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脑缺血预处理相关新基因Mipu1的表达,亚细胞定位及其小鼠同源基因的克隆

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-12页
缩略词第12-13页
前言第13-15页
技术路线第15-17页
第一部分 大鼠全脑缺血预处理及缺血-再灌注模型的复制第17-25页
 材料与方法第17-19页
  1.材料第17-18页
   ·实验动物与主要器械第17-18页
   ·仪器与试剂第18页
  2.方法第18-19页
   ·动物分组第18页
   ·动物模型制作第18-19页
   ·标本处理第19页
   ·脑水含量测定第19页
   ·组织学改变观察第19页
   ·统计学处理第19页
 结果第19-20页
  1.脑水含量的测定第19-20页
  2.组织学改变观察第20页
 讨论第20-23页
 图第23-25页
第二部分 Mipul在大鼠脑缺血预处理后的表达第25-37页
 材料与方法第26-32页
  1.材料第26-27页
   ·实验动物与主要器械第26页
   ·仪器与试剂第26-27页
  2.方法第27-32页
   ·动物分组第27页
   ·动物模型制作第27页
   ·标本处理第27页
   ·Northern blot检测Mipu1表达第27-32页
 结果第32页
  1.组织总PNA的提取第32页
  2.PCR扩增探针第32页
  3.Northern blot检测Mipul在大鼠脑缺血预处理后不同时间点的表达第32页
 讨论第32-35页
 图第35-37页
第三部分 Mipu1在神经胶质细胞中的亚细胞定位第37-50页
 材料和方法第37-44页
  1.材料第37-40页
   ·细胞第37页
   ·载体和菌株第37-38页
   ·仪器第38页
   ·试剂第38-39页
   ·试剂配制第39-40页
  2.方法第40-44页
   ·细胞株培养、冻存与复苏第40-41页
   ·细菌活化、培养与冻存第41页
   ·RT-PCR扩增Mipu1最大ORF第41-43页
   ·Mipu1与GFP的融合表达质粒Mipu1-pEGFP-N1的构建第43-44页
   ·Mipu1蛋白在正常和活性氧刺激时的亚细胞定位第44页
 结果第44-45页
  1.加端PCR扩增Mipu1的ORF第44页
  2.Mipu1-pEGFP-N1重组质粒的鉴定第44页
  3.Mipu1蛋白在正常和活性氧刺激时的亚细胞定位第44-45页
 讨论第45-47页
 图第47-50页
第四部分 小鼠Mipu1同源基因的克隆和特性分析第50-68页
 材料与方法第50-53页
  1.材料第50-51页
   ·试剂第50-51页
   ·引物第51页
  2.方法第51-53页
   ·EST拼接第51页
   ·RT-PCR验证小鼠Mipu1基因的最大ORF第51-52页
   ·RT-PCR检测小鼠Mipu1基因在各组织中的表达第52-53页
   ·生物信息学分析Mipu1的核酸和蛋白质特征第53页
 结果第53-56页
  1.电子克隆第53-55页
  2.RT-PCR验证小鼠Mipu1基因的最大ORF第55页
  3.RT-PCR检测小鼠Mipu1基因在各组织中的表达第55页
  4.小鼠Mipu1基因的核酸与蛋白质特性的生物信息学分析第55-56页
   ·小鼠Mipu1基因的cDNA特性分析第55页
   ·小鼠Mipu1基因的染色体定位第55页
   ·小鼠Mipu1基因的基因组结构第55页
   ·小鼠Mipu1基因的蛋白质特性分析第55-56页
   ·小鼠Mipu1基因与大鼠Mipu1基因的同源性分析第56页
 讨论第56-58页
 图第58-68页
结论第68-69页
创新和意义第69-70页
参考文献第70-74页
附录第74-77页
综述1 脑缺血-再灌注的基因研究第77-86页
 一、概述第77页
 二、脑缺血-再灌注反应相关基因第77-81页
 三、展望第81页
 参考文献第81-86页
综述2 星形胶质细胞在脑缺血耐受中的作用第86-94页
 一、概述第86-87页
 二、脑缺血时星形胶质细胞在新陈代谢和物质交换中的作用第87页
 三、星形胶质细胞与缺血后脑水肿第87-88页
 四、星形胶质细胞与炎症因子、营养因子第88-89页
 五、星形胶质细胞与其他相关因子第89-90页
 六、展望第90页
 参考文献第90-94页
攻读学位期间主要研究成果第94-95页
致谢第95-96页

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