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人的红细胞与精子冷冻干燥保存实验研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
符号表第7-10页
目录第10-13页
第一章 绪论第13-38页
   ·研究背景第13-17页
     ·细胞与组织的长期保存简介第13-14页
     ·冷冻干燥保存第14-17页
       ·冷冻干燥保存原理第14-15页
       ·冷冻干燥保存研究历史第15-16页
       ·冷冻干燥保存研究意义第16-17页
   ·细胞冷冻干燥保存研究现状第17-28页
     ·细胞冷冻干燥保存的一般步骤及要点第17-22页
     ·红细胞冷冻干燥保存研究现状第22-24页
     ·精子冷冻干燥保存研究现状第24-28页
   ·细胞冷冻干燥保存过程的数值模拟第28-30页
     ·去除、添加保护剂第28-29页
     ·降温过程中的模型第29页
     ·升华干燥过程的模拟第29-30页
   ·本论文研究内容第30-31页
   ·参考文献第31-38页
第二章 人红细胞冷冻干燥保存中的渗透性损伤分析第38-59页
   ·前言第38-39页
   ·本章概要第39页
   ·红细胞的获取、处理、常规检测及所使用的仪器第39-44页
     ·红细胞的获取和洗涤第39页
     ·血红素回收率检测与分光光度计第39-42页
     ·血细胞分析仪第42页
     ·Bradford法测定蛋白总浓度及红细胞回收率第42-44页
   ·保护剂添加方式的比较第44-46页
     ·不同渗透压的NaGl溶液的配备第44页
     ·向红细胞悬浮液添加NaCl溶液方法的比较第44-45页
     ·不同浓度NaCl溶液添加后Hb溶血率的测定第45页
     ·以不同方式添加后Hb溶血率实验结果第45-46页
   ·保护剂洗涤方法的比较第46-48页
     ·按不同方式洗涤红细胞第46-47页
     ·不同方式洗涤后细胞Hb溶血率结果第47-48页
   ·保护剂添加洗涤后红细胞溶血率与渗透压关系的实验第48-49页
     ·实验方法第48页
     ·不同浓度NaCl溶液添加洗涤后的细胞损伤实验结果第48-49页
   ·KK方程对以不同方式添加洗涤保护剂的模拟第49-53页
   ·人的红细胞冻干中渗透性损伤讨论第53-56页
     ·保护剂不同添加和洗涤方式的比较第53-54页
     ·红细胞冻干保存中所能承受的渗透压极限第54-55页
     ·冻干红细胞复水洗涤时的渗透性损伤第55-56页
   ·本章小结第56页
   ·参考文献:第56-59页
第三章 人红细胞冻干保存中保护剂选择和冻干程序优化第59-93页
   ·引言第59-60页
   ·本章概要第60-61页
   ·真空冷冻干燥机(Advantage EL,Virtis,USA)第61页
   ·人红细胞冻干保护剂的比较和选择第61-76页
     ·渗透性保护剂的比较第61-69页
     ·聚合物PVP和HES的比较第69-75页
     ·冻干保护剂组成第75-76页
   ·人红细胞冻干程序的优化第76-89页
     ·搁板最低温度的设置第76-77页
     ·干燥程序的选择第77-78页
     ·不同降温速率的比较第78-81页
     ·用修正的胞内冰形成模型对不同Lp下低温损伤的模拟第81-88页
     ·本节讨论第88-89页
   ·本章小结第89-90页
   ·参考文献第90-93页
第四章 冻干人红细胞复水及复水损伤机理探讨第93-117页
   ·引言第93-95页
   ·本章概要第95页
   ·不同复水溶液的比较第95-97页
     ·材料与方法第95-97页
     ·结果与讨论第97页
   ·不同复水温度的比较第97-100页
     ·保护剂的配制与红细胞的冻干、保存第97页
     ·冻干红细胞样品的扫描电镜观测第97-98页
     ·冻干红细胞不同温度下复水及回收率测定第98页
     ·实验结果第98-99页
     ·本节讨论第99-100页
   ·不同复水速度(蒸汽预复水与直接复水)的比较第100-105页
     ·红细胞的冷冻干燥与保存第100-101页
     ·蒸汽预复水与直接复水第101页
     ·复水后血红素(Hb)回收率洲定第101-102页
     ·PVP组样品洗涤后细胞恢复率指标测定第102-103页
     ·本节讨论第103-105页
   ·干燥人红细胞膜相变及复水时膜相变损伤机理探讨第105-109页
     ·干燥红细胞血影的制备和干燥第105-107页
     ·干燥红细胞血影相变温度测定第107页
     ·干燥红细胞血影相变温度第107-108页
     ·本节讨论第108-109页
   ·冻干红细胞复水时体积响应及体积变化损伤机理探讨第109-113页
     ·材料与方法第109-111页
     ·实验结果第111-112页
     ·本节讨论第112-113页
   ·本章小结第113-114页
   ·参考文献第114-117页
第五章 人的精子冷东干燥保存保护剂的初步优化第117-137页
   ·引言第117-118页
   ·本章概要第118页
   ·材料与方法第118-121页
     ·冻干保护剂的配制第118-119页
     ·人精子的获取和预处理第119页
     ·冻干保护剂的添加第119页
     ·人精子的冻干第119-120页
     ·冻干样品的复水和保护剂的洗涤第120页
     ·伊红Y染色实验第120页
     ·低渗膨胀检测实验第120-121页
     ·人精子形态的电镜观察第121页
   ·实验结果第121-125页
     ·冻干复水后人精子的伊红Y染色实验第121页
     ·冻干复水后人精子的低渗膨胀实验第121-122页
     ·冻干复水后人精子形态的电镜观测第122-125页
   ·不同保护液的相变性质测定第125-129页
   ·讨论第129-132页
   ·冻干精子复水后微注射与受精能力检测简介第132-134页
   ·本章小结第134页
   ·参考文献:第134-137页
第六章 结论与展望第137-141页
   ·本文主要结论第137-139页
   ·进一步工作展望第139-141页
致谢第141-142页
攻读博士学位期间发表论文第142-143页
攻读博士期间参与的国际会议第143-144页
攻读博士学位期间参与的科研项目第144页
攻读博士学位期间所受到奖励第144页

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