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鸭疫里默氏杆菌检测方法的建立

缩略词第1-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-12页
引言第12-25页
 1 病原学第12-16页
   ·病原的命名与分类地位第12-13页
   ·形态、染色特性第13-14页
   ·培养特性第14页
   ·理化特性第14-15页
   ·血清型第15-16页
 2. 鸭疫里默氏杆菌的诊断方法第16-21页
   ·临床诊断第16-17页
   ·实验室诊断第17-21页
 3 细菌外膜蛋白的简介第21-25页
   ·外膜蛋白的结构组成第21-22页
   ·外膜蛋白的致病作用第22-23页
   ·外膜蛋白的免疫活性第23-25页
试验一 鸭疫里默氏杆菌菌落PCR 检测方法的建立第25-40页
 1 材料第26-27页
   ·菌株第26-27页
   ·试剂第27页
   ·仪器第27页
   ·琼脂糖电泳相关溶液第27页
 2 方法第27-32页
   ·PCR 引物设计第27-28页
   ·菌落DNA 模板制备第28页
   ·常规DNA 模板的制备第28-29页
   ·PCR 扩增第29页
   ·PCR 反应条件的优化第29-31页
   ·特异性试验第31页
   ·敏感性试验第31页
   ·PCR 扩增产物的检测和鉴定第31-32页
   ·PCR 检测方法的检验第32页
   ·常规PCR 与菌落PCR 检测结果比较第32页
 3 结果第32-38页
   ·PCR 扩增结果第32页
   ·菌落PCR 扩增参数的确定第32-34页
   ·特异性第34-35页
   ·敏感性第35-36页
   ·PCR 产物酶切鉴定第36-37页
   ·PCR 扩增第37页
   ·菌落PCR 与常规PCR 的比较第37-38页
 4、讨论第38-40页
试验二 鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白A 基因的克隆表达与免疫印迹第40-58页
 1 材料与方法第40-44页
   ·材料第40-44页
 2 方法第44-51页
   ·鸭疫里默氏杆菌OmpA 基因的原核表达载体的构建与序列分析第44-49页
   ·重组菌的诱导表达第49-50页
   ·重组表达蛋白的纯化第50-51页
   ·表达蛋白的免疫原性分析第51页
 3 结果第51-56页
   ·OmpA 基因的PCR 扩增及序列测定结果第51-52页
   ·pET-OmpA 基因的克隆及鉴定第52-53页
   ·OmpA 重组蛋白的表达及其纯化第53-55页
   ·重组表达蛋白Western blot 检测第55-56页
 4 讨论第56-58页
试验三 鸭疫里默氏杆菌间接ELISA 方法建立第58-71页
 1 材料第58-60页
   ·试验用菌株第58页
   ·鸭疫里默氏杆菌阳性及阴性血清:本实验室制备保存第58页
   ·其它供试参考血清第58页
   ·试验动物第58-59页
   ·试剂及仪器第59页
   ·ELISA 常用试剂第59-60页
 2 方法第60-63页
   ·阳性和阴性血清的制备第60页
   ·间接ELISA 方法的建立第60-63页
 3 结果第63-69页
   ·包被蛋白浓度的测定第63页
   ·抗原最佳包被浓度与血清最佳稀释度的确定第63-65页
   ·OmpA 蛋白抗原包被条件的确定第65页
   ·封闭液的确定第65-66页
   ·封闭时间的确定第66页
   ·血清最佳反应时间的确定第66-67页
   ·酶标二抗工作时间的确定第67-68页
   ·间接ELISA 判定标准的确定第68页
   ·特异性试验第68-69页
   ·重复性试验第69页
 4 结果与讨论第69-71页
结论第71-72页
参考文献第72-80页
致谢第80-81页
作者简介及论文发表情第81-82页
附件第82页

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