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晋A棉花线粒体基因组BAC文库的构建及重要功能基因的筛选

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 高等植物线粒体基因组(mitochondrial genome)第12-41页
   ·线粒体的起源第13-14页
   ·高等植物的线粒体基因组第14-16页
   ·高等植物线粒体基因组的全序列第16-20页
   ·植物中不同基因组DNA之间的移动第20-24页
     ·基因逃逸、转移和迁移到细胞核中第20-22页
     ·细胞核和叶绿体基因向线粒体基因的转移第22-23页
     ·被转移基因的激活和表达第23页
     ·断裂基因的转移第23-24页
   ·线粒体与细胞质雄性不育第24-29页
     ·与 CMS相关的线粒体 DNA位点第25-27页
     ·与 CMS相关的嵌合基因常常牵涉到线粒体的功能基因区域第27-29页
   ·细胞质雄性不育的不育机制第29-32页
     ·毒性假说第30-31页
     ·其它可能的机制第31-32页
   ·线粒体基因的转录第32-33页
   ·线粒体基因的编辑第33-35页
   ·花粉败育的细胞程序性死亡第35-37页
   ·线粒体基因与细胞核基因之间的相互作用第37-38页
   ·棉花晋 A细胞质雄性不育系的背景来源第38-39页
   ·本研究的目的意义第39-41页
第二章 棉花高分子量线粒体 DNA的提取第41-49页
   ·材料与方法第41-45页
     ·材料第41页
     ·试验材料的准备第41页
     ·高分子量线粒体 DNA的制备第41-43页
     ·胶块的制备第43-44页
     ·胶块质量检测第44页
     ·直接裂解线粒体 DNA的制备第44-45页
   ·结果与讨论第45-48页
     ·实验中,采用暗培养的黄化苗提取线粒体 DNA可以减少叶绿体 DNA的污染第45页
     ·荧光素染色检测线粒体活性第45-46页
     ·提取的mtDNA的污染率检测第46页
     ·提取mtDNA过程中,加入PVP、β-疏基乙醇和BSA有利于提高mtDNA的 产量和质量第46-47页
     ·低熔点琼脂糖包埋法有效地保持了mtDNA的完整性第47-48页
   ·小结第48-49页
第三章 棉花晋 A细胞质雄性不育系及其保持系线粒体基因组 BAC文库的构建第49-64页
   ·材料与方法第50-57页
     ·材料第50-51页
     ·方法第51-55页
     ·基因文库评价第55-57页
   ·结果第57-61页
     ·部分酶切酶最佳用量的确定第57-58页
     ·大量酶切后 DNA片段的选择第58页
     ·大片段 DNA的连接和转化第58-61页
   ·讨论第61-63页
     ·构建基因文库使用的载体系统第61-62页
     ·插入片段大小的估测和稳定性检测第62-63页
     ·转化效率第63页
   ·小结第63-64页
第四章 棉花细胞质雄性不育系及其保持系的 BAC文库的筛选第64-84页
   ·材料与方法第64-71页
     ·材料第64-65页
     ·方法第65-71页
   ·结果与分析第71-81页
     ·棉花线粒体功能基因及保守的orf基因片段的获得和地高辛标记第71-80页
     ·菌落原位杂交(Colony in situ hybridization)第80-81页
   ·讨论第81-83页
     ·选择线粒体功能基因作探针第81页
     ·线粒体功能基因的单基因同源克隆第81-82页
     ·菌落原位杂交第82页
     ·关于 nad4L-orf25基因簇的保守性第82-83页
   ·小结第83-84页
第五章 棉花线粒体基因组的序列测定第84-97页
   ·材料与方法第84-86页
     ·材料第84页
     ·方法第84-86页
   ·结果与分析第86-95页
     ·阳性克隆的酶切、测序第86-90页
     ·棉花线粒体基因组中含有重复序列和外源序列第90-95页
   ·讨论第95-96页
     ·阳性克隆的酶切测序方法第95页
     ·棉花线粒体基因组第95-96页
   ·小结第96-97页
结论第97-98页
创新点第98-99页
参考文献第99-118页
致谢第118-119页
个人简历第119-122页
博士生期间发表的学术论文、专著、重要科研成果第122-123页
博士后期间发表的学术论文、专著、重要科研成果第123-124页
永久通讯方式第124页

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