| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-12页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 技术路线 | 第15-17页 |
| 第一部分 大鼠全脑缺血预处理及缺血-再灌注模型的复制 | 第17-25页 |
| 材料与方法 | 第17-19页 |
| 1.材料 | 第17-18页 |
| ·实验动物与主要器械 | 第17-18页 |
| ·仪器与试剂 | 第18页 |
| 2.方法 | 第18-19页 |
| ·动物分组 | 第18页 |
| ·动物模型制作 | 第18-19页 |
| ·标本处理 | 第19页 |
| ·脑水含量测定 | 第19页 |
| ·组织学改变观察 | 第19页 |
| ·统计学处理 | 第19页 |
| 结果 | 第19-20页 |
| 1.脑水含量的测定 | 第19-20页 |
| 2.组织学改变观察 | 第20页 |
| 讨论 | 第20-23页 |
| 图 | 第23-25页 |
| 第二部分 Mipul在大鼠脑缺血预处理后的表达 | 第25-37页 |
| 材料与方法 | 第26-32页 |
| 1.材料 | 第26-27页 |
| ·实验动物与主要器械 | 第26页 |
| ·仪器与试剂 | 第26-27页 |
| 2.方法 | 第27-32页 |
| ·动物分组 | 第27页 |
| ·动物模型制作 | 第27页 |
| ·标本处理 | 第27页 |
| ·Northern blot检测Mipu1表达 | 第27-32页 |
| 结果 | 第32页 |
| 1.组织总PNA的提取 | 第32页 |
| 2.PCR扩增探针 | 第32页 |
| 3.Northern blot检测Mipul在大鼠脑缺血预处理后不同时间点的表达 | 第32页 |
| 讨论 | 第32-35页 |
| 图 | 第35-37页 |
| 第三部分 Mipu1在神经胶质细胞中的亚细胞定位 | 第37-50页 |
| 材料和方法 | 第37-44页 |
| 1.材料 | 第37-40页 |
| ·细胞 | 第37页 |
| ·载体和菌株 | 第37-38页 |
| ·仪器 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38-39页 |
| ·试剂配制 | 第39-40页 |
| 2.方法 | 第40-44页 |
| ·细胞株培养、冻存与复苏 | 第40-41页 |
| ·细菌活化、培养与冻存 | 第41页 |
| ·RT-PCR扩增Mipu1最大ORF | 第41-43页 |
| ·Mipu1与GFP的融合表达质粒Mipu1-pEGFP-N1的构建 | 第43-44页 |
| ·Mipu1蛋白在正常和活性氧刺激时的亚细胞定位 | 第44页 |
| 结果 | 第44-45页 |
| 1.加端PCR扩增Mipu1的ORF | 第44页 |
| 2.Mipu1-pEGFP-N1重组质粒的鉴定 | 第44页 |
| 3.Mipu1蛋白在正常和活性氧刺激时的亚细胞定位 | 第44-45页 |
| 讨论 | 第45-47页 |
| 图 | 第47-50页 |
| 第四部分 小鼠Mipu1同源基因的克隆和特性分析 | 第50-68页 |
| 材料与方法 | 第50-53页 |
| 1.材料 | 第50-51页 |
| ·试剂 | 第50-51页 |
| ·引物 | 第51页 |
| 2.方法 | 第51-53页 |
| ·EST拼接 | 第51页 |
| ·RT-PCR验证小鼠Mipu1基因的最大ORF | 第51-52页 |
| ·RT-PCR检测小鼠Mipu1基因在各组织中的表达 | 第52-53页 |
| ·生物信息学分析Mipu1的核酸和蛋白质特征 | 第53页 |
| 结果 | 第53-56页 |
| 1.电子克隆 | 第53-55页 |
| 2.RT-PCR验证小鼠Mipu1基因的最大ORF | 第55页 |
| 3.RT-PCR检测小鼠Mipu1基因在各组织中的表达 | 第55页 |
| 4.小鼠Mipu1基因的核酸与蛋白质特性的生物信息学分析 | 第55-56页 |
| ·小鼠Mipu1基因的cDNA特性分析 | 第55页 |
| ·小鼠Mipu1基因的染色体定位 | 第55页 |
| ·小鼠Mipu1基因的基因组结构 | 第55页 |
| ·小鼠Mipu1基因的蛋白质特性分析 | 第55-56页 |
| ·小鼠Mipu1基因与大鼠Mipu1基因的同源性分析 | 第56页 |
| 讨论 | 第56-58页 |
| 图 | 第58-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 创新和意义 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 附录 | 第74-77页 |
| 综述1 脑缺血-再灌注的基因研究 | 第77-86页 |
| 一、概述 | 第77页 |
| 二、脑缺血-再灌注反应相关基因 | 第77-81页 |
| 三、展望 | 第81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 综述2 星形胶质细胞在脑缺血耐受中的作用 | 第86-94页 |
| 一、概述 | 第86-87页 |
| 二、脑缺血时星形胶质细胞在新陈代谢和物质交换中的作用 | 第87页 |
| 三、星形胶质细胞与缺血后脑水肿 | 第87-88页 |
| 四、星形胶质细胞与炎症因子、营养因子 | 第88-89页 |
| 五、星形胶质细胞与其他相关因子 | 第89-90页 |
| 六、展望 | 第90页 |
| 参考文献 | 第90-94页 |
| 攻读学位期间主要研究成果 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |