第1章 文献综述 | 第1-28页 |
·多结构域碳水化合物活性酶 | 第13页 |
·碳水化合物活性酶 | 第13页 |
·碳水化合物结合结构域 | 第13页 |
·CBM的研究现状 | 第13-16页 |
·CBM功能分析的研究技术 | 第16-26页 |
·PCR | 第16-17页 |
·核苷酸序列xn的克隆 | 第17-18页 |
·目的蛋白Xn的表达 | 第18-23页 |
·目的蛋白Xn的纯化 | 第23-24页 |
·目的蛋白Xn的功能分析 | 第24-26页 |
·CBM研究的意义 | 第26页 |
·CBM34的概述 | 第26-28页 |
·CBM34的分布 | 第26页 |
·CBM34的研究现状 | 第26-28页 |
第2章 绪论 | 第28-29页 |
·研究目的和意义 | 第28页 |
·研究内容 | 第28-29页 |
·PCR扩增Tt apux21 | 第28页 |
·重组质粒pEX21的诱导表达 | 第28页 |
·Tt APuX21的功能分析 | 第28-29页 |
第3章 实验材料与方法 | 第29-40页 |
·实验材料 | 第29页 |
·菌种和质粒 | 第29页 |
·购买试剂 | 第29页 |
·自配试剂 | 第29页 |
·引物 | 第29页 |
·PCR扩增Tt apux21 | 第29-31页 |
·冻干菌种的处理 | 第29-30页 |
·模板菌液的配制 | 第30页 |
·PCR反应体系和反应条件 | 第30-31页 |
·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检验 | 第31页 |
·PCR产物的扫描检验 | 第31页 |
·Tt apux21的克隆 | 第31-34页 |
·Tt apux21的准备 | 第31页 |
·表达载体的准备 | 第31-32页 |
·Tt apux21与表达载体的连接 | 第32页 |
·连接产物转化DH5α | 第32-33页 |
·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第33页 |
·重组质粒转化Tuner | 第33-34页 |
·重组质粒pEX21的诱导表达 | 第34-35页 |
·诱导表达 | 第34页 |
·SDS-PAGE检验诱导结果 | 第34-35页 |
·融合蛋白的纯化 | 第35-37页 |
·诱导表达 | 第35页 |
·融合蛋白无细胞液的制备 | 第35-36页 |
·Talon~(TM)树脂的准备 | 第36页 |
·融合蛋白的纯化 | 第36页 |
·纯化蛋白的SDS-PAGE检验 | 第36页 |
·纯化蛋白的扫描检验 | 第36-37页 |
·Tt APuX21的功能分析 | 第37-40页 |
·Tt APuX21与水溶性碳水化合物结合特性的定性分析 | 第37-38页 |
·Tt APuX21与水溶性碳水化合物结合特性的定量分析 | 第38-39页 |
·Tt APuX21与不溶性碳水化合物结合特性分析 | 第39-40页 |
第4章 研究结果与分析 | 第40-53页 |
·PCR扩增Tt apux21 | 第40-42页 |
·Tt apux21 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检验 | 第40-41页 |
·Tt apux21 PCR产物的扫描检验 | 第41-42页 |
·小结 | 第42页 |
·Tt apux21的克隆 | 第42-44页 |
·阳性克隆的筛选 | 第42-43页 |
·阳性克隆的鉴定 | 第43-44页 |
·重组质粒pEX21的诱导表达 | 第44页 |
·融合蛋白的纯化 | 第44-46页 |
·纯化蛋白的SDS-PAGE检验 | 第44-45页 |
·纯化蛋白的扫描检验 | 第45-46页 |
·Tt APuX21的功能分析 | 第46-53页 |
·Tt APuX21与水溶性碳水化合物结合特性的定性分析 | 第46-47页 |
·Tt APuX21与水溶性碳水化合物结合特性的定量分析 | 第47-51页 |
·Tt APuX21与不溶性碳水化合物结合特性分析 | 第51-53页 |
第5章 结论与讨论 | 第53-55页 |
·结论 | 第53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
·Tt APuX21与TVA I X21氨基酸序列的比对及两者关系 | 第53页 |
·结合特性的比较 | 第53-54页 |
·Tt APuX21与α-1,4-糖苷键的特异性结合 | 第54页 |
·Tt APuX21的关键氨基酸 | 第54页 |
·建议 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
附录 | 第59-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
在学期间所发表的文章及参加的课题 | 第72页 |