| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-20页 |
| ·野油菜黄单胞菌(XANTHOMONAS CAMPESTRIS)概况 | 第8-14页 |
| ·黄单胞菌的分类地位 | 第8页 |
| ·黄单胞菌的形态和特征 | 第8-9页 |
| ·黄单胞菌基因组研究概况 | 第9-10页 |
| ·野油菜黄单胞菌一些重要的致病因子 | 第10-14页 |
| ·胞外多糖的研究进展 | 第14-19页 |
| ·胞外多糖的结构 | 第14-15页 |
| ·胞外多糖的性质和应用 | 第15-16页 |
| ·胞外多糖的生物合成 | 第16-19页 |
| ·EPS的生物合成 | 第16页 |
| ·与EPS生物合成相关的基因 | 第16-17页 |
| ·EPS合成的调控和结构修饰 | 第17-19页 |
| ·本工作的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-36页 |
| ·材料 | 第20-25页 |
| ·本研究所用的菌株和质粒见表2.1 | 第20页 |
| ·培养基、培养条件及菌种保存 | 第20-22页 |
| ·抗生素及其贮存、使用浓度 | 第22页 |
| ·溶液与缓冲液 | 第22-25页 |
| ·方法 | 第25-36页 |
| ·常规PCR反应 | 第25-27页 |
| ·反转录PCR | 第27页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第27-28页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第28页 |
| ·质粒的提取 | 第28页 |
| ·总DNA的提取 | 第28页 |
| ·总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·限制性内切酶酶切 | 第29页 |
| ·DNA连接 | 第29-30页 |
| ·电脉冲感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·转化 | 第30页 |
| ·三亲本接合 | 第30-31页 |
| ·Xcc 8004基因组上目标基因的整合突变体的构建 | 第31-33页 |
| ·胞外多糖的检测 | 第33页 |
| ·胞外酶的检测 | 第33-34页 |
| ·植株的致病性试验 | 第34页 |
| ·细菌在寄主中的生长繁殖的测定 | 第34页 |
| ·GUS(β-葡糖苷酸酶)活性检测 | 第34-35页 |
| ·过敏反应试验 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-53页 |
| ·XC3813、XC3814、XC3815的生物信息学分析 | 第36-38页 |
| ·XC3813-XC3815的突变及互补 | 第38-42页 |
| ·XC3813、XC3814、XC3815的突变 | 第38-40页 |
| ·PCR扩增内部同源片段 | 第38-39页 |
| ·将同源片段连接到载体pK18mob上 | 第39页 |
| ·突变体的筛选及验证 | 第39-40页 |
| ·突变体的功能互补 | 第40-42页 |
| ·互补片段的扩增 | 第40-41页 |
| ·将互补片段连接到载体上 | 第41页 |
| ·功能互补菌的验证 | 第41-42页 |
| ·突变体的表型分析 | 第42-50页 |
| ·突变体的生长特性 | 第42-44页 |
| ·突变体在完全培养基中的生长测定 | 第42-43页 |
| ·突变体在基本培养基中的生长测定 | 第43页 |
| ·突变体的温度敏感性检测 | 第43-44页 |
| ·EPS检测 | 第44-46页 |
| ·突变体的EPS平板检测 | 第44-45页 |
| ·突变体的EPS产量检测 | 第45页 |
| ·互补质粒在8004中的表达 | 第45-46页 |
| ·LPS分析 | 第46-47页 |
| ·突变体的致病性实验 | 第47-49页 |
| ·突变体在寄主中的致病性检测 | 第47-48页 |
| ·突变体在寄主的叶内生长 | 第48页 |
| ·过敏性反应 | 第48-49页 |
| ·突变体的胞外蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶检测 | 第49-50页 |
| ·突变体与生物膜的形成 | 第50页 |
| ·该基因簇与GUM基因簇的调控关系 | 第50-51页 |
| ·XC3813、XC3814、XC3815的转录单位分析 | 第51-53页 |
| ·总RNA的提取 | 第51-52页 |
| ·反转录PCR | 第52-53页 |
| 第四章 小结与讨论 | 第53-55页 |
| ·突变体的生长繁殖 | 第53页 |
| ·突变体与胞外多糖的生物合成相关 | 第53页 |
| ·突变体的一些理化性质 | 第53-54页 |
| ·基因簇的结构分析 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第65页 |
