | 第25页 |
| ·亲和层析 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-35页 |
| ·材料 | 第27-29页 |
| ·菌株和质粒 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27-28页 |
| ·仪器设备 | 第28-29页 |
| ·培养基 | 第29页 |
| ·供试昆虫 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-35页 |
| ·cry8Ea1与cry8Ca2基因的亚克隆 | 第29-33页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·模板制备 | 第30页 |
| ·PCR反应 | 第30页 |
| ·酶切分析 | 第30页 |
| ·E.coli质粒DNA提取 | 第30-31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| ·DNA回收 | 第31页 |
| ·连接反应 | 第31页 |
| ·感受态细胞制备 | 第31页 |
| ·E.coli的转化 | 第31-32页 |
| ·基因在大肠杆菌中诱导表达 | 第32页 |
| ·序列测定及分析 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第32-33页 |
| ·Cry8Ea1与Cry8Ca2原毒素的表达与纯化 | 第33页 |
| ·Cry8Ea1与Cry8Ca2原毒素的表达 | 第33页 |
| ·Cry8Ea1与Cry8Ca2蛋白提取 | 第33页 |
| ·Cry8Ea1与Cry8Ca2蛋白的纯化 | 第33页 |
| ·杀虫测定 | 第33-34页 |
| ·数据分析处理 | 第34-35页 |
| 3 实验结果 | 第35-49页 |
| ·cry8Ea1与cry8Ca2活性区基因亚克隆及在大肠杆菌中表达 | 第35-37页 |
| ·含有cry8Ea1与cry8Ca2基因Bt菌株的表达与纯化 | 第37-44页 |
| ·菌体形态特征观察 | 第37页 |
| ·Cry8Ea1与Cry8Ca2菌株的表达 | 第37-38页 |
| ·Cry8Ea1蛋白的纯化 | 第38-42页 |
| ·Cry8Ea1原毒素胰蛋白酶消化条件的摸索 | 第38-39页 |
| ·Cry8Ea1原毒素胰蛋白酶消化后过分子筛 | 第39-40页 |
| ·Cry8Ea1蛋白胰凝乳蛋白酶消化条件摸索 | 第40页 |
| ·Cry8Ea1蛋白胰凝乳蛋白酶消化后过分子筛层析 | 第40-41页 |
| ·阴离子交换层析 | 第41-42页 |
| ·Cry8Ea1蛋白活性区三维结构模拟 | 第42页 |
| ·Cry8Ca2消化毒素的分离纯化 | 第42-44页 |
| ·Cry8Ca2原毒素胰凝乳蛋白酶消化条件摸索 | 第42-43页 |
| ·分子筛层析 | 第43-44页 |
| ·阴离子交换层析 | 第44页 |
| ·Cry8Ea1与Cry8Ca2蛋自生物活性的测定 | 第44-49页 |
| ·Cry8Ea1蛋白生物活性的测定 | 第44-45页 |
| ·Cry8Ca2蛋白生物活性的测定 | 第45页 |
| ·Cry8Ea1与Cry8Ca2蛋白稳定性实验 | 第45-47页 |
| ·Cry8Ca2毒素盐酸胍变性研究 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录 | 第59-60页 |
| 附录A:缩略语中英文注释 | 第59-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第60页 |
