第一章 绪论 | 第1-22页 |
·山羊痘概述 | 第11-17页 |
·病原学 | 第11-13页 |
·流行病学 | 第13-14页 |
·临床症状和病理变化 | 第14-15页 |
·发病机理 | 第15页 |
·诊断方法 | 第15-17页 |
·防治 | 第17页 |
·病毒的分子生物学特性 | 第17-20页 |
·病毒基因组结构 | 第17-18页 |
·病毒基因的表达 | 第18页 |
·病毒DNA的复制 | 第18-19页 |
·病毒的同源重组 | 第19页 |
·GPV与其它痘病毒之间的关系 | 第19页 |
·p32基因的研究进展 | 第19-20页 |
·研究的目的和意义 | 第20-22页 |
第二章 GPV p32基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 | 第22-40页 |
·材料与方法 | 第22-31页 |
·病毒 | 第22页 |
·载体与菌株 | 第22页 |
·生化试剂及试剂盒 | 第22页 |
·主要仪器设备 | 第22-23页 |
·引物设计 | 第23页 |
·GPV p32基因的克隆与鉴定 | 第23-26页 |
·GPV p32基因重组原核表达载体pET-30-a(+)-p32的构建 | 第26-28页 |
·GPV p32基因重组原核表达载体pGEX-6P-1-p32的构建 | 第28-29页 |
·GPV p32基因重组原核表达载体pPROEX~(TM)HTb-p32的构建 | 第29页 |
·目的基因在大肠杆菌中的诱导表达及表达产物的纯化 | 第29-31页 |
·抗P32蛋白血清的制备 | 第31页 |
·针对组氨酸标签的Western blotting分析 | 第31页 |
·结果 | 第31-38页 |
·GPV p32基因的克隆与鉴定 | 第31-32页 |
·GPV p32基因的序列测定和序列分析 | 第32-34页 |
·GPV p32基因重组原核表达载体pET-30-a(+)-p32的构建 | 第34-35页 |
·GPV p32基因重组原核表达载体pGEX-6P-1-p32的构建 | 第35页 |
·GPV p32基因重组原核表达载体pPROEX~(TM)HTb-p32的构建 | 第35-36页 |
·目的基因在大肠杆菌中的诱导表达及表达产物的纯化 | 第36-38页 |
·针对组氨酸标签的Western blotting分析 | 第38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第三章 GPV p32基因在杆状病毒表达系统中的表达 | 第40-49页 |
·材料与方法 | 第40-44页 |
·生化试剂及试剂盒 | 第40页 |
·引物设计 | 第40页 |
·原代BTC的制备及GPV在BTC中的增殖 | 第40页 |
·兔抗GPV高免血清的制备 | 第40-41页 |
·兔抗GPV高免血清的琼扩鉴定 | 第41页 |
·转移载体的构建及鉴定 | 第41-42页 |
·重组杆状病毒的构建及纯化 | 第42-43页 |
·重组病毒的鉴定 | 第43页 |
·P32蛋白的表达及Western blotting分析 | 第43-44页 |
·结果 | 第44-47页 |
·细胞病变 | 第44-45页 |
·兔抗GPV高免血清的琼扩鉴定 | 第45页 |
·重组杆状病毒转移载体质粒的构建 | 第45页 |
·重组杆状病毒的构建及纯化 | 第45-46页 |
·重组杆状病毒的PCR鉴定 | 第46页 |
·P32蛋白的SDS-PAGE与Western blotting分析 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-49页 |
第四章 全文结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
附录 | 第55-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简历 | 第60页 |