| 中文摘要 | 第1-14页 |
| 英文摘要 | 第14-18页 |
| 英文缩写 | 第18-19页 |
| 第一章:文献综述 | 第19-45页 |
| ·bIFN-τ在妊娠识别中的作用 | 第19-33页 |
| ·妊娠识别的启动过程 | 第19-22页 |
| ·黄体溶解的内分泌机制 | 第19-20页 |
| ·黄体溶解过程相关基因表达 | 第20-21页 |
| ·妊娠是阿别过程的实质 | 第21-22页 |
| ·bIFN-τ的结构和分类 | 第22-24页 |
| ·bIFN-τ的结构 | 第22页 |
| ·bIFN-τ的分类 | 第22-23页 |
| ·bIFN-τ的同源性 | 第23-24页 |
| ·bIFN-τ表达调控 | 第24-25页 |
| ·bIFN-τ在妊娠识别中的作用机制 | 第25-31页 |
| ·bIFN-τ对ER、OTR和PR的调节作用 | 第25-28页 |
| ·bIFN-τ对PGI_2合成通路限速酶COX-2的调节 | 第28-29页 |
| ·bIFN-τ对PGE_2和PGF_(2α)合成酶类、转运蛋白和受体的影响 | 第29-30页 |
| ·bIFN-τ对UCRP表达的调节 | 第30-31页 |
| ·bIFN-τ在妊娠识别中的免疫调节作用 | 第31页 |
| ·bIFN-τ蛋白体外表达研究进展 | 第31-33页 |
| ·胚胎植入过程的调控机制 | 第33-42页 |
| ·妊娠识别与胚胎植入的转变 | 第33页 |
| ·胚胎植入过程 | 第33-41页 |
| ·胚胎植入的激素调节 | 第34-35页 |
| ·细胞因子对胚胎植入的调节 | 第35-38页 |
| ·粘附分子与胚胎植入 | 第38-41页 |
| ·水解酶类及其抑制因子 | 第41页 |
| ·免疫与胚胎植入 | 第41-42页 |
| ·本研究意义和内容 | 第42-45页 |
| ·研究意义 | 第42-44页 |
| ·在胚胎移植上的意义 | 第42-43页 |
| ·在生殖生理研究上的意义 | 第43-44页 |
| ·研究内容 | 第44-45页 |
| 第二章:bIFN-τ基因成熟蛋白编码区的克隆和序列分析 | 第45-79页 |
| ·引言 | 第45-46页 |
| ·材料与方法 | 第46-53页 |
| ·试验材料 | 第46-47页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第47-50页 |
| ·试验方法 | 第50-53页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第50页 |
| ·bIFN-τ基因PCR扩增 | 第50-51页 |
| ·bIFN-τ基因PCR产物的纯化与回收 | 第51页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第51页 |
| ·目的基因与pMD18-T载体的连接 | 第51页 |
| ·连接物的转化 | 第51页 |
| ·重组质粒的提取 | 第51-52页 |
| ·重组质粒的鉴定测 | 第52页 |
| ·测序与序列分析 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-73页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第53页 |
| ·bIFN-τ基因PCR扩增 | 第53-54页 |
| ·bIFN-τ基因PCR产物的克隆 | 第54-55页 |
| ·克隆片断测序结果 | 第55-57页 |
| ·bIFN-τ基因及其相关基因序列分析 | 第57-71页 |
| ·不同亚型bIFN-τ基因序列分析 | 第63-66页 |
| ·不同物种IFN-τ基因的序列分析 | 第66-68页 |
| ·牛IFN基因家族成员的序列分析 | 第68-71页 |
| ·bIFN-τ、IFN-τ、bIFN基因的系统发育分析 | 第71-73页 |
| ·不同亚型bIFN-τ基因的聚类分析 | 第71页 |
| ·不同物种IFN-τ基因成熟蛋白CDS序列聚类分析 | 第71-73页 |
| ·牛IFN基因同源区聚类分析 | 第73页 |
| ·讨论分析 | 第73-79页 |
| ·克隆片断的设计 | 第73-74页 |
| ·克隆载体选择的依据 | 第74页 |
| ·IFN-τ基因及其相关基因序列分析 | 第74-76页 |
| ·不同亚型bIFN-τ基因学列分析 | 第74-75页 |
| ·不同物种IFN-τ基因的序列分析 | 第75页 |
| ·牛IFN基因家族成员间序列分析 | 第75-76页 |
| ·IFN-τ基因及其相关基因分子系统发育 | 第76-79页 |
| ·不同亚型bIFN-τ基因的分子系统发育 | 第76-77页 |
| ·不同物种IFN-τ基因的分子系统发育 | 第77页 |
| ·牛IFN基因家族成员分子系统发育 | 第77-79页 |
| 第三章:bIFN-τ组氨酸标签融合蛋白的原核表达和生物信息学分析 | 第79-115页 |
| ·引言 | 第79-80页 |
| ·材料与方法 | 第80-84页 |
| ·试验材料 | 第80页 |
| ·主要仪器设备与试剂 | 第80-82页 |
| ·试验方法 | 第82-84页 |
| ·原核重组表达载体的构建 | 第82-83页 |
