| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-28页 |
| ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究进展 | 第13-21页 |
| ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇的发现 | 第13-14页 |
| ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇的理化性质 | 第14-15页 |
| ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇的分布状况 | 第15-16页 |
| ·DON的毒性及其作用机理 | 第16-18页 |
| ·DON的检测方法 | 第18-21页 |
| ·SELEX技术及其研究进展 | 第21-28页 |
| ·SELEX技术基本原理及特点 | 第21-22页 |
| ·SELEX技术的改进 | 第22-24页 |
| ·SELEX技术的应用 | 第24-28页 |
| 第二章 适配子的筛选 | 第28-46页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·主要仪器与设备 | 第28-29页 |
| ·试剂与溶液 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-40页 |
| ·引物及文库 | 第30-31页 |
| ·抗原的选择 | 第31页 |
| ·DON适配子的筛选 | 第31-32页 |
| ·MBSA(Modified Bovine Serum Albumen)的制备 | 第32-33页 |
| ·第一轮筛选 | 第33-37页 |
| ·第二轮筛选 | 第37-38页 |
| ·第三轮筛选 | 第38-39页 |
| ·每轮筛选ssDNA文库与靶分子投入的优化 | 第39-40页 |
| ·结果 | 第40-46页 |
| ·人工抗原的选择 | 第40-41页 |
| ·筛选产物ssDNA及dsDNA的电泳结果 | 第41-43页 |
| ·文库PCR扩增条件优化结果 | 第43-44页 |
| ·ssDNA文库的获得 | 第44-45页 |
| ·每轮筛选ssDNA文库与靶分子投入的优化结果 | 第45页 |
| ·筛选产物与DON亲和力测定 | 第45-46页 |
| 第三章 适配子的克隆测序及分析 | 第46-61页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·试剂及溶液 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-52页 |
| ·富集文库PCR产物的纯化 | 第47页 |
| ·富集文库PCR纯化产物与pUCm-T载体的连接 | 第47-48页 |
| ·感受态细胞的制备与连接产物的转化 | 第48-50页 |
| ·适配子序列分析 | 第50页 |
| ·克隆适配子与DON抗原亲和力的测定 | 第50-51页 |
| ·间接竞争ELOSA筛选DON的适配子 | 第51-52页 |
| ·适配子间接竞争ELOSA抑制曲线的建立 | 第52页 |
| ·结果 | 第52-61页 |
| ·阳性克隆子的筛选及鉴定 | 第52-53页 |
| ·序列测定及分析 | 第53-55页 |
| ·筛选适配子二级结构预测 | 第55-57页 |
| ·克隆适配子与DON抗原相对亲合力的比较 | 第57-58页 |
| ·间接竞争ELOSA筛选DON的适配子 | 第58-59页 |
| ·适配子间接竞争ELOSA抑制曲线的建立 | 第59-61页 |
| 第四章 讨论 | 第61-66页 |
| ·DON适配子筛选的影响因素 | 第61-63页 |
| ·文库的选择 | 第61-62页 |
| ·SELEX筛选条件的优化 | 第62-63页 |
| ·PCR扩增条件的优化 | 第63页 |
| ·银染法聚丙烯酰胺凝胶电泳检测PCR产物 | 第63-64页 |
| ·适配子的分析及下一步研究 | 第64-66页 |
| 第五章 小结 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 个人简介 | 第75页 |