中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
英文缩写词表 | 第11-17页 |
第1章 绪论 | 第17-56页 |
·硒蛋白的研究进展 | 第17-35页 |
·硒蛋白的分类 | 第17-21页 |
·硒蛋白与疾病的关系 | 第21-22页 |
·硒蛋白的生物合成 | 第22-28页 |
参考文献 | 第28-35页 |
·谷胱甘肽过氧化物酶 | 第35-56页 |
·GPX 的分类 | 第35-37页 |
·GPX 的结构特点 | 第37-40页 |
·GPX 的催化机理 | 第40-43页 |
·GPX 的生物学功能 | 第43-44页 |
·GPX 的人工模拟 | 第44-48页 |
参考文献 | 第48-56页 |
第2章 具有 GPX 活性的含硒谷胱甘肽硫转移酶的表达 | 第56-68页 |
·实验材料 | 第57-58页 |
·菌株和质粒 | 第57页 |
·试剂 | 第57页 |
·仪器 | 第57-58页 |
·实验方法 | 第58-60页 |
·定点突变 | 第58页 |
·目的蛋白在细胞中的表达 | 第58-60页 |
·目的蛋白的纯化 | 第60页 |
·纯化产物的 Western blot 分析 | 第60页 |
·实验结果与讨论 | 第60-63页 |
·定点突变 | 第60-61页 |
·ELISA 筛选结果 | 第61-63页 |
·讨论 | 第63-65页 |
·分泌表达 | 第63-64页 |
·真核表达载体 pSelExpress1 | 第64-65页 |
·表达量 | 第65页 |
参考文献 | 第65-68页 |
第3章 seleno-hGSTZ1-1(Ser15Sec)的活性研究 | 第68-82页 |
·实验材料 | 第70页 |
·主要试剂 | 第70页 |
·主要仪器 | 第70页 |
·实验方法 | 第70-71页 |
·GPX 酶活力测定 | 第70页 |
·seleno-hGSTZ1-1(Ser15Sec)的最优 pH 及温度测定 | 第70页 |
·动力学测定 | 第70-71页 |
·统计学分析 | 第71页 |
·同源建模的理论方法 | 第71页 |
·结果 | 第71-74页 |
·GPX 活力测定 | 第71页 |
·最适温度及 pH 值检测 | 第71-72页 |
·Seleno-hGSTZ1-1(Ser15Sec)的动力学研究 | 第72-74页 |
·讨论 | 第74-79页 |
参考文献 | 第79-82页 |
第4章 含硒谷胱甘肽硫转移酶的抗氧化作用 | 第82-107页 |
·实验材料 | 第83页 |
·试剂 | 第83页 |
·主要仪器 | 第83页 |
·实验方法 | 第83-88页 |
·Se-hGSTZ1-1 的制备[13] | 第83-84页 |
·心肌细胞原代培养[13] | 第84页 |
·建立 H2O2诱导氧化应激损伤模型 | 第84页 |
·Se-hGSTZ1-1 安全剂量的选择 | 第84-85页 |
·MTT 法测定心肌细胞的存活率 | 第85页 |
·实验分组 | 第85-86页 |
·脂质过氧化产物丙二醛(Malondialdehyde, MDA)的含量测定 | 第86页 |
·细胞胞浆酶—乳酸脱氢酶(LDH)含量测定 | 第86页 |
·细胞超氧化物歧化酶(SOD)含量测定 | 第86-87页 |
·细胞凋亡率检测 | 第87页 |
·免疫印迹法检测各组细胞中 NF-κB、bcl-2、bax、PPAR-γ蛋白表达情况 | 第87-88页 |
·统计学分析 | 第88页 |
·GST 预保护作用实验结果 | 第88-96页 |
·H2O2对大鼠乳鼠心肌细胞存活率的影响 | 第88页 |
·Se-hGSTZ1-1 安全剂量的选择 | 第88-89页 |
·Se-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞存活率降低的影响 | 第89-90页 |
·Se-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞 MDA 的影响 | 第90-91页 |
·Se-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞 LDH 释放的影响 | 第91页 |
·Se-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞 SOD 的影响 | 第91-92页 |
·Se-hGSTZ1-1 对大鼠心肌细胞凋亡率的影响 | 第92-93页 |
·Se-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞 NF-κB 的影响 | 第93-94页 |
·Se-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞 bcl-2 的影响 | 第94-95页 |
·e-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞 PPAR-γ的影响 | 第95页 |
·Se-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞 bax 的影响 | 第95-96页 |
·GST 治疗作用实验结果 | 第96-100页 |
·Se-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞 MDA 的影响 | 第96-97页 |
·Se-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞 LDH 释放的影响 | 第97页 |
·Se-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞 SOD 的影响 | 第97-98页 |
·Se-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞 NF-κB 的影响 | 第98-99页 |
·Se-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞 PPAR-γ的影响 | 第99页 |
·Se-hGSTZ1-1 对 H2O2诱导的大鼠心肌细胞 bax 的影响 | 第99-100页 |
·讨论 | 第100-103页 |
·Se-hGSTZ1-1 具有 GPX 活性 | 第100-101页 |
·氧化应激与细胞凋亡的关系 | 第101页 |
·Se-hGSTZ1-1 抗氧化的可能分子机制 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-107页 |
结论 | 第107-108页 |
博士期间的科研成果 | 第108-109页 |
致谢 | 第109页 |