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山羊痘病毒p32基因的克隆与表达

第一章 绪论第1-22页
   ·山羊痘概述第11-17页
     ·病原学第11-13页
     ·流行病学第13-14页
     ·临床症状和病理变化第14-15页
     ·发病机理第15页
     ·诊断方法第15-17页
     ·防治第17页
   ·病毒的分子生物学特性第17-20页
     ·病毒基因组结构第17-18页
     ·病毒基因的表达第18页
     ·病毒DNA的复制第18-19页
     ·病毒的同源重组第19页
     ·GPV与其它痘病毒之间的关系第19页
     ·p32基因的研究进展第19-20页
   ·研究的目的和意义第20-22页
第二章 GPV p32基因的克隆及在大肠杆菌中的表达第22-40页
   ·材料与方法第22-31页
     ·病毒第22页
     ·载体与菌株第22页
     ·生化试剂及试剂盒第22页
     ·主要仪器设备第22-23页
     ·引物设计第23页
     ·GPV p32基因的克隆与鉴定第23-26页
     ·GPV p32基因重组原核表达载体pET-30-a(+)-p32的构建第26-28页
     ·GPV p32基因重组原核表达载体pGEX-6P-1-p32的构建第28-29页
     ·GPV p32基因重组原核表达载体pPROEX~(TM)HTb-p32的构建第29页
     ·目的基因在大肠杆菌中的诱导表达及表达产物的纯化第29-31页
     ·抗P32蛋白血清的制备第31页
     ·针对组氨酸标签的Western blotting分析第31页
   ·结果第31-38页
     ·GPV p32基因的克隆与鉴定第31-32页
     ·GPV p32基因的序列测定和序列分析第32-34页
     ·GPV p32基因重组原核表达载体pET-30-a(+)-p32的构建第34-35页
     ·GPV p32基因重组原核表达载体pGEX-6P-1-p32的构建第35页
     ·GPV p32基因重组原核表达载体pPROEX~(TM)HTb-p32的构建第35-36页
     ·目的基因在大肠杆菌中的诱导表达及表达产物的纯化第36-38页
     ·针对组氨酸标签的Western blotting分析第38页
   ·讨论第38-40页
第三章 GPV p32基因在杆状病毒表达系统中的表达第40-49页
   ·材料与方法第40-44页
     ·生化试剂及试剂盒第40页
     ·引物设计第40页
     ·原代BTC的制备及GPV在BTC中的增殖第40页
     ·兔抗GPV高免血清的制备第40-41页
     ·兔抗GPV高免血清的琼扩鉴定第41页
     ·转移载体的构建及鉴定第41-42页
     ·重组杆状病毒的构建及纯化第42-43页
     ·重组病毒的鉴定第43页
     ·P32蛋白的表达及Western blotting分析第43-44页
   ·结果第44-47页
     ·细胞病变第44-45页
     ·兔抗GPV高免血清的琼扩鉴定第45页
     ·重组杆状病毒转移载体质粒的构建第45页
     ·重组杆状病毒的构建及纯化第45-46页
     ·重组杆状病毒的PCR鉴定第46页
     ·P32蛋白的SDS-PAGE与Western blotting分析第46-47页
   ·讨论第47-49页
第四章 全文结论第49-50页
参考文献第50-55页
附录第55-59页
致谢第59-60页
作者简历第60页

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