| ·原核重组表达载体的鉴定 | 第83页 |
| ·bIFN-τ成熟蛋白的生物信息学分析 | 第83-84页 |
| ·bIFN-τ基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第84页 |
| ·bIFN-τ基因在大肠杆菌中表达条件的优化 | 第84页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测表达产物 | 第84页 |
| ·结果分析 | 第84-107页 |
| ·原核重组表达载体的构建 | 第84-85页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第85-86页 |
| ·原核重组表达质粒的测序 | 第86-87页 |
| ·IFN-τ成熟蛋白氨基酸序列分析和分子系统发育分析 | 第87-94页 |
| ·bIFN-τ表达产物密码子使用频率和适合度分析 | 第94-96页 |
| ·bIFN-τ表达产物和bIFN-τ成熟蛋白的生物信息学分析 | 第96-105页 |
| ·bIFN-τ成熟蛋白的诱导表达 | 第105-106页 |
| ·bIFN-τ成熟蛋白诱导表达条件的优化 | 第106-107页 |
| ·分析讨论 | 第107-115页 |
| ·IFN-τ成熟蛋白氨基酸序列和系统发育分析 | 第107-108页 |
| ·bIFN-τ成熟蛋白及其表达产物的生物信息学预测 | 第108-110页 |
| ·IFN-τ成熟蛋白保守功能位点分析 | 第110-112页 |
| ·表达宿主菌选择的依据 | 第112页 |
| ·表达载体和表达方式的选择 | 第112-114页 |
| ·bIFN-τ诱导表达条件的优化 | 第114-115页 |
| 第四章:重组表达bIFN-τ蛋白的纯化和鉴定 | 第115-138页 |
| ·引言 | 第115-116页 |
| ·材料与方法 | 第116-121页 |
| ·试验材料 | 第116页 |
| ·主要仪器设备与试剂 | 第116-118页 |
| ·试验方法 | 第118-121页 |
| ·大肠杆菌的破碎 | 第118-119页 |
| ·包涵体的洗涤和纯化 | 第119页 |
| ·包涵体的溶解 | 第119页 |
| ·bIFN-τ蛋白洗脱条件优化 | 第119-120页 |
| ·bIFN-τ蛋白的柱上复性 | 第120页 |
| ·bIFN-τ蛋白的脱盐 | 第120页 |
| ·bIFN-τ蛋白的等电点测定 | 第120-121页 |
| ·bIFN-τ蛋白的肽指纹鉴定 | 第121页 |
| ·统计分析 | 第121页 |
| ·结果分析 | 第121-132页 |
| ·大肠杆菌破碎 | 第121-122页 |
| ·包涵体的纯化与溶解 | 第122-124页 |
| ·bIFN-τ蛋白洗脱条件优化 | 第124-126页 |
| ·bIFN-τ蛋白的复性 | 第126-128页 |
| ·bIFN-τ蛋白的脱盐 | 第128页 |
| ·bIFN-τ蛋白等电点测定 | 第128-129页 |
| ·bIFN-τ蛋白的肽指纹鉴定 | 第129-132页 |
| ·分析讨论 | 第132-138页 |
| ·包涵体的纯化和溶解 | 第132-134页 |
| ·bIFN-τ蛋白的亲和层析纯化 | 第134-135页 |
| ·bIFN-τ蛋白的复性和脱盐 | 第135-136页 |
| ·bIFN-τ蛋白的鉴定 | 第136-138页 |
| 第五章:bIFN-τ对牛子宫内膜细胞上妊娠建立相关基因表达的调控 | 第138-173页 |
| ·引言 | 第138-140页 |
| ·材料与方法 | 第140-148页 |
| ·试验材料 | 第140页 |
| ·主要仪器设备与试剂 | 第140-142页 |
| ·试验方法 | 第142-148页 |
| ·牛子宫内膜细胞培养 | 第142-143页 |
| ·试验设计 | 第143页 |
| ·荧光定量PCR分析 | 第143-148页 |
| ·统计分析 | 第148页 |
| ·结果分析 | 第148-164页 |
| ·牛子宫内膜细胞培养 | 第148-150页 |
| ·RNA抽提 | 第150页 |
| ·常规PCR扩增 | 第150-151页 |
| ·荧光定量PCR扩增 | 第151-158页 |
| ·不同试验组基因表达水平 | 第158-162页 |
| ·孕酮和bIFN-τ处理不同时间对基因表达水平的影响 | 第162-164页 |
| ·分析讨论 | 第164-173页 |
| ·牛子宫内膜细胞培养 | 第164页 |
| ·在体激素水平的模拟 | 第164-166页 |
| ·荧光定量PCR技术 | 第166页 |
| ·bIFN-τ对妊娠建立过程相关基因表达的影响 | 第166-168页 |
| ·孕酮对妊娠建立过程相关基因表达的影响 | 第168-170页 |
| ·bIFN-τ与孕酮对妊娠建立过程相关基因调控的协同作用 | 第170-171页 |
| ·bIFN-τ与孕酮在妊娠建立过程中的信号调控网络 | 第171-173页 |
| 第六章:结论 | 第173-176页 |
| 参考文献 | 第176-196页 |
| 附录 | 第196-200页 |
| 致谢 | 第200-201页 |
| 攻读博士期间发表学术论文、参编专著和获奖 | 第201-202页 |
