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结构域TtAPuX21的研究

第1章 文献综述第1-28页
   ·多结构域碳水化合物活性酶第13页
     ·碳水化合物活性酶第13页
     ·碳水化合物结合结构域第13页
   ·CBM的研究现状第13-16页
   ·CBM功能分析的研究技术第16-26页
     ·PCR第16-17页
     ·核苷酸序列xn的克隆第17-18页
     ·目的蛋白Xn的表达第18-23页
     ·目的蛋白Xn的纯化第23-24页
     ·目的蛋白Xn的功能分析第24-26页
   ·CBM研究的意义第26页
   ·CBM34的概述第26-28页
     ·CBM34的分布第26页
     ·CBM34的研究现状第26-28页
第2章 绪论第28-29页
   ·研究目的和意义第28页
   ·研究内容第28-29页
     ·PCR扩增Tt apux21第28页
     ·重组质粒pEX21的诱导表达第28页
     ·Tt APuX21的功能分析第28-29页
第3章 实验材料与方法第29-40页
   ·实验材料第29页
     ·菌种和质粒第29页
     ·购买试剂第29页
     ·自配试剂第29页
     ·引物第29页
   ·PCR扩增Tt apux21第29-31页
     ·冻干菌种的处理第29-30页
     ·模板菌液的配制第30页
     ·PCR反应体系和反应条件第30-31页
     ·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检验第31页
     ·PCR产物的扫描检验第31页
   ·Tt apux21的克隆第31-34页
     ·Tt apux21的准备第31页
     ·表达载体的准备第31-32页
     ·Tt apux21与表达载体的连接第32页
     ·连接产物转化DH5α第32-33页
     ·阳性克隆的筛选和鉴定第33页
     ·重组质粒转化Tuner第33-34页
   ·重组质粒pEX21的诱导表达第34-35页
     ·诱导表达第34页
     ·SDS-PAGE检验诱导结果第34-35页
   ·融合蛋白的纯化第35-37页
     ·诱导表达第35页
     ·融合蛋白无细胞液的制备第35-36页
     ·Talon~(TM)树脂的准备第36页
     ·融合蛋白的纯化第36页
     ·纯化蛋白的SDS-PAGE检验第36页
     ·纯化蛋白的扫描检验第36-37页
   ·Tt APuX21的功能分析第37-40页
     ·Tt APuX21与水溶性碳水化合物结合特性的定性分析第37-38页
     ·Tt APuX21与水溶性碳水化合物结合特性的定量分析第38-39页
     ·Tt APuX21与不溶性碳水化合物结合特性分析第39-40页
第4章 研究结果与分析第40-53页
   ·PCR扩增Tt apux21第40-42页
     ·Tt apux21 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检验第40-41页
     ·Tt apux21 PCR产物的扫描检验第41-42页
     ·小结第42页
   ·Tt apux21的克隆第42-44页
     ·阳性克隆的筛选第42-43页
     ·阳性克隆的鉴定第43-44页
   ·重组质粒pEX21的诱导表达第44页
   ·融合蛋白的纯化第44-46页
     ·纯化蛋白的SDS-PAGE检验第44-45页
     ·纯化蛋白的扫描检验第45-46页
   ·Tt APuX21的功能分析第46-53页
     ·Tt APuX21与水溶性碳水化合物结合特性的定性分析第46-47页
     ·Tt APuX21与水溶性碳水化合物结合特性的定量分析第47-51页
     ·Tt APuX21与不溶性碳水化合物结合特性分析第51-53页
第5章 结论与讨论第53-55页
   ·结论第53页
   ·讨论第53-55页
     ·Tt APuX21与TVA I X21氨基酸序列的比对及两者关系第53页
     ·结合特性的比较第53-54页
     ·Tt APuX21与α-1,4-糖苷键的特异性结合第54页
     ·Tt APuX21的关键氨基酸第54页
     ·建议第54-55页
参考文献第55-59页
附录第59-71页
致谢第71-72页
在学期间所发表的文章及参加的课题第72页

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