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樱桃蕃茄中果胶酯酶的基因克隆及在毕赤酵母中表达的初步研究

摘要第1-5页
Abstract第5-12页
1 总论第12-23页
   ·果胶简述第12-16页
   ·果胶酶简介第16-17页
   ·果胶酯酶的酶学特征及生产低甲氧基果胶的作用机理第17-18页
   ·果胶酯酶的活性位及其结构性质分析第18-20页
   ·果胶酯酶分子生物学层次研究浅析第20-21页
   ·果胶酯酶提取及生产研究进展第21-22页
   ·果胶酯酶研究的意义与展望第22-23页
2 樱桃番茄总RNA的提取及定量分析第23-30页
   ·试验材料第23-26页
   ·樱桃番茄总RNA提取方法第26-27页
   ·樱桃番茄总RNA的纯度分析及定量检测第27-28页
   ·试验结果及分析第28-30页
3 樱桃番茄果胶酯酶mRNA的RT-PCR反应第30-40页
   ·试验材料第30-32页
   ·樱桃番茄果胶酯酶cDNA第一链的合成第32-34页
   ·PCR扩增樱桃番茄果胶酯酶基因第34-36页
   ·PCR扩增产物的检验及回收纯化第36-38页
   ·试验结果及分析第38-40页
4 蕃茄果胶酯酶T载体构建及大肠杆菌感受态细胞的转化第40-53页
   ·实验材料第40-43页
   ·番茄果胶酯酶测序载体的构建及感受态细胞的转化第43-47页
   ·质粒的提取第47-48页
   ·重组质粒的PCR鉴定第48-49页
   ·结论第49-53页
5 毕赤酵母表达果胶酯酶基因的初步研究第53-64页
   ·毕赤酵母真核表达系统简介第53-54页
   ·毕赤酵母表达载体的选择第54-55页
   ·试验材料第55-57页
   ·酵母菌株的分离纯化第57页
   ·pPICZaA原核宿主菌TOP10的活化培养第57页
   ·重组表达质粒pPICZaA的构建第57-59页
   ·重组质粒的酶切分析第59页
   ·重组质粒线性化第59-60页
   ·线性化重组DNA转化酵母细胞第60-61页
   ·转化酵母总DNA的提取及PCR鉴定第61-62页
   ·毕赤酵母中外源基因的甲醇诱导表达及果胶酯酶的活性测定第62-64页
6 结论与展望第64-65页
符号注释第65-67页
参考文献第67-72页
作者在读期间科研成果简介第72-74页
致谢第74页

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